---Устранение фоновых бактериальных помех и загрязнения РНКазой

в обнаружении патогенов одним махом!

Ингибитор РНКазы (RNase Inhibitor, сокращенно RNasin) способен специфически связываться с РНКазой посредством нековалентных взаимодействий с образованием комплекса, тем самым инактивируя РНКазу и сохраняя целостность РНК. Он широко используется в методах обнаружения патогенов, таких как RT-qPCR, mNGS и tNGS. Во время обнаружения патогенов крайне важно строго контролировать фоновое бактериальное загрязнение молекулярных ферментов; если молекулярные ферменты мешают фоновым бактериям, они могут затмевать малочисленные целевые нуклеиновые кислоты или обнаруживаться вместе с ними, тем самым влияя на интерпретацию результатов.

Yeasen Сверхнизкий остаточный ингибитор РНКазы

Yeasen UCF.ME® Murine RNase Inhibitor (Cat#14672ES/14673ES/14674ES) — рекомбинантный ингибитор РНКазы, полученный от мышей, экспрессированный и очищенный в растворимой форме из E. coli. Он обладает способностью широко ингибировать различные типы РНКаз, включая РНКазу A, B и C. Этот продукт был протестирован с помощью ОТ-ПЦР и ОТ-кПЦР и оказался совместимым с обычными обратными транскриптазами и различными ДНК-полимеразами. По сравнению с ингибиторами РНКазы, полученными от человека, Yeasen UCF.ME® Murine RNase Inhibitor не имеет двух остатков цистеина, которые очень чувствительны к окислению в человеческих белках, что обеспечивает более высокую антиоксидантную активность. Он особенно подходит для экспериментов, чувствительных к высоким концентрациям DTT, таких как кПЦР.

Кроме того, по сравнению с обычными ингибиторами РНКазы (кат. № 10603ES/10610ES/14671ES), ингибитор мышиной РНКазы Yeasen UCF.ME® демонстрирует более низкие остаточные уровни геномной ДНК хозяина, что помогает устранить фоновые бактериальные помехи при обнаружении патогенов и повышает точность обнаружения.

Характеристики продукта

  • Сверхнизкий остаточный уровень: уровень остатков ДНК E. coli < 0,1 копий/100 U, подходит для применений с более строгими требованиями к фоновым бактериям.
  • Широкий спектр ингибирующей активности РНКазы: способен ингибировать РНКазы, включая РНКазу А, РНКазу В, РНКазу С и другие.
  • Совместим с широким диапазоном условий реакции: активен при pH от 5,0 до 9,0 и температуре от 25°C до 60°C, подходит для термофильных обратных транскриптаз.
  • Совместимость с широким спектром последующих экспериментов: отсутствие влияния на ферментативную активность РНК-полимераз SP6, T7 или T3, обратных транскриптаз AMV, M-MLV и ДНК-полимераз Taq.
  • Стабильность от партии к партии: сверхчистая платформа для производства молекулярных ферментов UCF.ME® со строгим контролем качества обеспечивает однородность, стабильность и своевременную поставку продукта.

Эксплуатационные характеристики продукта

1) Отсутствие экзонуклеазы, фермента разрезания и РНКазы остаток

Рисунок 1. Обнаружение остатков нуклеазы, никующего фермента и РНКазы в ингибиторе мышиной РНКазы UCF.ME®.

Примечание: N представляет собой отрицательный контроль; 1, 2, 3 представляют собой три набора параллельных экспериментов.

2) Остаток геномной ДНК кишечной палочки составляет менее 0,1 копии/100 ед., что значительно ниже, чем в обычной версии.

Результаты, полученные в результате обнаружения остатков геномной ДНК хозяина (E.coli) в различных партиях ингибитора мышиной РНКазы UCF.ME® и сравнения их с уровнями остатков хозяина обычных ингибиторов мышиной РНКазы, показывают, что остаток геномной ДНК хозяина ингибитора мышиной РНКазы UCF.ME® составляет менее 0,1 копии/100 ед., что значительно ниже, чем у обычной версии.

Рисунок 2: Сравнение результатов обнаружения остатков генома E. coli между UCF.ME® МРТ и традиционная МРТ.

3) Ингибирующая способность РНКазы значительно превосходит таковую у импортных марок.

Используя Total RNA в качестве шаблона, реакция RT-qPCR была проведена с использованием набора зондов Hifair® V Multiplex One Step RT-qPCR (UDG Plus) (Cat#13650ES) для проверки способности UCF.ME® Murine RNase Inhibitor переваривать RNaseA. Результаты показали, что ингибирующий эффект Yeasen UCF.ME® MRI на RNaseA значительно превосходит эффект аналогичных международных конкурирующих продуктов.

Рисунок 3: Проверка способности UCF.ME® MRI ингибировать РНКазу

Примечание: Yeasen UCF MRI: 8 U UCF.ME® MRI + 80 нг РНКазы A; Yeasen MRI: 8 U MRI + 80 нг РНКазы A; Конкурент N*: 8 U аналогичного конкурентного продукта + 80 нг РНКазы A; Контроль: без МРТ и РНКазы A.

Рекомендация по продукту

Тип

Имя

Кот

Сверхчистая серия одноферментной ПЦР с ультранизким содержанием остатков хозяина

Hieff UCF.ME® Hotstart Sensitive Taq ДНК-полимераза (5 ед./мкл)

14314ES

Обратная транскриптаза Hifair UCF.ME® V (200 ед./мкл)

14608ES

UCF.ME® Урацил ДНК гликозилаза (УДГ/УНГ), термолабильная, 1 ед/мкл

14466ES

UCF.ME® Ингибитор мышиной РНКазы (40 ед/мкл)

14672ES

Серия высокопроизводительных моноферментных ПЦР

ДНК-полимераза Hieff UNICON® Hotstart E-Taq, 5 ед./мкл

10726ES

Обратная транскриптаза Hifair® V (200 ед./мкл)

11300ES

Урацил ДНК гликозилаза (УДГ/УНГ), термолабильная, 1 ед/мкл

10303ES

Ингибитор мышиной РНКазы (40 ед./мкл)

10603ES

Смесь dNTP (по 25 мМ каждого)

10125ES

Lyo-Ready ПЦР моноферментная серия

ДНК-полимераза Hieff UNICON® HotStart E-Taq, без глицерина (5 ед./мкл)

14316ES

Обратная транскриптаза Hifair® V, без глицерина (600 ед./мкл)

11301ES

Урацил ДНК гликозилаза (УДГ), термолабильная (1 ед./мкл, без глицерина)

10707ES

Ингибитор мышиной РНКазы (200 ед./мкл, без глицерина)

10703ES

Расследование