Kolitassocierad cancer (CAC) är den tredje vanligaste maligna tumören i världen, med morbiditet och dödlighet näst efter mag- och levercancer[1], Inflammatorisk tarmsjukdom (IBD) kan öka ens sannolikhet att utveckla kolorektal cancer. Kombinationen av AOM och DSS har vunnit popularitet på grund av dess reproducerbarhet, styrka, låga kostnad och användarvänlighet. Den här artikeln belyser ett protokoll för att skapa DSS-AOM-modeller för att studera onkogenes av CAC.
Djurmodell
BALB/c-möss (7 veckor gamla, hanar)
Material
DSS(Yeasen#60316ES,MW36000-50000), AOM（Yeasen#60751ES）
Lösningsförberedelse
DSS-tillsatt dricksvatten: Använd sterilt vatten för att bereda 1-3 % DSS-lösning. Förvara vid 4 °C fram till användning.
AOM-lösning: Lös upp AOM i WFI för att få en 10 mg/ml stamlösning. Alikvot och frys vid -20°C. Undvik upprepade frys-upptiningscykler. På användningsdagen, tina alikvot och späd 1/10 med steril koksaltlösning.
Protokoll
- På dag 1, väg och markera möss. Injicera möss intraperitonealt med 10 mg/kg AOM-lösning.
- Fyll dricksförrådet i musburarna med vatten. Beräkna 7-10 ml vatten per mus och dag. Matning i en vecka.
- Byt ut dricksvatten med 2,5 % DSS under en vecka;
- Mata med vanligt dricksvatten i två veckor;
- Upprepa steg 3-4 3 gånger.
Fig1. AOM/DSS kolorektal cancermodelleringsprotokoll
Resultat av en framgångsrik CAC-modell
Viktminskning med DSS-behandling
Fig 2. Förändringen i kroppsvikt hos möss
2、Diarréresultat och blödningspoäng
Fig 3. Diarré göra och blödningspoäng
3、Tumörbildning i mus kolon
Fig 4. De representativa hela tjocktarmen och antalet tjocktarmscancer
Fig 5. Proteinuttrycken av COX-2, IL-6,β-catenin och snigel i akut kolit och azoximetan (AOM)/DSS-inducerad kolorektal cancermusmodeller (A) Kolonsnitt färgades med H&E och de indikerade antikropparna (B) Proteinuttrycket undersöktes med Western-blot av varje kolongrupp och lyserande antikroppsvävnadsgrupp från de två indikerade antikropparna. P-tubulin användes som laddningskontroll[2].
Länkar till denna resurs
[1]Qun Wang, et al. Safflorpolysackarid hämmar AOM/DSS-inducerad möss kolorektal cancer genom reglering av makrofagpolarisation[J]. Frontiers in Pharmacology.2021.761641[2]Jia-Rong Huang, et al. Piperlongumine lindrar mus Kolit och kolit-associerad Kolorektal Cancer[J].Frontiers in Pharmacology.2020.586885
Framgångsrik fodral för modellering med Yeasen DSS
Yeasen ger hög kvalitet DSS (Katt#60316ES): renhet (98%), svavelhalt 17-19%, fritt svavel <0,2 %, stöds av ett stort antal litteraturdata.
Tabell 1 Konstruktion av olika typer av enteritmodeller med DSS
| Modell | Modellering av prover | Modelleringsplan | Modelleringsresultat | Använd utvärdering |
| akut kolit | BALB/c-möss, hona, 6-8 veckor, 25 g | 3%-5% DSS dricker fritt i 7 dagar i följd | Dag 5 dök upp, tjocktarmens längd förkortades, HE-färgning och inflammationen var uppenbar | formningshastigheten är snabb och tiden är kort. Överensstämmer med egenskaperna hos modellen för akut kolit |
| C57BL/6 möss, hane, 8 veckor, 20 g | 3%-5% DSS genom sondmatning, kontinuerlig administrering | Dag 5 inträffar, kolonförkortning, viktminskning, blod i avföringen, diarré | Hög mögelhastighet och kort varaktighet. Överensstämmer med egenskaperna hos modellen för akut kolit | |
| kronisk kolit | C57BL/6 mus, hane, 8 veckor, 22 g | 1-2% DSS genom sondmatning, kontinuerlig administrering | Dag 40 dyker upp, kolonförkortning, viktminskning, blod i avföringen, diarré | Hög formningshastighet. Överensstämmer med egenskaperna hos modellen för kronisk kolit |
| tjocktarmscancer | C57BL/6 mus, hane, 8 veckor, 21 g | 1%-2% DSS ad libitum i 5 dagar i 3 veckor | 14 veckor med förkortad kolonlängd, viktminskning, HE-färgning och uppenbar inflammation | Hög formningshastighet. Överensstämmer med tjocktarmscancermodellens egenskaper |
Pproduktbeställning
Varmsäljande produkt behöver bara 1/3 av priset på M* med samma effektivitet, och vi har ett stort lager.
