Культура клеток является краеугольным камнем многих исследовательских приложений, от разработки лекарств до генной терапии. Однако поддержание здоровых, пролиферирующих культур может быть сложной задачей без правильного подхода и инструментов. Независимо от того, являетесь ли вы опытным ученым или новичком в клеточной культуре, оптимизация каждого шага процесса может иметь решающее значение. В этом руководстве мы дадим вам пять основных советов, которые обеспечат процветание ваших клеточных культур, от пищеварения до предотвращения загрязнения.
1. Улучшение клеточного пищеварения
Переваривание клеток является важнейшим этапом в экспериментах с культурой клеток, облегчая отсоединение клеток от поверхности культуры и их разделение на суспензию отдельных клеток для субкультивирования и последующего анализа. Выбор правильного фермента для переваривания может повысить эффективность разделения клеток, уменьшить повреждение клеток и обеспечить плавный ход эксперимента. Чтобы помочь вам выбрать наиболее подходящий фермент для переваривания в соответствии с вашими потребностями, мы составили руководство по нескольким часто используемым ферментным продуктам и их характеристикам. Вы можете выбрать наиболее подходящий продукт на основе типа клеток, экспериментальных требований и последующих применений.
Общие пищеварительные ферменты
- Трипсин (используется для гидролиза межклеточных белков)
- Рекомбинантный трипсин (без примесей животного происхождения, подходит для биофармацевтического применения)
- Коллагеназа (используется для расщепления коллагеновых волокон, идеально подходит для переваривания тканей)
- Композитный трипсин (например, Аккутаза, который лучше сохраняет антигены клеточной поверхности)
- Альтернативы трипсину (например, TrypLE™, идеально подходит для бессывороточных клеточных культур)
- Диспаза II (для разделения различных тканей и клеток).
Каждый фермент имеет свои уникальные области применения и преимущества, и выбор правильного фермента может значительно повысить эффективность эксперимента и качество ваших результатов.
| Название продукта | Номер кат. | Спецификация |
| PerfCel™l Трипсин-ЭДТА (0,25%), нет Фенол красный | 40123ES60 | 100 мл |
| PerfCell™ Трипсин-без ЭДТА (0,25%), без фенолового красного | 40124ES60 | 100 мл |
| PerfCell™ Трипсин (0,25%), феноловый красный | 40126ES60 | 100 мл |
| PerfCell™ Трипсин-ЭДТА (0.25%), Феноловый красный | 40127ES60 | 100 мл |
| Трипсин 1:250(порошок) | 40101ES25 | 25 г |
| PerfCell™ Рекомбинантный трипсин（пудра） | 40512ES10/60 | 10 мг/100 мг |
| 20416ES60 | 100 μг | |
| Фермент PerfCel Tryzyme™ Express (1X), феноловый красный | 40134ES60 | 100 мл |
| Фермент PerfCel Tryzyme™ Express (1X), нет Фенол красный | 40135ES60 | 100 мл |
| Раствор для диссоциации клеток ACCUTASE | 40506ES60 | 100 мл |
| Диспаза II | 40104ES60/80 | 100 мг/1 г |
2. Создание идеальной среды для культивирования
Здоровая культура начинается с правильной среды. Это включает в себя подходящую температуру, pH и оптимальную среду для вашего типа клеток. Yeasen предлагает ряд сред для клеточных культур, специально разработанных для поддержки различных клеточных линий, обеспечивая их необходимыми питательными веществами и факторами роста.
Бессывороточная культура клеток превратилась в важнейшую технологию в биологических исследованиях, обеспечивающую повторяемость, последовательность и этические стандарты. Традиционные клеточные культуры полагаются на сыворотку плода быка (FBS), что вносит изменчивость в экспериментальные результаты и этические риски животного происхождения. Чтобы решить эти проблемы, многие исследователи все чаще выбирают питательные среды без сыворотки.
В иммунологических исследованиях культура лимфоцитов играет решающую роль, особенно в областях иммунного ответа, разработки вакцин и иммунотерапии рака. Как центральные компоненты иммунной системы, лимфоциты требуют определенных условий культивирования для пролиферации и активации in vitro. Yeasen предоставляет питательные среды, разработанные специально для пролиферации и активации лимфоцитов, которые могут точно имитировать иммунные реакции in vivo и помогать исследователям получать более надежные данные об активации Т-клеток, выработке антител и исследованиях клеточной иммунологии.
