Cellkultur är en hörnsten i många forskningsapplikationer, från läkemedelsutveckling till genterapi. Men att upprätthålla sunda, växande kulturer kan vara utmanande utan rätt tillvägagångssätt och verktyg. Oavsett om du är en erfaren vetenskapsman eller nybörjare inom cellodling, kan optimering av varje steg i processen göra stor skillnad. I den här guiden går vi igenom fem viktiga tips för att säkerställa att dina cellkulturer frodas, från matsmältning till förebyggande av kontaminering.
1. Förbättra din cellsmältning
Cellnedbrytning är ett avgörande steg i cellodlingsexperiment, vilket underlättar lossningen av celler från odlingsytan och deras separation till en encellssuspension för subkultur och efterföljande analyser. Att välja rätt matsmältningsenzym kan förbättra cellseparationens effektivitet, minska cellskador och säkerställa smidiga experimentella framsteg. För att hjälpa dig välja det mest lämpliga matsmältningsenzymet för dina behov har vi sammanställt en guide om flera vanliga enzymprodukter och deras egenskaper. Du kan välja den mest lämpliga produkten baserat på celltyp, experimentella krav och nedströmsapplikationer.
Vanliga matsmältningsenzymer
- Trypsin (används för att hydrolysera intercellulära proteiner)
- Rekombinant trypsin (fritt från föroreningar från animaliskt ursprung, lämpligt för biofarmaceutiska tillämpningar)
- Kollagenas (används för att bryta ned kollagenfibrer, idealiskt för vävnadssmältning)
- Komposittrypsin (som Accutase, som bättre bevarar cellytantigener)
- Trypsinalternativ (som TrypLE™, perfekt för serumfria cellkulturer)
- Dispase II (för att separera olika vävnader och celler).
Varje enzym har sina unika tillämpningar och fördelar, och att välja rätt kan avsevärt förbättra experimentell effektivitet och kvaliteten på dina resultat.
| Produktnamn | Kattnummer | Specifikation |
| PerfCel™l Trypsin-EDTA (0,25%), inga Fenolröd | 40123ES60 | 100 ml |
| PerfCell™ Trypsin utan EDTA (0,25%), inget fenolrött | 40124ES60 | 100 ml |
| PerfCell™ Trypsin (0,25%), fenolröd | 40126ES60 | 100 ml |
| PerfCell™ Trypsin-EDTA (0.25%), fenolröd | 40127ES60 | 100 ml |
| Trypsin 1:250 (pulver) | 40101ES25 | 25 g |
| PerfCell™ Rekombinant trypsin(pulver） | 40512ES10/60 | 10 mg/100 mg |
| 20416ES60 | 100 μg | |
| PerfCel Tryzyme™ Express Enzyme (1X), fenolröd | 40134ES60 | 100 ml |
| PerfCel Tryzyme™ Express Enzyme (1X), inga Fenolröd | 40135ES60 | 100 ml |
| ACCUTASE Cell Dissociation Solution | 40506ES60 | 100 ml |
| Dispase II | 40104ES60/80 | 100 mg/1 g |
2. Skapa den ideala odlingsmiljön
En hälsosam kultur börjar med rätt miljö. Detta inkluderar en lämplig temperatur, pH och optimalt medium för din celltyp. Yeasen erbjuder en rad cellkulturmedier som är speciellt framtagna för att stödja en mängd olika cellinjer och förse dem med de viktiga näringsämnen och tillväxtfaktorer de behöver.
Serumfri cellodling har dykt upp som en nyckelteknologi inom biologisk forskning, som säkerställer repeterbarhet, konsekvens och etiska standarder. Traditionella cellkulturer förlitar sig på fetalt bovint serum (FBS), vilket medför variationer i experimentella resultat och etiska risker med animaliskt ursprung. För att möta dessa utmaningar väljer många forskare alltmer serumfria odlingsmedier.
I immunologisk forskning, lymfocytodling spelar en avgörande roll, särskilt inom områdena immunsvar, vaccinutveckling och cancerimmunterapi. Som centrala komponenter i immunsystemet kräver lymfocyter specifika odlingsbetingelser för att föröka sig och aktiveras in vitro. Yeasen tillhandahåller odlingsmedia utformade specifikt för lymfocytproliferation och -aktivering, som exakt kan simulera immunsvar in vivo och hjälpa forskare att få mer tillförlitliga data inom T-cellsaktivering, antikroppsproduktion och cellulär immunologisk forskning.
