История развития моделирования DSS

Разработка лекарств требует животных моделей для проверки эффективности. С более чем 50 годами разработки и оптимизации, модель язвенного колита (ЯК) с декстрансульфатом натрия (ДСН), среди различных животных моделей, широко используется для изучения этиологии и патогенеза воспалительного заболевания кишечника (ВЗК).

Рис 1. Развитие модели язвенного колита DSS

Схарактеристики модели UC построенный ДСС

Могут быть вызваны множественные острые или хронические симптомы ЯК, такие как: диарея, слизистый стул, скрытая кровь в кале, обильный кровавый стул, потеря веса, снижение активности и плохой окрас шерсти, различными дозами DSS.

Таблица 1 Гистологическая характеристика модели колита DSS

Категория модели колита DSS

модель острого колита

Модель хронического колита

гистологические изменения

Гиперемия толстой кишки, отек, укорочение, хрупкость, увеличение соотношения веса к длине

значительно укороченная толстая кишка

Язвы толстой кишки различной степени

Утолщение слизистой оболочки, лимфаденопатия

Отек слизистой оболочки, потеря бокаловидных клеток, отек и деструкция крипт

потеря бокаловидных клеток, потеря крипт

Различная степень инфильтрации воспалительных клеток в слизистой оболочке и подслизистой основе, повреждение эпителиальных клеток

Аденоматозные полипы и опухолеподобные изменения у небольшого числа животных

Преимущества модели DSS UC

  1. Протоколы просты в реализации.
  2. Модель ЯК DSS очень похожа на симптомы ЯК у человека и отличается высокой повторяемостью.
  3. Различные характерные симптомы могут быть вызваны путем контроля вводимой дозы DSS, что было уникальным для модели DSS UC.
  4. Модель DSS UC может быть создана с использованием различных широко используемых модельных животных, таких как мыши, крысы, данио-рерио, свиньи, плодовые мушки и т. д.
  5. Модель рака, ассоциированного с колитом, вызванным ВЗК, может быть создана с помощью комбинированного использования азоксиметана (АОМ).

Пример построения модели DSS UC

  1. Мыши модельНажмите для подробностей

1) Мыши BALB/c, самки, 6-8 недель, 25 г;

2) Стерильная питьевая вода с 3% DSS и фильтром с мембраной 0,22 мкм;

3) DSS назначался в течение 7 дней;

4) Воспаление, например, толстой кишки После окрашивания ГЭ наблюдались отек и застойные явления.

Рис.2 Результаты окраски HE срезов острого колита DSS [1]

  1. Модель данио-рериоНажмите для подробностей
1) Эмбрионы данио-рерио были получены в результате естественного нереста и выращивались в инкубаторе при температуре 28 градусов до 1 дня после оплодотворения (dpf).5℃ в рециркулирующей воде (60 мкг/мл растворимых морских солей океана) с добавлением метиленового синего до 1 dpf;
2) После 1 дня оплодотворения используйте среду для культивирования эмбрионов E3 без метиленового синего для культивирования до 3 дней оплодотворения.
3) Приготовьте 10% раствор для хранения DSS со средой E3.
4) Разбавьте DSS питательной средой до максимально нелетальной дозы (концентрация DSS: 0,5%);
5) Рыбок данио-рерио обрабатывали 0,5% DSS с 3 по 6 день оплодотворения, индексы были следующими.

Рис.3 DSS вызывает воспалительную реакцию в печени данио-рерио [2]

3.Модель свиньиНажмите для подробностей

1) Йоркширские поросята в возрасте 4-5 дней;

2) Доза DSS: 1,25 г/кг, пероральный прием в течение 5 дней;

3) Наблюдалось увеличение скорости поглощения D-маннитола.

Рис.4 Концентрация D-маннитола у поросят, вызванная DSS, была выше, чем в контрольной группе [3]

4.Модель дрозофилыНажмите для подробностей

1) Дрозофила, самка, 5-10 дней;

2) Кормление середина был приготовлен с 5% раствором сахарозы, содержащим 3% DSS и 25 мкг/мл блеомицин;

3) Дрозофилу культивировали при температуре 29°С в течение трех дней с ежедневной заменой флакона с культурой;

4) DSS индуцировал пролиферацию клеток-предшественников ISC и оказывал летальное действие на дрозофилу.

