Achtergrond
Transferrine, ook bekend als transferrine (TRF, Tf), is verantwoordelijk voor het transporteren van ijzer dat door het spijsverteringskanaal wordt opgenomen en ijzer dat door de afbraak van rode bloedcellen wordt vrijgegeven. Het komt het beenmerg binnen in de vorm van een trivalent ijzercomplex (Tf-Fe3+) voor de productie van volwassen rode bloedcellen. Transferrine is voornamelijk aanwezig in plasma. De transferrine in plasma levert ijzer aan de meeste weefsels van het lichaam, terwijl in gebieden die het niet kan bereiken, de transferrine die door deze weefsels zelf wordt gesynthetiseerd, ijzeroverdracht in het lokale gebied produceert.
Figuur 1. Structuur van transferrine
Menselijke transferrine wordt voornamelijk in de lever gesynthetiseerd. Het is een enkelketenglycoproteïne dat bestaat uit twee lobben die zich bevinden aan de homologe N-terminus en C-terminus. Menselijke transferrine bevat 678 aminozuren, een isoelektrische punt van 5,9 en een moleculair gewicht van 76 kD. Elk molecuul transferrine kan 2 trivalente ijzerionen (Fe3+). De interactie tussen transferrine en Fe3+ hangt af van de pH. Bij pH 7,4 binden transferrine en Fe3+ efficiënt, en bij zure pH scheiden de twee zich.
Bestaan
Holo-transferrine, gedeeltelijk verzadigde transferrine, apo-transferrine
Functionele mechanismen
Transferrine (Tf) bindt ijzer door interactie met zijn receptor, Transferrine Receptor 1 (TfR1). TfR1 is een glycoproteïne dat tot expressie komt op het celoppervlak en bestaat uit twee homodimere subeenheden die verbonden zijn door disulfidebindingen. Op het celoppervlak interageert Tf met Fe3+ om holo-Tf te vormen en bindt aan de TfR1-receptor, waarbij het het endosoom binnengaat onder endocytose. In de zure endosoomomgeving scheidt Fe3+ zich af van Tf en reduceert STEAP3 Fe3+ tot Fe2+, dat naar het cytoplasma wordt getransporteerd door divalente metaaliontransporteur 1 (DMT1). Vervolgens vormt Tf dat Fe3+ vrijgeeft een Tf/TfR1-complex met TfR1 en migreert terug naar het celoppervlak door exocytose. Op het celoppervlak scheidt transferrine (Tf) zich af van de receptor TfR1 om apo-Tf te worden en bindt het zich vervolgens opnieuw met Fe3+ om deel te nemen aan de ijzercyclus. Nadat het hele proces is voltooid, worden Tf en TfR1 gerecycled en gaan ze de volgende cyclus van cellulaire ijzeropname in.
Figuur 2. Mechanismediagram van de transferrinecyclus[1]
De belangrijkste functie van transferrine
- Voorkom de vorming van vrije radicalen en bescherm de celgroei.
- Antibacterieel, steriliserend, ontgiftend
- Behoud celproliferatie en groei
- Bevordert de extracellulaire ijzeropslag en -transport
Bronnen van transferrine
| Bron | Veiligheid | Batchverschillen | |
| Natuurlijk geëxtraheerde transferrine | Extract uit menselijk en runderplasma | Slechte veiligheid, het eindproduct kan ziekteverwekkers bevatten | Transferrine wordt uit verschillende partijen menselijk serum of runder serum gewonnen en de werking ervan varieert sterk |
| Recombinant transferrine | Uitgedrukt in prokaryotische en eukaryotische cellen | Goede veiligheid, het eindproduct bevat geen ziekteverwekkers | Elke batch wordt tot expressie gebracht met behulp van dezelfde cellijn, met stabiele prestaties |
Producteigenschappen
Goede veiligheid: Het product heeft meerdere kwaliteitscontroles en tests ondergaan, waardoor besmetting door ziekteverwekkers is voorkomen;
Lage toxiciteit: De cytotoxiciteit is zeer laag en heeft geen invloed op volgende experimenten;
Stabiele prestaties: Elke batch wordt tot expressie gebracht vanuit dezelfde cellijn, met minimale prestatieverschillen en een hoge eiwitzuiverheid
Eenvoudig te bedienen: voeg het product eenvoudig toe aan de basis;
Breed toepasbaar: kan worden gebruikt voor de kweek van verschillende soorten cellen.
Veelgestelde vragen
Vraag 1: Moet geëxtraheerde transferrine of recombinante transferrine worden toegevoegd aan serumvrij kweekmedium?
A: Geëxtraheerde transferrine heeft gebreken zoals slechte veiligheid en grote verschillen van batch tot batch. Met name wanneer geëxtraheerde transferrine wordt toegevoegd aan serumvrij kweekmedium voor celkweek, kan het menselijke of dierlijke pathogenen (zoals het gekkekoeienziektevirus, het Creutzfeldt-Jakob-virus en andere onbekende pathogenen) in cellen brengen en cellen besmetten. Recombinant transferrine vermijdt de mogelijkheid van besmetting met pathogenen volledig, dus recombinant transferrine moet worden toegevoegd aan serumvrij kweekmedium.
Vraag 2: Moet ijzerverzadigde (Holo) transferrine of apo (Apo) transferrine aan het kweekmedium worden toegevoegd?
A: Wanneer het kweekmedium geen ijzer bevat of het ijzergehalte laag is, kunt u ervoor kiezen om ijzerverzadigde (Holo) transferrine toe te voegen. Wanneer het kweekmedium rijk is aan ijzer, kunt u kiezen voor apo-transferrine.
Vraag 3: Wat is beter, ijzerverzadigde (Holo) transferrine of apo (Apo) transferrine?
A: Het is onmogelijk om het effect van beide theoretisch vast te stellen. Hiervoor is experimenteel onderzoek nodig.
Vraag 4: Wat is de concentratie transferrine in serumvrij kweekmedium?
Antwoord: De concentratie van transferrine is gerelateerd aan het celtype. De specifieke concentratie is gerelateerd aan de celstatus, celconcentratie en het experimentele doel.Algemene primaire cellen: 5-100 mg/L; Chinese hamster ovariumcellen: 10-50 mg/L; hybridoma- en Vero-cellen: 5-20 mg/L
Bestelgegevens
| Productnaam | Productnummer | Specificatie |
| 40102ES60/80 | 100 mg | |
| Bovine Transferrine (HOLO) | 40103ES60/80 | 100mg/1g |
| Menselijke transferrine (afgeleid van menselijk plasma) | 40133ES60/76/80 | 100mg/500mg/1g |
| 92288ES60/76/80 | 100mg/500mg/1g | |
| 92289ES60/76/80 | 100mg/5 |