Dessutom, organoid kultur representerar ett annat viktigt framsteg inom cellodlingsteknik. Organoider är tredimensionella cellulära strukturer som kan simulera mänskliga vävnader och organfunktioner in vitro, vilket ger en ny forskningsplattform för sjukdomsmodellering, läkemedelsscreening och regenerativ medicin. Den tredimensionella strukturen hos organoider replikerar bättre komplexiteten och de fysiologiska funktionerna hos mänskliga organ och har blivit ett viktigt verktyg för att studera organutveckling, sjukdomsmekanismer och terapeutiska svar.
| Produktnamn | Kattnummer | Specifikation |
| CelCulSF™ Insektscellodlingsmedium(Serumfritt） | 40140ES | 1000 ml |
| CelCulSF™ 293 Cellkulturmedium(Serumfritt） | 40141ES | 1000 ml |
| CelCulSF™ Lymfocytodlingsmedium(Serumfritt） | 40142ES | 1000 ml |
| CelCulSF™ Hybridoma Cellkulturmedium(Serumfritt） | 40143ES | 1000 ml |
| CelCulSF mesenkymal stamcell(MSC）Kulturmedium(Serumfritt） | 40144ES | 500 ml |
| CelCulSF™ vidhäftande cellkulturmedium(Serumreducerad） | 40145ES | 1000 ml |
| Cebrary® Intestinal organoid tillväxtmedium (mus) | 41426ES60/76 | 100/500 ml |
| Cebrary® Organoid tillväxtmedium för tarmcancer (människa) | 41427ES50/60/76 | 50/100/500 ml |
| Cebrary® Magcancer organoid tillväxtmedium (människa) | 41428ES50/60/76 | 50/100/500 ml |
| Cebrary® Organoid tillväxtmedium för levercancer (människa) | 41429ES50/60/76 | 50/100/500 ml |
| Cebrary® Bröstcancer organoid tillväxt medel (människa) | 41430ES50/60/76 | 50/100/500 ml |
| Cebrary® Organoid tillväxtmedium för lungcancer (människa) | 41431ES50/60/76 | 50/100/500 ml |
| Cebrary® Esophageal Cancerorganoid tillväxtmedium (människa) | 41432ES50/60/76 | 50/100/500 ml |
| Cebrary® Ovariecancer Organoid tillväxtmedium (människa) | 41433ES50/60/76 | 50/100/500 ml |
| Cebrary® bukspottkörtelcancer Organoid tillväxtmedium (människa) | 41434ES50/60/76 | 50/100/500 ml |
3.Effektiv transfektion för högkvalitativt genuttryck
Celltransfektion är en avgörande teknik inom biomedicinsk forskning, som möjliggör införandet av exogena nukleinsyror (såsom DNA, mRNA, siRNA och miRNA) i celler för genuttryck, tystnad eller funktionella studier. Med olika celltyper och nukleinsyror är det viktigt att välja rätt transfektionsreagens för framgångsrika experiment.
Kemiska transfektionsreagenser, inklusive liposomala, PEI- och kalciumfosfatbaserade formuleringar, alla erbjuder unika fördelar. Yeasen Biology har utvecklat en mångsidig produktlinje optimerad för olika transfektionsapplikationer, inklusive högeffektiv transfektion för DNA, siRNA, miRNA och mRNA, med verifierad framgång över över 40 cellinjer. Dessa reagenser erbjuder hög transfektionseffektivitet, breda tillämpningsscenarier och GMP-klassade produkter för kommersiell produktion, vilket säkerställer tillförlitliga och effektiva resultat i forskning och industriella tillämpningar.
| Kattnummer | Produktnamn | Nukleinsyra | Ansökan |
| 40802ES | DNA | Högpresterande liposomtransfektionsreagens | |
| 40804ES | LV | Förbättra förmågan till lentiviral infektion. | |
| 40806ES | siRNA, miRNA, ASO | siRNA- och miRNA-specifika transfektionsreagenser med hög knockdown-effektivitet. | |
| 40808ES | DNA, siRNA, miRNA | Uppgraderat liposomtransfektionsreagens som kan utföra DNA- och RNA-transfektioner i olika celltyper, fortfarande uppvisar goda effekter på svårtransfekterade celler. | |
| 40809ES | mRNA | mRNA-specifikt transfektionsreagens med hög transfektionseffektivitet i en mängd olika celltyper. | |
| 40815ES | DNA | Allmänt användbar för proteinuttryck och viral förpackning (pulverform). | |
| 40816ES | Hieff Trans®Polyetylenimin Linjär (PEI) MW40000(snabb lysering） | DNA | |
| 40820ES | DNA | Dedikerade transfektionsreagenser för viral förpackning, som kan uppnå högre avkastning för AAV och LV viral förpackning | |
| 40821ES | DNA | ||
| 40823ES | DNA | Den högsta transfektionseffektiviteten. Särskilt lämplig för produktion av AAV i suspensionskultur, vilket ger högre produktion. |
4. Kryokonservera dina celler för långvarig användning
Cellfrysning är en avgörande teknik för långsiktigt bevarande av celler, som tjänar syften som att förhindra kontaminering, upprätthålla experimentell konsistens, underlätta frakt och etablera cellbanker. De primära riskerna vid frysning inkluderar iskristallbildning och lösningsskador. För att mildra dessa risker är det viktigt att använda protokoll för långsam frysning och snabb upptining. Kryoskyddsmedel som glycerol eller dimetylsulfoxid (DMSO) används ofta för att minska iskristallbildning och osmotisk stress.
