1、Kern enzymmateriaal-Taq DNA Polymerase

Naarmate de toepassingstestgebieden worden uitgebreid en de vraag op de markt toeneemt, kan wildtype Taq DNA-polymerase niet langer volledig aan de eisen voldoen. YeasenHet ZymeEditor™-enzymmodificatieplatform van heeft Taq DNA-polymerase uitgebreid en gericht gemodificeerd om te voldoen aan verschillende toepassingsbehoeften. Hiermee is een reeks hot-start Taq DNA-polymerasen gelanceerd die geschikt zijn voor voorgemengde, remmerresistente, ultra-schone en andere toepassingen.

• Superieure stabiliteit: Geformuleerd in een complete premixoplossing met primers en probes, is er na behandeling bij 37°C gedurende 7 dagen geen verandering in de detectie van lage concentraties.

Figuur 1: Met behulp van HBV-nucleïnezuur als template werd een qPCR complete premixoplossing bereid met 10726ES en werden alle componenten behalve de template getest op versnelde stabiliteit bij 37°C gedurende 7 dagen. De resultaten toonden aan dat er geen significante veranderingen waren in Ct-waarden en fluorescentiewaarden bij hoge, gemiddelde en lage concentraties, wat aangeeft dat de premixoplossing bereid met 10726ES stabiele prestaties heeft.

• Laag gastheer-gDNA-residu: Het resterende E. coli-genoom-DNA bedraagt ​​minder dan 0,5 kopieën per 100 E.

Figuur 2: Lineair bereik van E. coli genomisch DNA: 30 fg/μL tot 300 pg/μL, met een correlatiecoëfficiënt R2 van 0,9999. (B) Residu E. coli genomisch DNA in drie batches van Hieff UCF.ME® Sensitive Taq DNA Polymerase is minder dan 0,5 kopieën per 100 U.

2、Kern enzymmateriaal-Reverse Transcriptase

Als een van de belangrijkste componenten van de RT-qPCR-reactie moet reverse transcriptase een hogere reverse transcriptiesnelheid, hogere syntheseopbrengst en betere hittebestendigheid bezitten. Om reverse transcriptase te verkrijgen die geschikter is voor RT-qPCR, Yeasen Biotech heeft de Hifair®-serie van reverse transcriptases op basis van M-MLV ontwikkeld door middel van genetische modificatie.Deze enzymen kenmerken zich door een lagere RNaseH-activiteit, een hogere thermische stabiliteit en een sterker continu synthesevermogen.

• Het kan de reactietemperatuur van 58℃ weerstaan ​​en is geschikt voor reverse transcriptie van complexe RNA-sjablonen

Figuur 3: Hifair® V Reverse Transcriptase en de geïmporteerde merk T* reverse transcriptase werden geïncubeerd bij 55°C en 58°C gedurende 30 minuten om resterende enzymactiviteit te detecteren. De resultaten tonen aan dat Hifair® V Reverse Transcriptase 70% activiteit behoudt na incubatie bij 58°C gedurende 30 minuten, wat aanzienlijk hoger is dan het geïmporteerde merk.

• Superieure detectiegraad bij RT-qPCR vergeleken met andere merken, met een detectiebereik van 1 pg tot 1 μg

Figuur 4: Met behulp van 293T-cel totaal RNA in concentraties variërend van 1 pg tot 1 μg (7 gradiënten) als template, werd reverse transcriptie uitgevoerd met behulp van Hifair® V one-step RT-gDNA digestie SuperMix voor qPCR (Cat#11142), V* en T*. Het resulterende cDNA werd vervolgens onderworpen aan qPCR voor kwantitatieve analyse. De resultaten geven aan dat de gevoeligheid van 11142ES 1 pg kan bereiken, met een detectiepercentage dat superieur is aan dat van concurrerende producten.

3、Andere enzymen en enzymremmers: RNase-remmer, UDG-enzym

Yeasen Biotech biedt een verscheidenheid aan enzymen en enzymremmers die gevalideerd zijn voor industriële IVD-toepassingen, waaronder RNase-remmers en UDG-enzymen, en biedt een rijke selectie van hoogwaardige grondstoffenoplossingen voor de ontwikkeling en productie van een breed scala aan in-vitrodiagnostische producten. Deze enzymgerelateerde producten worden veel gebruikt bij de bescherming van moleculaire detectiedoelproducten.

