1、 Kärnenzymmaterial-Taq DNA-polymeras

Som utvidgningen av applikationstestfält och den ökade efterfrågan på marknaden kan vildtyps-Taq DNA-polymeras inte längre helt uppfylla kraven. Yeasens ZymeEditor™-enzymmodifieringsplattform har heltäckande och riktat modifierat Taq DNA-polymeras för att möta olika applikationsbehov, och lanserar en serie hot-start Taq DNA-polymeraser lämpliga för förblandade, inhibitor-resistenta, ultrarena och andra applikationer.

• Överlägsen stabilitet: Formulerad till en komplett förblandningslösning innehållande primers och prober, efter behandling vid 37°C i 7 dagar, finns det ingen förändring i lågkoncentrationsdetektion.

Figur 1: Med hjälp av HBV-nukleinsyra som mall framställdes en komplett qPCR-förblandningslösning med 10726ES och alla komponenter utom mallen testades för accelererad stabilitet vid 37°C under 7 dagar. Resultaten visade att det inte förekom några signifikanta förändringar i Ct-värden och fluorescensvärden vid höga, medelhöga och låga koncentrationer, vilket indikerar att förblandningslösningen framställd med 10726ES har stabil prestanda.

• Låg värd-gDNA-rest: Kvarvarande E. coli genomiskt DNA är mindre än 0,5 kopior per 100 U.

Figur 2: Linjärt område för E. coli genomiskt DNA: 30 fg/μL till 300 pg/μL, med en korrelationskoefficient R2 på 0,9999. (B) Återstående genomiskt E. coli-DNA i tre satser av Hieff UCF.ME® Sensitive Taq DNA-polymeras är mindre än 0,5 kopior per 100 U.

2、 Kärnenzymmaterial - omvänt transkriptas

Som en av nyckelkomponenterna i RT-qPCR-reaktionen måste omvänt transkriptas ha snabbare omvänd transkriptionshastighet, högre syntesutbyte och bättre värmebeständighet. För att erhålla omvänt transkriptas mer lämpat för RT-qPCR har Yeasen Biotech utvecklat Hifair®-serien av omvända transkriptaser baserade på M-MLV genom genetisk modifiering.Dessa enzymer har lägre RNaseH-aktivitet, högre termisk stabilitet och starkare kontinuerlig syntesförmåga.

• Den tål reaktionstemperaturen på 58 ℃ och är lämplig för omvänd transkription av komplexa RNA-mallar

Figur 3: Hifair® V omvänt transkriptas och det importerade varumärket T* omvänt transkriptas inkuberades vid 55°C och 58°C i 30 minuter för att detektera kvarvarande enzymaktivitet. Resultaten visar att Hifair® V Reverse Transcriptase bibehåller 70 % aktivitet efter inkubation vid 58°C i 30 minuter, vilket avsevärt överstiger det importerade varumärket.

• Överlägsen detektionshastighet i RT-qPCR jämfört med andra märken, med ett detektionsområde på 1 pg till 1 μg

Figur 4: Med användning av 293T-cell totalt RNA i koncentrationer från 1 pg till 1 μg (7 gradienter) som mall, utfördes omvänd transkription med Hifair® V enstegs RT-gDNA-digerering SuperMix för qPCR (Cat#11142), V* och T*. Det resulterande cDNA:t utsattes sedan för qPCR för kvantitativ analys. Resultaten indikerar att känsligheten för 11142ES kan nå 1 pg, med en detektionshastighet som är överlägsen den för konkurrerande produkter.

3、Andra enzymer och enzymhämmare: RNase-hämmare, UDG-enzym

Yeasen Biotech erbjuder en mängd olika enzymer och enzymhämmare som har validerats för IVD industriella tillämpningar, inklusive RNase-hämmare och UDG-enzymer, vilket ger ett rikt urval av högkvalitativa råvarulösningar för utveckling och produktion av ett brett utbud av in vitro-diagnostiska produkter. Dessa enzymrelaterade produkter används i stor utsträckning för att skydda målprodukter för molekylär detektion.