Yeasen erbjuder två specialiserade kryokonserveringslösningar: CellStore Freezing för däggdjursceller och Insect Cell Store Freezing för insektsceller. Båda produkterna har unika formuleringar som tillåter direkt frysning vid -70°C utan komplexa kylningsprocedurer och ger hög cellöverlevnadsgrad vid upptining, särskilt för celler som är känsliga för DMSO eller tenderar att klumpa sig. Dessa lösningar är fria från serum- eller proteinkomponenter, säkerställer ingen kontaminering från nötkreaturskällor och är idealiska för serumfria kulturer.
| Produktnamn | Kattnummer | Specifikation |
| Däggdjur CellStore Frysning | 40128ES50 | 5×10 ml |
| Däggdjur CellStore Frysning | 40128ES60 | 100 ml |
| Insektscell Store Fryser | 40129ES50 | 5×10 ml |
| Insektscell Store Fryser | 40129ES60 | 100 ml |
| Serumfritt cellfrysmedium | 40151ES | 50 ml/100 ml |
| Serumfritt cellfrysmedium (DMSO-fritt) | 40152ES | 100 ml |
| Serumfritt cellfrysmedium (för stamceller) | 40153ES | 100 ml |
| Serumfritt cellfrysmedium (för stamceller, DMSO-fritt) | 40154ES | 100 ml |
5. Förebyggande av kontaminering för friska kulturer
Kontaminering är ett utbrett problem i cellodling, vilket ofta leder till komprometterade resultat och slöseri med forskningstid. Att känna igen de olika typerna av föroreningar är avgörande för effektivt förebyggande och sanering.
Vanlig cell föroreningar
- Bakterier
- Svampar
- Mykoplasma
- Protozoer
- svarta fläckar
- Virus
- artöverskridande
Förebyggande åtgärder inkluderar användning av antibiotika, regelbunden desinfektion av utrustning, efterlevnad av sterila tekniker och underhåll av rena arbetsområden. Vid upptäckt av kontaminering är det i allmänhet tillrådligt att kassera de drabbade kulturerna såvida de inte är sällsynta eller värdefulla; i sådana fall bör åtgärder vidtas för att eliminera föroreningen. Etablering av backup-cellinjer eller skaffa nya kulturer rekommenderas.I vissa situationer kan specialiserade behandlingar riktade mot specifika föroreningar hjälpa till att återställa cellkulturer. Att upprätthålla korrekt hygien, säkerställa strikt åtskillnad av utrustning och upprätthålla en steril miljö är avgörande för att förhindra kontaminering och säkerställa framgångsrika cellodlingsexperiment.
| Typ | Produktnamn | Kattnummer | Specifikation |
| Antibakteriell | Penicillin-Streptomycin (100×), Lämplig för cellodling | 60162ES76 | 100 ml |
| 60230ES07/60 | 3.2/100 g | ||
| Gentamycinsulfatsalt | 60214ES03/08/25 | 1/5/25 g | |
| Metronidazol | 60223ES25/60 | 25/100 mg | |
| Antimykotika | Amfotericin B | 60238ES01/03 | 100 mg/1 g |
| Nystatin | 60219ES08 | 5 g | |
| 60231ES03/08 | 1/5 mg | ||
| Mycoplasma Detektion | 40601ES10/20 | 10/20 analyser | |
| 40612ES25/60 | 25/100 T | ||
| Mykoplasma borttagning | MycAway™ Spray (färdig att använda) | 40605ES02/03/08 | 1/2/10×500 ml |
| MycAway™ Behandling (1000×) - Mycoplasma Elimination Reagens | 40607ES03/08 | 1/5 ml | |
| MycAway™ Profylaktisk (2000×) - Mycoplasma Prevention Reagent | 40608ES03/08 | 1/5 ml | |
| 40609ES60 | 100 ml | ||
| 40610ES60 | 100 ml |
Slutsats
Att optimera cellodlingsprocesser är avgörande för att producera tillförlitliga, reproducerbara resultat.Från att välja rätt enzymer för matsmältning till att förhindra kontaminering, varje steg i arbetsflödet är viktigt. Genom att inkorporera högkvalitativa reagenser och tekniker från Yeasen kan du uppnå hälsosammare, mer produktiva cellkulturer, vilket leder till mer framgångsrika experiment och forskningsresultat.
Vill du lära dig mer?
Besök vår webbplats för detaljerade produktguider och fler lösningar för att förbättra dina cellodlingsarbetsflöden. Oavsett om du behöver enzymer, media, transfektionsreagenser eller kontamineringskontroll har Yeasen allt du behöver för blomstrande cellkulturer.
För mer information eller för att köpa, besök vår officiella webbplats.