Кроме того, культура органоидов представляет собой еще один важный шаг вперед в технологии культивирования клеток. Органоиды — это трехмерные клеточные структуры, которые могут имитировать ткани и функции органов человека in vitro, предоставляя новую исследовательскую платформу для моделирования заболеваний, скрининга лекарств и регенеративной медицины. Трехмерная структура органоидов лучше воспроизводит сложность и физиологические функции органов человека и стала важным инструментом для изучения развития органов, механизмов заболеваний и терапевтических ответов.
| Название продукта | Номер кат. | Спецификация |
| Среда для культивирования клеток насекомых CelCulSF™（Без сыворотки） | 40140ES | 1000 мл |
| Среда для культивирования клеток CelCulSF™ 293（Без сыворотки） | 40141ES | 1000 мл |
| Среда для культивирования лимфоцитов CelCulSF™（Без сыворотки） | 40142ES | 1000 мл |
| Среда для культивирования гибридомных клеток CelCulSF™（Без сыворотки） | 40143ES | 1000 мл |
| Мезенхимальные стволовые клетки CelCulSF（МСК）Питательная среда（Без сыворотки） | 40144ES | 500 мл |
| Среда для культивирования адгезивных клеток CelCulSF™（С пониженным содержанием сыворотки） | 40145ES | 1000 мл |
| Cebrary® Среда для роста кишечных органоидов (мышиная) | 41426ES60/76 | 100/500 мл |
| Cebrary® Среда для роста органоидов рака кишечника (человеческая) | 41427ES50/60/76 | 50/100/500 мл |
| Cebrary® Среда для роста органоидов рака желудка (человеческая) | 41428ES50/60/76 | 50/100/500 мл |
| Cebrary® Среда для роста органоидов рака печени (человеческая) | 41429ES50/60/76 | 50/100/500 мл |
| Cebrary® Среда для роста органоидов рака молочной железы (человеческая) | 41430ES50/60/76 | 50/100/500 мл |
| Cebrary® Среда для роста органоидов рака легких (человеческая) | 41431ES50/60/76 | 50/100/500 мл |
| Cebrary® Пищеводный Среда для роста раковых органоидов (человеческая) | 41432ES50/60/76 | 50/100/500 мл |
| Cebrary® Среда для роста органоидов рака яичников (человек) | 41433ES50/60/76 | 50/100/500 мл |
| Cebrary® Среда для роста органоидов рака поджелудочной железы (человеческая) | 41434ES50/60/76 | 50/100/500 мл |
3.Эффективная трансфекция для высококачественной экспрессии генов
Трансфекция клеток является важнейшим методом в биомедицинских исследованиях, позволяющим вводить экзогенные нуклеиновые кислоты (такие как ДНК, мРНК, siRNA и miRNA) в клетки для экспрессии генов, подавления или функциональных исследований. При наличии различных типов клеток и нуклеиновых кислот выбор правильного реагента для трансфекции имеет решающее значение для успешных экспериментов.
Химические трансфекционные реагенты, в том числе липосомальные, ПЭИ и препараты на основе фосфата кальция, каждый из которых предлагает уникальные преимущества. Йесен Biology разработала разнообразную линейку продуктов, оптимизированных для различных приложений трансфекции, включая высокоэффективную трансфекцию для ДНК, siRNA, miRNA и mRNA, с подтвержденным успехом на более чем 40 клеточных линиях. Эти реагенты предлагают высокую эффективность трансфекции, широкие сценарии применения и продукты класса GMP для коммерческого производства, гарантируя надежные и эффективные результаты в исследовательских и промышленных приложениях.
| Номер кат. | Название продукта | Нуклеиновая кислота | Приложение |
| 40802ES | ДНК | Высокоэффективный реагент для трансфекции липосом | |
| 40804ES | ЛВ | Повышение способности к лентивирусному инфицированию. | |
| 40806ES | siRNA, miRNA, ASO | Специфичные для siRNA и miRNA трансфекционные реагенты с высокой эффективностью нокдауна. | |
| 40808ES | ДНК, siRNA, miRNA | Усовершенствованный реагент для трансфекции липосом, который может выполнять трансфекцию ДНК и РНК в различные типы клеток, по-прежнему демонстрируя хорошие результаты на трудно поддающихся трансфекции клетках. | |
| 40809ES | мРНК | Специфичный для мРНК трансфекционный реагент с высокой эффективностью трансфекции в различных типах клеток. | |
| 40815ES | ДНК | Широко применяется для экспрессии белков и упаковки вирусов (в форме порошка). | |
| 40816ES | Hieff Транс®полиэтиленимин линейный (ПЭИ) MW40000（быстрый лизис） | ДНК | |
| 40820ES | ДНК | Специальные трансфекционные реагенты для упаковки вирусов, способные обеспечить более высокие выходы для упаковки вирусов AAV и LV | |
| 40821ES | ДНК | ||
| 40823ES | ДНК | Самая высокая эффективность трансфекции. Особенно подходит для производства AAV в суспензионной культуре, обеспечивая более высокие выходы. |
4. Криоконсервация клеток для долгосрочного использования
Замораживание клеток является важнейшим методом долгосрочного сохранения клеток, служащим таким целям, как предотвращение загрязнения, поддержание экспериментальной согласованности, облегчение транспортировки и создание банков клеток. Основные риски при замораживании включают образование кристаллов льда и повреждение раствора. Для снижения этих рисков необходимо использовать протоколы медленного замораживания и быстрого оттаивания. Криопротекторы, такие как глицерин или диметилсульфоксид (ДМСО), обычно используются для снижения образования кристаллов льда и осмотического стресса.