RNase inhibitor:Yeasen uttrycker och renar rekombinanta RNas-hämmare från mus/svin i en löslig form inom E. coli, som i stort sett kan hämma olika typer av RNaser (RNas A, B, C) utan att undertrycka aktiviteten av polymeraser. Dessa inhibitorer har validerats för utbredd användning i flera tillämpningar såsom RT-PCR/qPCR, RNA-seq, cDNA-kloning och bibliotekskonstruktion. Utöver konventionella RNase-hämmare har Yeasen även utvecklat RNase-hämmare bearbetade med UCF.ME® ultralåg-rester-teknologi, som har lägre värdrester och är lämpliga för tillämpningar med strängare krav på bakgrundsbakterier, vilket hjälper till att lösa upp bakgrundsbakteriella interferenser vid patogendetektion och förbättrar noggrannheten vid detektion.

Uracil DNA Glycosylas (UDG/UNG enzym):Uracil-DNA-glykosylas (UDG-enzym), när det används i kombination med dUTP, kan etablera ett PCR-kontaminationssystem. Yishengs termolabila, låga UDG-enzym kan undvika kvarvarande aktivitet hos konventionella UDG-enzymer efter inaktivering, vilket kan orsaka nedbrytning av dU-innehållande amplifieringsprodukter vid rumstemperatur. Det förhindrar också falska positiva resultat i PCR-resultat orsakade av bakgrundsbakterier som finns i molekylära enzymer. Detta är avgörande för att exakt identifiera infektionspatogener och hjälpa till med den kliniska diagnosen av infektioner och infektionssjukdomar.

Taq DNA polymeras antikropp:Icke-specifik amplifiering är en av de stora frågorna som avsevärt påverkar prestandan för PCR, och varmstartsteknik kan effektivt minska ospecifik amplifiering. Varmstartsenzymet modifierat med antikroppar har en hög tätningseffektivitet och utmärkt prestanda, är stabilt vid rumstemperatur med en snabb frisättningshastighet av enzymaktivitet.Dubbelantikropps-hotstart-Taq-enzymet utvecklat av Yisheng Biotech förseglar inte bara 5'→3'-polymerasaktiviteten hos Taq-enzymet utan förseglar samtidigt 5'→3'-exonukleasaktiviteten. Detta dubbla tillvägagångssätt förhindrar effektivt ospecifik amplifiering orsakad av felparning eller primerdimerer och förhindrar även generering av ospecifika signaler på grund av nedbrytningen av sönder eller primrar, vilket förstärker reagensens stabilitet dubbelt.

4、Universell högpresterande qPCR Master Mix med ett rör

Yeasen Biotech erbjuder högkvalitativa qPCR-reagenser, med högpresterande hot-start Taq-polymeras parat med ett optimerat buffertsystem. Företaget tillhandahåller en rad produkter, inklusive universella mastermixar, allt-i-ett mastermixar, genotypande mastermixar och frystorkade mastermixar. Dessa reagenser kännetecknas av deras användarvänlighet, höga känslighet och starka stabilitet, vilket påskyndar utvecklingen av dina molekylära diagnostiska produkter.

• god mångsidighet：Den är lämplig för flera typer av multipla primers och prober (mer än 40 olika typer av mål har verifierats), och har utmärkt amplifieringsprestanda;
• l Superfull premix-stabilitet: stabil vid 37 ℃ i 14 dagar, 4 ℃ i 28 dagar, upprepad frysning och upptining 50 gånger;

• Hög känslighet och bra specificitet: känsligheten kan detektera 0,25 kopia/μL, och specificiteten för 48 hål har ingen negativ topp;
• Stöd snabbt program:kompatibel med snabbt program, 30 min kan ge resultat;
• dUP/UDG anti-föroreningssystem: dUTP/UDG anti-föroreningssystem införs för att effektivt förhindra aerosolföroreningar;
• Multiplattforms- och multisystemapplikation: Bio-Rad CFX96, ABI Q5, 7500, Slan, Tianlong, etc.

Figur 5: Baserat på stabilitetsstudien av det förblandade allt-i-ett-reagenset, behandlades 16710ES på tre olika sätt (4°C, 37°C och frys-upptiningscykler). Experimentgrupperna behandlades vid 4°C respektive 37°C under 7 dagar och utsattes för 50 frys-upptiningscykler, medan kontrollgruppen (förvarad vid -20°C) utvärderades med avseende på stabilitet under fyra multiplexamplifieringssystem (Grupp 1, 2 och 4 är quadruplex Group amplifieringssystem är ett, och triplexgrupp 3 amplifieringssystem). Resultaten visade att avvikelsen av Ct-värden (ΔCt) mellan experiment- och kontrollgrupperna var inom ±0,5, och fluorescensvärdesavvikelsen var inom 15 %, vilket bevisar att Yeasens allt-i-ett förblandade reagens har utmärkt stabilitet i multiplexamplifiering.