Рис.5 DSS индуцирует пролиферацию клеток-предшественников ISC у дрозофилы [4] .

5.Срак, связанный с олитом(Нажмите для подробностей

1) Мыши BALB/c, самцы, возраст 7 недель;
2) В первый день взвесьте и пометьте мышей. Введите мышам внутрибрюшинно 10 мг/кг раствора АОМ.
3) Наполните водой поилку в клетках для мышей. Рассчитывайте 7-10 мл воды на мышь в день. Кормление в течение одной недели.
4) Замените питьевую воду на 2,5% DSS в течение одной недели;
5) Кормить обычной питьевой водой в течение двух недель;
6) Повторите шаги 3-4 3 раза.

    Рис.6 Принципиальная схема CAC вызванный AOM/DSS [5] .

    Критерии оценки модели

    1. Индекс активности заболеваний ( Оценка DAI)

    Модель оценивалась по нескольким параметрам, включая массу тела, вязкость кала и скрытую кровь, на основании которых рассчитывался общий DAI.

    Таблица 2. Правила подсчета баллов DAI

    счет

    процент потери веса

    консистенция стула

    скрытая кровь в кале

    0

    0

    нормальный

    Отрицательно

    1

    1-5%

    мягкий стул

    светло-голубой

    2

    5-10%

    слизистый стул

    синий

    3

    10-20%

    жидкий стул

    темно-синий

    4

    >20%

    \

    отвратительный кровавый стул

    1. Оценка гистологических изменений

    Баллы были даны для вышеуказанных показателей на основе гистологических изменений, за исключением образования лимфатических узлов для модели острого колита. Использованные реагенты для окрашивания HE — Cat#60524ES60.

    Таблица 3 Оценка гистологических изменений

    счет

    Язва(ы)

    Эпителиальные изменения

    воспалительный инфильтрат

    лимфатический узел(ы)

    0

    0

    нормальный

    никто

    никто

    1

    1

    потеря бокаловидных клеток

    Перикриптовая инфильтрация

    1

    2

    2

    потеря бокаловидных клеток

    Инфильтрация мышечной оболочки слизистой оболочки

    2

    3

    3

    удаление крипты

    Общая инфильтрация мышечной оболочки слизистой оболочки, утолщение слизистой оболочки

    3

    4

    >3

    Обширная потеря крипт или полиповидная регенерация

    инвазия подслизистой оболочки

    >3

    1. Колон длина
    Укороченная длина толстой кишки была очевидным фенотипом для модели хронического колита, тогда как аналогичные изменения можно обнаружить на 8-й день для модели острого колита.
      4.Краткое содержание

      Рекомендуется провести предварительные эксперименты с использованием модели животных DSS UC с соответствующим контролем. Минимальные требования — 8–10 животных на группу.

      Ссылки на этот ресурс

      1) Сяона Гао и др. Журнал пищевой биохимии 83 (2020) 108438.
      2) Цзин Ма и др. Аквакультура и рыболовство (2021) 548–557.
      3) Конни Дж. Ким и др. Журнал пищевой биохимии 21 (2010) 468–475.
      4) Фанфанг Рен и др. PNAS.2010.107 (49) 21064-21069.
      5) Цзя-Жун Хуан и др. Границы фармакологии. 2020.11:586885.

        Успешный случай моделирования с помощью Yeasen DSS

        Успешные модели острого колита были получены с помощью Yeasen DSS (Cat#60316ES, MW: 36000~50000) в течение 7 дней с выраженным фенотипом, как показано в следующей таблице.

        Таблица 4. Построение различных типов моделей энтерита с помощью DSS

        Модель

        Моделирование образцов

        План моделирования

        Результаты моделирования

        Использовать оценку

        острый колит

        Мыши BALB/c, самки, 6-8 недель, 25 г

        3%-5% DSS пьют свободно в течение 7 дней подряд

        На 5-й день длина толстой кишки сократилась, появилось окрашивание HE, воспаление было очевидным.

        Скорость формования высокая, а время короткое. Соответствует характеристикам модели острого колита

        Мыши C57BL/6, самцы, 8 недель, 20 г

        3%-5% DSS через зонд, непрерывное введение

        Наступает 5-й день: укорочение толстой кишки, потеря веса, кровь в стуле, диарея.