RNase remmer：Yeasen drukt recombinante muis-/varkens-RNase-remmers uit en zuivert deze in een oplosbare vorm binnen E. coli, die op brede schaal verschillende soorten RNases (RNase A, B, C) kunnen remmen zonder de activiteit van polymerasen te onderdrukken. Deze remmers zijn gevalideerd voor wijdverbreid gebruik in meerdere toepassingen zoals RT-PCR/qPCR, RNA-seq, cDNA-klonering en bibliotheekconstructie. Naast conventionele RNase-remmers, Yeasen heeft ook RNase-remmers ontwikkeld die zijn verwerkt met de UCF.ME® ultra-low-residu-technologie. Deze remmers hebben een lager gastheerresidu en zijn geschikt voor toepassingen met strengere eisen voor achtergrondbacteriën. Ze helpen bij het oplossen van achtergrondbacteriële interferentie bij de detectie van pathogenen en verbeteren de nauwkeurigheid van de detectie.

Uracil DNA-glycosylase (UDG/UNG-enzym):Uracil-DNA glycosylase (UDG-enzym) kan, wanneer gebruikt in combinatie met dUTP, een PCR-besmettingspreventiesysteem opzetten. Yisheng's thermolabiele, lage UDG-enzym kan de restactiviteit van conventionele UDG-enzymen na inactivering vermijden, wat kan leiden tot degradatie van dU-bevattende amplificatieproducten bij kamertemperatuur. Het voorkomt ook vals-positieve resultaten in PCR-resultaten veroorzaakt door achtergrondbacteriën aanwezig in moleculaire enzymen. Dit is cruciaal voor het nauwkeurig identificeren van infectieuze pathogenen en het helpen bij de klinische diagnose van infecties en infectieziekten.

Taq DNA Polymerase Antilichaam:Niet-specifieke amplificatie is een van de belangrijkste problemen die de prestaties van PCR aanzienlijk beïnvloeden, en hot start-technologie kan niet-specifieke amplificatie effectief verminderen. Het hot start-enzym dat is gemodificeerd met antilichamen heeft een hoge afdichtingsefficiëntie en uitstekende prestaties, en is stabiel bij kamertemperatuur met een snelle afgiftesnelheid van enzymactiviteit.Het dual-antibody hot start Taq-enzym ontwikkeld door Yisheng Biotech sluit niet alleen de 5'→3' polymerase-activiteit van het Taq-enzym af, maar sluit tegelijkertijd ook de 5'→3' exonuclease-activiteit af. Deze duale aanpak voorkomt effectief niet-specifieke amplificatie veroorzaakt door mispairing of primer-dimeren en voorkomt ook de generatie van niet-specifieke signalen als gevolg van de degradatie van probes of primers, waardoor de stabiliteit van de reagentia dubbel wordt verbeterd.

4、Universele hoogwaardige één-buis qPCR Master Mix

Yeasen Biotech biedt hoogwaardige qPCR-reagentia, met een krachtige hot-start Taq-polymerase gecombineerd met een geoptimaliseerd buffersysteem. Het bedrijf levert een reeks producten, waaronder universele mastermixen, alles-in-één mastermixen, genotyperende mastermixen en gevriesdroogde mastermixen. Deze reagentia worden gekenmerkt door hun gebruiksgemak, hoge gevoeligheid en sterke stabiliteit, die de ontwikkeling van uw moleculaire diagnostische producten versnellen.

• goede veelzijdigheid：Het is geschikt voor meerdere typen primers en probes (er zijn meer dan 40 verschillende typen targets geverifieerd) en heeft uitstekende amplificatieprestaties;
• ik Super volledige premixstabiliteit: stabiel bij 37℃ gedurende 14 dagen, 4℃ gedurende 28 dagen, herhaald invriezen en ontdooien 50 keer;

• Hoge gevoeligheid en goede specificiteit: de gevoeligheid kan 0,25 kopie/μL detecteren, en de specificiteit van 48 gaten heeft geen negatieve piek;
• Ondersteuning snel programma:compatibel met snel programma, 30min kan resultaten opleveren;
• dUP/UDG anti-vervuilingssysteem: Het dUTP/UDG-antivervuilingssysteem wordt geïntroduceerd om aerosolvervuiling effectief te voorkomen;
• Toepassing op meerdere platforms en meerdere systemen: Bio-Rad CFX96, ABI Q5, 7500, Slan, Tianlong, enz.

Afbeelding 5: Op basis van de stabiliteitsstudie van het all-in-one voorgemengde reagens werd 16710ES op drie verschillende manieren behandeld (4°C, 37°C en vries-dooicycli). De experimentele groepen werden respectievelijk 7 dagen behandeld bij 4°C en 37°C en onderworpen aan 50 vries-dooicycli, terwijl de controlegroep (opgeslagen bij -20°C) werd geëvalueerd op stabiliteit onder vier multiplex-amplificatiesystemen (Groepen 1, 2 en 4 zijn quadruplex-amplificatiesystemen en Groep 3 is een triplex-amplificatiesysteem). De resultaten toonden aan dat de afwijking van Ct-waarden (ΔCt) tussen de experimentele en controlegroepen binnen ±0,5 lag en de afwijking van de fluorescentiewaarde binnen 15% lag, wat bewijst dat YeasenHet alles-in-één voorgemengde reagens van bezit een uitstekende stabiliteit bij multiplex-amplificatie.