5、Universell högpresterande RT-qPCR Master Mix

Enstegs RT-qPCR-reagenser integrerar den överlägsna prestandan av omvänt transkriptas och hot-start enzymer, kompletterat med ett optimerat buffringssystem, vilket möjliggör snabb och känslig detektering av ensiffriga kopiamallar. Dessa reagenser är validerade av olika kundmarknader, inklusive luftvägssjukdomar, djurepidemi och forskningssystem, och kan möta behoven i olika applikationsriktningar.

• god mångsidighet：Den är lämplig för qPCR-amplifiering och detektion av nukleinsyror från patogena mikroorganismer, mänskliga genom, växter och andra arter;
• Hög känslighet：Det noggrant optimerade buffertsystemet förbättrar detektionskänsligheten för mallar med låg koncentration upp till 250 kopior/ml；
• dUP/UDG anti-föroreningssystem：dUTP/ Värmelabilt UDG anti-föroreningssystem introduceras för att effektivt bryta ned aerosolföroreningar av produkter, minska falska positiva och säkerställa autentiska resultat.
• Stöd snabbt program: kompatibel med snabbt program, 40 min kan ge resultat;
• Super stabilitet: stabil vid 37 ℃ i 14 dagar, upprepad frysning och upptining 10 gånger.

Detektionskänslighetsutvärdering

Figur 6: Med användning av Yeasens RT-qPCR-premix (16630ES) och en jämförbar produkt från Leverantör-A genomfördes detekteringen av fyra patogena mål samtidigt (Humant Parainfluensavirus HPIV2, Humant Parainfluensavirus HPIV4, Respiratory Syncytial Virus HRVA och Rhinovirus RSVA). Resultaten visade att detektionskänsligheten för 16630ES var högre än hos leverantör-A.

Produktrekommendation

产品类型	产品名称	货号
PCR-enzymserie	Hieff UNICON® Hotstart E-Taq DNA-polymeras, 5 U/μL	10726ES
	Hifair® V omvänt transkriptas (200 U/μL)	11300ES
	Uracil DNA Glycosylas (UDG/UNG), värmelabil, 1 U/μL	10303ES
	Murin RNas-hämmare (40 U/µL)	10603ES
	dNTP-mix (25 mM vardera)	10125ES
Ultraren PCR-enzymserie med ultralåg värdrester	Hieff UCF.ME® Hotstart Sensitive Taq DNA-polymeras (5 U/μL)	14314ES
	Hifair UCF.ME® V omvänt transkriptas (200 U/μL)	14608ES
	UCF.ME® Uracil DNA Glycosylas(UDG/UNG), värmelabilt, 1 U/μL	14466ES
	UCF.ME® murin RNas-hämmare (40 U/µL)	14672ES
Lyo-Ready PCR monoenzymserie	Hieff UNICON® HotStart E-Taq DNA-polymeras, glycerolfri (5U/μL)	14316ES
	Hifair® V omvänt transkriptas, glycerolfri (600 U/μL)	11301ES
	Uracil DNA-glykosylas (UDG), värmelabilt (1 U/μL, glycerolfri)	10707ES
	Murin RNas-hämmare (200 U/µL, glycerolfri)	10703ES
RT-qPCR Master Mix	Hifair® C203P1 Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit（UDG Plus）	16630ES
	Hifair® V Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit（UDG Plus）	11899ES
	Hifair® Lyo Multiplex One Step RT-qPCR Kit	11831ES
qPCR Master Mix	Hieff Unicon® Universal TaqMan Pro U+ qPCR Mix（One Tube）	16710ES
	Hieff Unicon® Universal TaqMan Multiplex qPCR Master Mix（UDG plus）	13891ES
	Hieff Unicon® Superpro Ⅰ TaqMan qPCR Master Mix（UDG plus）	11827ES
	Hieff Unicon® Purepro Ⅰ TaqMan qPCR Master Mix（UDG plus）	11853ES
	Hieff Unicon® Universal TaqMan Multiplex qPCR Master Mix（UDG plus）	11893ES