        Высокая скорость плесени и короткая продолжительность. Соответствует характеристикам модели острого колита

        хронический колит

        Мышь C57BL/6, самец, 8 недель, 22 г

        1-2% DSS через зонд, непрерывное введение

        Появляется на 40-й день, укорочение толстой кишки, потеря веса, кровь в стуле, диарея

        Высокая скорость формования. Соответствует характеристикам модели хронического колита.

        рак толстой кишки

        Мышь C57BL/6, самец, 8 недель, 21 г

        1%-2% DSS ad libitum в течение 5 дней в течение 3 недель

        14 недель с укорочением длины толстой кишки, потерей веса, окрашиванием HE и очевидным воспалением

        Высокая скорость формования. Соответствует характеристикам модели рака толстой кишки.

        ФAQ

        Независимо от модели острого колита DSS или хронического колита DSS, тяжесть и успешность энтерита зависят от вида мышей (различный генетический фон), концентрации DSS и цикла дозирования.

        Таблица 5. Распространенные проблемы моделирования колита DSS

        возможные проблемы

        возможная причина

        Предлагаемое решение

        высокая смертность у мышей

        Концентрация DSS слишком высокая

        Уменьшить концентрацию вводимого DSS

        Мыши без симптомов энтерита или с незначительными симптомами

        Концентрация DSS слишком низкая

        Увеличить концентрацию дозировки DSS; уменьшить интервал цикла (10-14 дней)

        В одной и той же группе мышей симптомы энтерита сильно различаются

        крышка бутылки засорилась

        Ежедневно проверяйте бутылочку для питья у мышей.

        Пзаказ продукта

        Для самого продаваемого продукта требуется всего 1/3 от цены М* с той же эффективностью, и мы держим большой запас.

        Ппродукт Наме

        Астатья Нумбра

        Спецификация

        Декстрансульфат натриевая соль (DSS), класс колита MW: 36000~50000

        60316ES25/60/76/80

        25 г/100 г/500 г/1 кг

        Азоксиметан (АОМ)

        60751ES03/08/10

        1 мг/5 мг/10 мг

        МолПур® Набор для анализа ДНК кала

        18820ES08/50/70

        5 Т/50 Т/200 Т

        МолПур® Набор ДНК для анализа почвы/каловых масс Mag48 FA

        18528ES48

        48 Т

        МолПур®Набор ДНК для анализа почвы/каловых масс

        18526ES20/50/70

        20 Т/50 Т/200 Т

        Набор для окрашивания гематоксилином и эозином

        60524ES60

        2×100 мл

        Набор для анализа мочи и кала на скрытую кровь

        60403ES60

        100т

        Окрашивающий раствор альцианового синего с периодической кислотой Шиффа (AB-PAS)

        60534ES50/60

        6×50 мл/6×100 мл/

        Попубликованные статьи с нашими реагентами

        2024

        • [1] Чжун Д., Цзинь К., Ван Р. и др. Гидрогель на основе микроводорослей для лечения воспалительных заболеваний кишечника и связанных с ними тревожности и депрессии. Adv Mater. 2024 26 января: e2312275. doi: 10.1002/adma.202312275. IF=29.4
        • [2] Чжан Ю, Ту С, Цзи Икс, Ву Дж, Мэн Дж, Гао Дж, Шао Икс, Ши С, Ван Г, Цю Дж, Чжан Цз, Хуа С, Чжан Цз, Чэнь С, Чжан Л, Чжу СДж.Dubosiella newyorkensis модулирует иммунную толерантность при колите через путь AhR-IDO1-Kyn, активируемый L-лизином. Nat Commun. 2024 13 февраля;15(1):1333. doi: 10.1038/s41467-024-45636-x.IF= 16.6
        • [3] Сюань Чжан, Ся Гао, Сянчжоу И,и др. Многоцелевые наночастицы на основе инулина с каннабидиолом для эффективной профилактики язвенного колита[J]. Materials Today Bio.2024, 25100965. IF=8.2

