Электрофорез белков — это метод анализа белков. Белки отрицательно или положительно заряжены в буфере и перемещаются к аноду в электрическом поле, называемом электрофорезом. Различные молекулы белков имеют различную электрофоретическую подвижность. Очень важной частью электрофореза белков является приготовление геля. Обычное приготовление геля часто занимает несколько часов, и существуют также такие проблемы, как утечка жидкости, неравномерный гель и пузырьки воздуха. В дополнение к проблемам приготовления, исходные реагенты также будут иметь определенную токсичность, что нанесет вред корпусу дозатора клея, и появление готового клея может решить эти проблемы. Так в чем же основной принцип электрофореза белков, и какова функция и принцип готового геля?

1. Каков основной принцип электрофореза белков?
2. Какова функция и принцип действия готового клея?
3. Введение в готовый клей, предоставленный Yeasen
4. Часто задаваемые вопросы
5. Подробности о продукте

1. Каков основной принцип электрофореза белков?

Большинство биологических макромолекул, таких как белки и нуклеиновые кислоты, имеют катионные и анионные группы, которые называются цвиттерионами. Метод зонного электрофореза, в котором частицы диспергируются в растворе и крахмальном геле, агарозном или агарозном геле, полиакриламидном геле и т. д. в качестве поддерживающей среды, называется гель-электрофорезом. Электрофорез в полиакриламидном геле — это метод электрофореза, в котором подложкой является полиакриламидный гель. Считается, что размер пор полиакриламидного геля контролируется для полимеризации, а белки разделяются под действием аналогичного молекулярного сита.

Электрофорез белков включает две формы: электрофорез в нативном полиакриламидном геле (Native-PAGE) и электрофорез в натрий-додецилсульфатном полиакриламидном геле (SDS-PAGE). Native-PAGE сохраняет белки нетронутыми во время электрофореза и разделяет их в градиенте на основе их молекулярной массы, формы и сопутствующего заряда. С другой стороны, SDS-PAGE разделяет белки в соответствии с молекулярной массой их субъединиц. SDS является анионным детергентом. Как денатурирующий и солюбилизирующий агент, он может разрывать внутримолекулярные и межмолекулярные водородные связи, сворачивать молекулы и разрушать вторичную и третичную структуры молекул белка. Как сильный восстановитель, меркаптоэтанол, дитиотреитол, может разрывать дисульфидные связи между остатками цистеина. После добавления восстановителя и SDS к образцу и гелю молекулы деполимеризуются в полипептидные цепи, а деполимеризованные боковые цепи аминокислот и SDS объединяются в мицеллы белок-SDS. Отрицательный заряд мицелл белок-SDS превышает исходный заряд белка, устраняя разницу зарядов и структурную разницу между различными молекулами. Подвижность белка зависит только от молекулярной массы белка, а молекулярную массу белка можно определить, сравнив ее со стандартом известной молекулярной массы.

2. Какова функция и принцип действия готового клея?

По сравнению с традиционными гелями, отлитыми вручную, готовые белковые гели позволяет избежать контакта с большим количеством токсичных реагентов, сэкономить много времени и эффективно решить проблему больших различий в гелях, отлитых вручную.

Гель состоит из двух различных гелевых слоев, верхний слой — это стекирующий гель, а нижний слой — разделяющий гель. Стекинговый гель также известен как стекирующий гель.Концентрация геля относительно мала, а размер пор относительно велик. Образец добавляется в стекирующий гель и концентрируется в узкой зоне посредством миграции геля с большим размером пор. Разделительный гель, также известный как электрофорезный гель, обычно имеет небольшой размер пор, и выбор соответствующей концентрации геля может сделать компоненты образца хорошо разделенными.

Разделительные гели можно разделить на фиксированные гели и градиентные гели. Концентрация полиакриламида составляет 8%, 10%, 12%, 15%，4%-12% и 4%-20%. Первые четыре представляют собой готовые гели с фиксированной концентрацией, а последние два - градиентные гели. Концентрации представляют собой диапазон молекулярных масс изолированного белка. Градиенты геля формируются градиентными смесителями. Высококонцентрированный раствор акриламида добавляется на стеклянную пластину, а затем концентрация раствора уменьшается в градиенте, а размер пор геля больше вверху и меньше внизу. Фиксирующий гель может разделять белки только в пределах своего диапазона разделения, не слишком большого и не слишком маленького. Градиентные гели не имеют этого ограничения, где большие молекулы разделяются вверху, а маленькие молекулы разделяются внизу. Поскольку размер пор градиентного геля постепенно уменьшается, он оказывает концентрирующее действие на белок вблизи размера пор, через которые белок не может проникнуть, поэтому после электрофореза образуется очень узкая зона. Белки с небольшими различиями в молекулярной массе часто не могут быть разделены на фиксированных гелях, но могут быть разделены на градиентных гелях.