| Pprodukt Name | Aartikel Numbra | Specifikation |
| ColitCare™ Dextran Sulfate Sodium Salt (DSS), Colitis Grade MW:36000~50000 | 60316ES25/60/76/80 | 25 g/100 g/500 g/1 kg |
| Azoximetan (AOM) | 60751ES03/08/10 | 1 mg/5 mg/10 mg |
| MolPure® Pall DNA Kit | 18820ES08/50/70 | 5 T/50 T/200 T |
| MolPure® Mag48 Jord/avföring DNA Kit FA | 18528ES48 | 48 T |
| MolPure®Mag Jord/Pall DNA Kit | 18526ES20/50/70 | 20 T/50 T/200 T |
| Hematoxylin och eosinfärgningskit | 60524ES60 | 2×100 ml |
| Urin fekalt ockult blodtestsats | 60403ES60 | 100T |
| Alcian Blue Periodic Acid-Schiff (AB-PAS) färgningslösning | 60534ES50/60 | 6×50 mL/6×100 mL/ |
Ppublicerade artiklar med våra reagenser
[1] Zhong D, Jin K, Wang R, et al. Mikroalgbaserad hydrogel för inflammatoriska tarmsjukdomar och dess associerade ångest och depression. Adv Mater. 2024 26 januari:e2312275. doi: 10.1002/adma.202312275. IF=29,4
[2] Zhang Y, Tu S, Ji X, Wu J, Meng J, Gao J, Shao X, Shi S, Wang G, Qiu J, Zhang Z, Hua C, Zhang Z, Chen S, Zhang L, Zhu SJ. Dubosiella newyorkensis modulerar immuntolerans vid kolit via den L-lysinaktiverade AhR-IDO1-Kyn-vägen. Nat Commun. 2024 13 februari;15(1):1333. doi: 10.1038/s41467-024-45636-x.OM= 16,6
[3] Li Zhao, Fei Wang, Zhengwei Cai, et al. Förbättring av läkemedelsanvändningsplattformen med injicerbar mukoadhesiv hydrogel för behandling av ulcerös kolit[J]. Chemical Engineering journal.424(2021)130464.IF=16,744
[4] Lingjun Tong, Haining Hao, Zhe Zhang, et al. Mjölkhärledda extracellulära vesiklar lindrar ulcerös kolit genom att reglera tarmens immunitet och omforma tarmens mikrobiota[J].Theranostics.2021; 11(17): 8570-8586 IF=11,556
[5] Li, Y., Dong, J., Xiao, H., Zhang, S., Wang, B., Cui, M., & Fan, S. Gut kommensal härledd valeriansyra skyddar mot strålningsskador. Gut Microbes,.2020 .1–18.IF=10,245
[6] Jingjing Gan, Yuxiao Liu, Lingyu Sun, et al. Oralt administrerade nukleotidtillförselpartiklar från mikrofluidik för behandling av inflammatorisk tarmsjukdom[J].Applied Materials Today.2021 Dec;25:101231 IF=10,041
[7] Mengmeng Xu, Ying Kong, Nannan Chen, et al. Identifiering av immunrelaterad gensignatur och förutsägelse av CeRNA-nätverk vid aktiv ulcerös kolit[J]. Frontiers in Immunology.2022; 13: 855645.OM=7.561
[8] JialiDong, YuanLi, HuiwenXiao, et al. Oral mikrobiota påverkar effektiviteten och prognosen för strålbehandling för kolorektal cancer i musmodeller[J]. Cellrapporter.2021, 109886.IF=9,423
[9] Hao H, Zhang X, Tong L, Liu Q, et al. Lactobacillus plantarum Effekt av extracellulära vesiklar härrörande från Q7 om tarmmikrobiota och ulcerös kolit hos möss[J].Frontiers in Immunology.2021.777147.IF=7,561
[10] Yaohua Fan, Yanqun Fan, Kunfeng Liu, et al.Edible Bird's Nest förbättrar dextransulfatnatrium-inducerad ulcerös kolit i C57BL/6J-möss genom att återställa Th17/Treg-cellbalansen[J].Frontiers in Pharmacology.202026.IF=7,561
[11] Jia-Rong Huang, Sheng-Te Wang, Meng-Ning Wei, et al. Piperlongumine Lindrar Mouse Colitis and Colitis-Associated Colorectal Cancer[J]. Frontiers in Pharmacology.2020.586885.IF=7,561
[12]Gao X, Fan W, Tan L, et al. Sojaisoflavoner förbättrar experimentell kolit genom att rikta in sig på ERα/NLRP3-inflammasomvägar [J]. The Journal of Nutritional Biochemistry, 2020, 83.IF=6,048
[13] Lujuan Xing, Lijuan Fu, Songmin Cao, et al. The Anti-inflammatory Effect of Bovine Bone-Gelatin-derived Peptides in LPS-Induced RAW264.7 Makrofagerceller och dextransulfatnatriuminducerade C57BL/6-möss[J]. Näringsämnen 2022, 14, 1479. IF=5,717
[14] Wang S, Huang J, Tan KS, et al. Isosteviol Natrium förbättrar dextran-natriumsulfat-inducerad kronisk kolit genom reglering av metabolisk profilering, makrofagpolarisering och NF-B-väg[J]. Oxidativ medicin och cellulär livslängd. 2022,4636618. IF=5,076