        2022

        • Мэнмэн Сюй, Ин Конг, Наннан Чен и др. Определение сигнатуры иммуносвязанных генов и прогнозирование сети CeRNA при активном язвенном колите [J]. Frontiers in Immunology. 2022; 13: 855–645.ЕСЛИ=7,561
        • Луцзюань Син, Лицзюань Фу, Сонгмин Цао и др. Противовоспалительное действие пептидов, полученных из бычьего костного желатина, при РА, вызванном ЛПСW264.7 Клетки макрофагов и мыши C57BL/6, индуцированные декстрансульфатом натрия [J]. Питательные вещества 2022, 14, 1479. ЕСЛИ=5,717
        • Ван С,  Хуан Дж,  загар КС, и др. Изостевиол натрия улучшает течение хронического колита, вызванного декстраном сульфата натрия, посредством регуляции метаболического профилирования, поляризации макрофагов и пути NF-B [J]. Окислительная медицина и клеточное долголетие. 2022,4636618.ЕСЛИ=5,076
        • YuangengLi, PingYu, WenwenFu и др. Полисахариды из Panax ginseng CA Meyer облегчают вызванное DSS ВЗК путем ингибирования сигнального пути инфламмасомы JAK2/STAT1/NLPR3 у мышей [J]. Журнал функциональных продуктов питания. 2022, 105013.ЕСЛИ=4,451
        • Lei-NingChen, TaoJing, Zi-BinLin и др. Метаболомные и транскриптомные реакции яичек мышей на колит, вызванный декстрансульфатом натрия [J]. Репродуктивная токсикология. 2022, страницы 35-42.ЕСЛИ=3,143

        2021

        • Ли Чжао, Фэй Ван, Чжэнвэй Цай и др. Улучшение платформы использования лекарственных средств с помощью инъекционного мукоадгезивного гидрогеля для лечения язвенного колита [J].журнал химической инженерии.424(2021)130464.ЕСЛИ=16,744
        • Линцзюнь Тонг, Хайнин Хао, Чжэ Чжан и др. Внеклеточные везикулы, полученные из молока, облегчают язвенный колит, регулируя иммунитет кишечника и изменяя состав микробиоты кишечника [J]. Тераностика. 2021; 11(17): 8570-8586 ЕСЛИ=11,556
        • Цзинцзин Ган, Юйсяо Лю, Линюй Сан и др. Перорально вводимые частицы доставки нуклеотидов из микрофлюидики для лечения воспалительных заболеваний кишечника [J]. Applied Materials Today. 2021 Декабрь; 25:101231 ЕСЛИ=10,041
        • JialiDong, YuanLi, HuiwenXiao и др. Микробиота полости рта влияет на эффективность и прогноз лучевой терапии колоректального рака в моделях мышей[J]. Cell reports.2021, 109886.ЕСЛИ=9,423
        • Хао ЧАС,  Чжан Х,  Тонг Л,  Лю Q, et al. Lactobacillus plantarum. Эффект внеклеточных везикул, полученных из Q7 о микробиоте кишечника и язвенном колите у мышей[J].Frontiers in Immunology.2021.777147 .ЕСЛИ=7,561
        • Яохуа Фань, Яньцюнь Фань, Куньфэн Лю и др. Съедобное птичье гнездо облегчает язвенный колит, вызванный декстрансульфатом натрия, у мышей C57BL/6J, восстанавливая баланс клеток Th17/Treg [J]. Frontiers in Pharmacology.2021.632602.ЕСЛИ=7,561

        2020

        • Ли Ю., Донг Дж., Сяо Х., Чжан С., Ван Б., Цуй М. и Фань С.Кишечный комменсал, полученный из валериановой кислоты, защищает от лучевых поражений. Микробы кишечника, 2020 .1–18.ЕСЛИ=10,245
        • Цзя-Жун Хуан, Шэн-Тэ Ван, Мэн-Нин Вэй и др. Пиперлонгумин облегчает колит у мышей и связанный с колитом колоректальный рак [J]. Frontiers in Pharmacology.2020.586885.ЕСЛИ=7,561
        • Gao X, Fan W, Tan L и др. Соевые изофлавоны облегчают экспериментальный колит, воздействуя на пути инфламмасомы ERα/NLRP3 [J]. Журнал пищевой биохимии, 2020, 83.ЕСЛИ=6,048

        Расследование