Yeasen предлагает два специализированных решения для криоконсервации: CellStore Freezing для клеток млекопитающих и Insect Cell Store Freezing для клеток насекомых. Оба продукта имеют уникальные формулы, которые позволяют проводить прямую заморозку при -70°C без сложных процедур охлаждения и обеспечивают высокую выживаемость клеток после размораживания, особенно для клеток, чувствительных к ДМСО или склонных к слипанию. Эти решения не содержат компонентов сыворотки или белка, что гарантирует отсутствие загрязнения от бычьих источников и идеально подходят для культур без сыворотки.
| Название продукта | Номер кат. | Спецификация |
| Замораживание клеток млекопитающих | 40128ES50 | 5×10 мл |
| Замораживание клеток млекопитающих | 40128ES60 | 100 мл |
| Клетки насекомых Хранение Заморозка | 40129ES50 | 5×10 мл |
| Клетки насекомых Хранение Заморозка | 40129ES60 | 100 мл |
| Среда для замораживания клеток без сыворотки | 40151ES | 50 мл/100 мл |
| Среда для замораживания клеток без сыворотки (без ДМСО) | 40152ES | 100 мл |
| Среда для замораживания клеток без сыворотки (для стволовых клеток) | 40153ES | 100 мл |
| Среда для замораживания клеток без сыворотки (для стволовых клеток, без ДМСО) | 40154ES | 100 мл |
5. Предотвращение загрязнения для здоровых культур
Загрязнение является распространенной проблемой в клеточной культуре, часто приводя к скомпрометированным результатам и напрасной трате времени исследования. Распознавание различных типов загрязнения имеет важное значение для эффективной профилактики и устранения.
Общая ячейка загрязняющие вещества
- Бактерии
- Грибы
- Микоплазма
- Простейшие
- черные пятнышки
- Вирусы
- кросс-видовой
Профилактические меры включают использование антибиотиков, регулярную дезинфекцию оборудования, соблюдение стерильных методов и поддержание чистоты рабочих зон. При обнаружении загрязнения обычно рекомендуется выбросить пораженные культуры, если только они не редкие или ценные; в таких случаях следует предпринять шаги по устранению загрязнителя. Рекомендуется создание резервных линий клеток или приобретение новых культур.В определенных ситуациях специализированные методы лечения, направленные на конкретные загрязнители, могут помочь восстановить клеточные культуры. Поддержание надлежащей гигиены, обеспечение строгого разделения оборудования и поддержание стерильной среды имеют решающее значение для предотвращения загрязнения и обеспечения успешных экспериментов с клеточными культурами.
| Тип | Название продукта | Номер кат. | Спецификация |
| Антибактериальный | Пенициллин-стрептомицин (100×), подходит для культивирования клеток | 60162ES76 | 100 мл |
| 60230ES07/60 | 3.2/100 г | ||
| Гентамицина сульфатная соль | 60214ES03/08/25 | 1/5/25 г | |
| Метронидазол | 60223ES25/60 | 25/100 мг | |
| Противогрибковый | Амфотерицин В | 60238ES01/03 | 100 мг/1 г |
| Нистатин | 60219ES08 | 5 г | |
| 60231ES03/08 | 1/5 мг | ||
| Обнаружение микоплазмы | 40601ES10/20 | 10/20 анализов | |
| Набор для одноэтапного обнаружения микоплазмы MycAway™ Plus-Color | 40612ES25/60 | 25/100 Т | |
| Удаление микоплазмы | MycAway™ Спрей (готов к использованию) | 40605ES02/03/08 | 1/2/10×500 мл |
| MycAway™ Лечение (1000×) - Реагент для устранения микоплазмы | 40607ES03/08 | 1/5 мл | |
| MycAway™ Профилактическое (2000)×) - Реагент для профилактики микоплазмоза | 40608ES03/08 | 1/5 мл | |
| 40609ES60 | 100 мл | ||
| 40610ES60 | 100 мл |
Заключение
Оптимизация процессов культивирования клеток имеет решающее значение для получения надежных и воспроизводимых результатов.От выбора правильных ферментов для пищеварения до предотвращения загрязнения — каждый шаг в рабочем процессе имеет значение. Внедряя высококачественные реагенты и методы от Yeasen, вы можете получить более здоровые, более продуктивные клеточные культуры, что приведет к более успешным экспериментам и результатам исследований.
Хотите узнать больше?
Посетите наш веб-сайт для получения подробных руководств по продуктам и дополнительных решений для улучшения рабочих процессов культивирования клеток. Если вам нужны ферменты, среды, реагенты для трансфекции или контроль загрязнения, у Yeasen есть все, что вам нужно для процветания клеточных культур.
Для получения дополнительной информации или покупки посетите наш официальный сайт.