3. Введение в готовый клей, предоставленный Yeasen

ЙЕСЕН Готовый протеиновый гель Plus содержит Градиентная концентрация и фиксированная концентрация, множество различных концентраций могут удовлетворить потребности электрофореза различных белков. Он готовится с помощью уникального процесса приготовления геля и имеет превосходный электрофоретический эффект. Он совместим со всеми видами электрофоретических емкостей на рынке (Bio-RAD, Tanon, Life и т. д.) и имеет такие преимущества, как широкая адаптивность, высокое разрешение, высокая стабильность, четкие и однородные полосы и т. д.

3.1 ЙЕСЕН Готовый протеиновый гель Plus обновите доску до пластиковой, лучшего качества!

Простота использования: готово к использованию; Оторвите клейкую ленту от нижней части пластиковой доски.

Широкий спектр применения: совместим с денатурированным и натуральным белком

Прозрачная полоса: специальная обработка пластиковых пластин значительно снижает адсорбцию белка

Экономия времени: эксперимент можно завершить за 18 минут самое быстрое

Гарантия качества: строгий контроль стабильности между партиями

Длительный срок хранения: можно хранить при температуре 4℃ на 12 месяцев

3.2 Следующие параметры помогут вам выбрать подходящую серию гелей:

Буферная система для электрофореза: буфер для работы с денатурированным белком или буфер для работы с натуральным белком

Количество лунок и загрузка образца: 10 или 15 лунок, максимальный объем образца 70 мкл и 40 мкл соответственно.

Концентрация геля: 8%, 10%, 12%, 15%, 4%-12%, 4%-20%

Таблица 1.Концентрация геля и диапазон линейного разделения

3.3 Данные показывают

Рисунок 1. Данные показывают

Рисунок 2. Данные показывают

4. Часто задаваемые вопросы

В1: Должен ли сборный железобетон гель быть помещены в 4℃? Имеет ли значение, если вы оставите его при комнатной температуре на некоторое время?

А: Рекомендуемая температура 4℃, можно хранить 12 месяцев. Не хранить при температуре ниже 0℃, можно хранить при комнатной температуре (25℃) в течение 30 дней.

Q2: Как выбрать между градиентной концентрацией и фиксированной концентрацией? Какова минимальная молекулярная масса белка, разделенного сборным гель?

A: Величина разделения белка сборным железобетоном гель связана с его концентрацией, а соответствующий диапазон разделения показан на рисунке выше.

Сборный железобетон с фиксированной концентрацией гель имеет лучшее разрешение. Градиент концентрации сборный гель имеет более широкий диапазон разделения и более широкий спектр применения; Клиенты следует выбирать соответствующую концентрацию в соответствии со своими потребностями.

Наш сборный железобетон с уклоном 4%-20% гель (Кат. № 36250, Кат. № 36256) имеет широкий диапазон разделения белков с молекулярной массой до 3,5 кДа.

Рисунок 3. Градиент сборный данные геля

В3: Сборный железобетон гель должны быть оснащены вашим специальным буфером? Вы можете сделать свой буфер?

A: Специальный буфер YEASEN (Кат. № 36236, Кат. № 36237) и сборный бетон гелевая применимость лучше. Не смешивайте с другими буферами. Буфер можно приготовить, купив реагенты, но клиенты необходимо использовать нашу формулу, которую можно найти в соответствующем руководстве по сборным железобетонным изделиям Инструкция по применению геля.

В4: Как отличить разделительный гель и концентрированный гель? Нужен ли он для секционного электрофореза напряжения?

A: Оба компонента одинаковы, но концентрация не одинакова, невооруженным глазом их не различить; высота концентрированного клея составляет 1,5 см.

Нет, рекомендуется проводить электрофорез при напряжении 150 В, для завершения эксперимента требуется 30–40 минут.

В5: Ваш сборный железобетон? гель подходит для всех видов электрофорезных ванн, представленных на рынке?

A: Да, наш сборный железобетон гель подходит для всех видов электрофорезных ванн, представленных на рынке,

Bio-rad Mini-Protean (II/3 /Tetra System) и Tanon VE180 (обратите внимание на обратную сборку уплотнительной ленты);

Мини-ячейка Life Technology Novex (используется со специальной перегородкой);

Другая ширина гелевой пластины в электрофорезной камере 10 см.

5. Подробности о продукте

Компания Yeasen предлагает следующую продукцию:

Таблица 2.Подробности о продукте