5、Universele hoogwaardige RT-qPCR Master Mix

One-step RT-qPCR-reagentia integreren de superieure prestaties van reverse transcriptase en hot-start-enzymen, aangevuld met een geoptimaliseerd buffersysteem, wat snelle en gevoelige detectie van single-digit copy-templates mogelijk maakt. Gevalideerd door verschillende klantmarkten, waaronder luchtwegaandoeningen, dierepidemieën en onderzoekssystemen, kunnen deze reagentia voldoen aan de behoeften van verschillende toepassingsrichtingen.

• goede veelzijdigheid：Het is geschikt voor qPCR-amplificatie en detectie van nucleïnezuren van pathogene micro-organismen, menselijke genomen, planten en andere soorten；
• Hoge gevoeligheid：Het zorgvuldig geoptimaliseerde buffersysteem verbetert de detectiegevoeligheid van sjablonen met een lage concentratie tot 250 kopieën/ml；
• dUP/UDG anti-vervuilingssysteem：Het dUTP/hitte-labiele UDG-antivervuilingssysteem wordt geïntroduceerd om de aerosolvervuiling van producten efficiënt af te breken, vals-positieve resultaten te verminderen en authentieke resultaten te garanderen；
• Ondersteuning snel programma: compatibel met snel programma, 40min kan resultaten opleveren;
• Super stabiliteit: stabiel bij 37℃ gedurende 14 dagen, 10 keer herhaald invriezen en ontdooien.

Evaluatie van detectiegevoeligheid

Figuur 6: Gebruik maken van Yeasen's RT-qPCR premix (16630ES) en een vergelijkbaar product van Leverancier-A, werd de detectie van vier pathogene doelen gelijktijdig uitgevoerd (Human Parainfluenza Virus HPIV2, Human Parainfluenza Virus HPIV4, Respiratoir Syncytieel Virus HRVA en Rhinovirus RSVA). De resultaten gaven aan dat de detectiegevoeligheid van 16630ES hoger was dan die van Leverancier-A.

Productaanbeveling

产品类型	产品名称	货号
PCR-enzymserie	Hieff UNICON® Hotstart E-Taq DNA-polymerase, 5 U/μL	10726ES
	Hifair® V Reverse Transcriptase (200 U/μL)	11300ES
	Uracil DNA-glycosylase (UDG/UNG), hittelabiel, 1 U/μL	10303ES
	Muizen-RNase-remmer (40 U/µL)	10603ES
	dNTP-mix (elk 25 mM)	10125ES
Ultra-schone PCR-enkele enzymserie met ultra-laag gastheerresidu	Hieff UCF.ME® Hotstart-gevoelige Taq DNA-polymerase (5 U/μL)	14314ES
	Hifair UCF.ME® V Reverse Transcriptase (200 U/μL)	14608ES
	UCF.ME® Uracil DNA Glycosylase (UDG/UNG), hittelabiel, 1 U/μL	14466ES
	UCF-certificaat.ME® Muizen RNase-remmer (40 U/µL)	14672ES
Lyo-Ready PCR-mono-enzymserie	Hieff UNICON® HotStart E-Taq DNA-polymerase, glycerolvrij (5U/μL)	14316ES
	Hifair® V Reverse Transcriptase, Glycerolvrij (600 U/μL)	11301ES
	Uracil DNA-glycosylase (UDG), hittelabiel (1 U/μL, glycerolvrij)	10707ES
	Muizen-RNase-remmer (200 U/µL, glycerolvrij)	10703ES
RT-qPCR-mastermix	Hifair® C203P1 Multiplex One Step RT-qPCR-sondekit (UDG Plus)	16630ES
	Hifair® V Multiplex One Step RT-qPCR-sondekit (UDG Plus)	11899ES
	Hifair® Lyo Multiplex One Step RT-qPCR-kit	11831ES
qPCR-mastermix	Hieff Unicon® Universele TaqMan Pro U+ qPCR-mix (één tube)	16710ES
	Hieff Unicon® Universele TaqMan Multiplex qPCR Master Mix (UDG plus)	13891ES
	Hieff Unicon® Superpro Ⅰ TaqMan qPCR Master Mix (UDG plus)	11827ES
	Hieff Unicon® Purepro Ⅰ TaqMan qPCR Master Mix (UDG plus)	11853ES
	Hieff Unicon® Universele TaqMan Multiplex qPCR Master Mix (UDG plus)	11893ES