Inleiding tot macrofagen
De ontdekking van macrofagen dateert uit 1882, toen bioloog Ellie Metchnikoff ze ontdekte tijdens het bestuderen van primitieve dieren die geen adaptieve immuunmechanismen hadden en deze cellen fagocyten noemde. Macrofagen zijn een heterogene groep immuuncellen met een hoge mate van plasticiteit en een verscheidenheid aan functies, waaronder weefselontwikkeling en homeostase in vivo, verwijdering van celresten, eliminatie van pathogenen en modulatie van ontstekingsreacties. Verschillende inducerende signalen kunnen macrofagen activeren om hun eigen morfologie en fysiologische kenmerken te veranderen.
Figuur 1 oorsprong macrofaag
Door het concept van helper T-cellen (Th) te lenen, wordt de activeringsstatus van macrofagen doorgaans vereenvoudigd in termen van activeringsmodaliteit in twee categorieën: klassiek geactiveerde macrofagen, CAM's, en alternatief geactiveerde macrofagen, AAM's. M1-macrofagen produceren pro-inflammatoire cytokinen, die weerstand bieden aan pathogene invasie maar ook schade aan organismen veroorzaken; M2-macrofagen scheiden anti-inflammatoire cytokinen af en spelen een rol bij weefselherstel en -reconstructie en tumorvorming.
Figuur 2 Verschillende fenotypes, celoppervlaktemarkers en functies van macrofagen
Het is de moeite waard om op te merken dat de twee macrofaagfenotypes niet absoluut antagonistisch gedifferentieerd zijn, d.w.z. de M1- en M2-fenotypes zijn niet wederzijds exclusief maar bestaan vaak naast elkaar, en kunnen dus niet eenvoudigweg worden beschouwd als volledig verschillende macrofaagpopulaties. Macrofaagpolarisatiemarkers worden gewoonlijk op verschillende niveaus tot expressie gebracht op macrofagen van verschillende fenotypes, en macrofagen van verschillende fenotypes kunnen onder bepaalde omstandigheden interconversie ondergaan. Bij wondgenezing in vivo vertonen macrofagen een pro-inflammatoir M1-secretieprofiel in de vroege fase, met een hoog vermogen om antigenen te presenteren en interleukinen IL-12 en IL-23 te produceren, die celproliferatie remmen en weefselschade veroorzaken, terwijl macrofagen in de late genezingsfase overschakelen naar een anti-inflammatoir M2-genexpressieprofiel, dat ontsteking en wondgenezing bevordert door de productie van angiogene mediatoren, zoals TGF-β, VEGF en EGF, enzovoort. afnemen en wondgenezing.
Figuur 3 Mechanismen van de belangrijkste fenotypes van macrofaagactivering bij weefselherstel, regeneratie en fibrose
In vivo-onderzoek
Macrofagen zijn de enige cellen die in elk orgaan in het lichaam aanwezig zijn en worden aangetroffen in de opperhuid, het hoornvlies en het binnenste van gewrichten zonder bloedvaten. Een van de belangrijkste methoden om hun in vivo biologie te bestuderen is macrofaaguitputting. In vivo macrofaaguitputting is een methode om macrofagen te verwijderen met behulp van fysicochemische of genetische technieken. Deze methode wordt nu veel gebruikt om de rol van macrofagen in diermodellen van ziekten te bestuderen en om de mechanismen van immunopathologie of ontstekingsschade te bestuderen, zoals ontstekingsziekten: allergische astma, diabetes, obesitas, atherosclerose, auto-immuunziekte-gerelateerde studies; en andere ziektegebieden: tumoren, virale-geassocieerde ziekten, weefselregeneratie en andere gerelateerde studies. De clodronaatliposoommethode is momenteel de meest gebruikte methode voor macrofaaguitputting.
Clodronaat Liposomen
Sinds Prof. Nico van Rooijen met succes een Clodronate Liposomes in vivo-situatie celverwijderingsmiddel heeft ontwikkeld door gebruik te maken van het endocytosemechanisme van macrofagen om clodronaat in de cel te brengen, waar chloorfosforzuur vrijkomt, dat apoptose van macrofagen kan veroorzaken wanneer een bepaalde concentratie wordt bereikt, waardoor het doel van macrofaagverwijdering wordt bereikt.Dit reagens wordt op grote schaal gebruikt als het meest volwassen en handige hulpmiddel ter wereld voor het verwijderen van macrofagen.
Figuur 4 Schematisch diagram van het principe van het opruimen van macrofagen
Benaderingen van verschillende organisaties (alleen ter informatie)
| Orgaan/Macrofaag | Dosering (20-25g/muis) |
| Milt/Rode pulpa macrofagen | Enkele dosis: 200 µl/muis (IV of IP). |
| Lever-/Kuffercellen | Enkele dosis: 200 µl/muis (IV of IP). |
| Long-/alveolaire macrofagen | IV (150-200 µl) gecombineerd met intratracheaal of intranasaal (50 µl) geeft de beste resultaten. |
| lymfeklier | Injectie (100-200 µl)/muis; specifieke doseringsschema's zijn in de literatuur te vinden. |
| Hersenen/microglia | Intracerebroventriculaire toegang tot cerebrospinaal vocht, 10 µl/muis, 50 µl/rat. |
| Bloed/Monocyten | 150-200 µl/muis (IV), Maximale uitputtingssnelheid wordt binnen 24 uur bereikt, maar maximale uitputtingssnelheid na 1-7 dagen is afhankelijk van de stam. |
Productaanbeveling
| Productnaam | Artikelnummer | Specificatie |
| 40337ES08 | 5 ml | |
| 40337ES10 | 10 ml | |
| 40338ES08 | 5 ml | |
| 40338ES10 | 10 ml |