--- Eliminerar bakteriell bakgrundsinterferens och RNas-kontamination
i patogendetektering i ett slag!
RNas-inhibitor (RNas-inhibitor, förkortad som RNasin) kan specifikt binda till RNas genom icke-kovalenta interaktioner för att bilda ett komplex, och därigenom inaktivera RNas och bevara integriteten av RNA. Det används i stor utsträckning i patogendetektionsmetoder som RT-qPCR, mNGS och tNGS. Under upptäckten av patogener är det avgörande att strikt kontrollera bakgrunden av bakteriell kontaminering av molekylära enzymer; om molekylära enzymer störs av bakgrundsbakterier kan de överskugga målnukleinsyror med låg förekomst eller detekteras tillsammans med dem, vilket påverkar tolkningen av resultaten.
Yeasen Ultra-Low Residual RNase Inhibitor
Yeasen UCF.ME® murin RNas-hämmare (Cat#14672ES/14673ES/14674ES) är en rekombinant mus-härledd RNas-hämmare uttryckt och renad i en löslig form från E. coli. Den har förmågan att brett hämma olika typer av RNaser, inklusive RNas A, B och C. Denna produkt har testats med RT-PCR och RT-qPCR och har visat sig vara kompatibel med konventionella omvända transkriptaser och en mängd olika DNA-polymeraser. Jämfört med mänskligt härledda RNas-hämmare saknar Yeasen UCF.ME® Murine RNase-hämmare de två cysteinrester som är mycket känsliga för oxidation i mänskliga proteiner, vilket ger högre antioxidantaktivitet. Den är särskilt lämplig för experiment som är känsliga för höga DTT-koncentrationer, såsom qPCR.
Jämfört med konventionella RNas-hämmare (Cat#10603ES/10610ES/14671ES), uppvisar Yeasen UCF.ME® Murine RNase-inhibitor lägre återstående nivåer av värdgenomiskt DNA, vilket hjälper till att hantera bakteriell bakgrundsinterferens vid detektion av patogener och förbättrar noggrannheten vid detektion.
Produktens egenskaper
- Ultralåg resthalt: E. coli DNA-resternivå < 0,1 kopior/100 U, lämplig för tillämpningar med strängare bakgrundsbakteriella krav.
- Bredspektrum RNas-hämmande aktivitet: Kan hämma RNaser inklusive RNas A, RNas B, RNas C och andra.
- Kompatibel med ett brett spektrum av reaktionsförhållanden: Aktiv under pH-förhållanden från 5,0 till 9,0 och temperaturer från 25°C till 60°C, lämplig för termofila omvända transkriptaser.
- Kompatibel med ett brett spektrum av nedströmsexperiment: Ingen påverkan på den enzymatiska aktiviteten hos SP6-, T7- eller T3 RNA-polymeraser, AMV, M-MLV omvända transkriptaser och Taq DNA-polymeraser.
- Batch-to-batch-stabilitet: UCF.ME® ultrarena molekylära enzymproduktionsplattform, med strikt kvalitetskontroll, säkerställer enhetlighet, stabilitet och snabb leverans av produkten.
Produktens prestanda
1) Inget exonukleas, snittenzym och RNas återstod
Figur 1. Detektion av nukleas, nicking-enzym och RNas-rester i UCF.ME® murin RNase-inhibitor.
Notera: N representerar den negativa kontrollen; 1, 2, 3 representerar tre uppsättningar av parallella experiment.
2）coli genomisk DNA-rest är mindre än 0,1 kopior/100 U, betydligt lägre än den konventionella versionen.
Genom att genomföra värd (E.coli) genomisk DNA-restdetektering på olika satser av UCF.ME® Murine RNase Inhibitor och jämföra den med värdrestnivåerna för konventionella murina RNas-hämmare, visar resultaten att den genomiska värd-DNA-resten av UCF.ME® Murine RNase Inhibitor är lägre än 0,1 kopior av den konventionella versionen/100 kopior/100 kopior.
Figur 2: Jämförelse av E. coli genomiska restdetekteringsresultat mellan UCF.ME® MRT och konventionell MRT.
3) Den RNas-hämmande förmågan är betydligt överlägsen den hos importerade märken.
Med användning av Total RNA som mall utfördes RT-qPCR-reaktionen med Hifair® V Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus) (Cat#13650ES) för att verifiera RNaseA-nedbrytningsförmågan hos UCF.ME® Murine RNase Inhibitor. Resultaten indikerade att den hämmande effekten av Yeasen UCF.ME® MRI på RNaseA är betydligt överlägsen den för liknande internationella konkurrenskraftiga produkter.
Figur 3: Validering av RNas-hämningsförmåga hos UCF.ME® MRI
Obs: Yeasen UCF MRT: 8 U UCF.ME® MRI + 80 ng RNaseA; Yeasen MRI: 8 U MRI + 80 ng RNaseA; Konkurrent N*: 8 U av en liknande konkurrerande produkt + 80 ng RNaseA; Kontroll: Ingen MRT och RNaseA.
Produktrekommendation
| Typ | Namn | Katt |
| Ultraren PCR-enzymserie med ultralåg värdrester | Hieff UCF.ME® Hotstart Sensitive Taq DNA-polymeras (5 U/μL) | 14314ES |
| Hifair UCF.ME® V omvänt transkriptas (200 U/μL) | 14608ES | |
| UCF.ME® Uracil DNA Glycosylas(UDG/UNG), värmelabilt, 1 U/μL | 14466ES | |
| UCF.ME® murin RNas-hämmare (40 U/µL) | 14672ES | |
| Högpresterande PCR monoenzymserie | Hieff UNICON® Hotstart E-Taq DNA-polymeras, 5 U/μL | 10726ES |
| Hifair® V omvänt transkriptas (200 U/μL) | 11300ES | |
| Uracil DNA Glycosylas (UDG/UNG), värmelabil, 1 U/μL | 10303ES | |
| Murin RNas-hämmare (40 U/µL) | 10603ES | |
| dNTP-mix (25 mM vardera) | 10125ES | |
| Lyo-Redo PCR monoenzymserie | Hieff UNICON® HotStart E-Taq DNA-polymeras, glycerolfri (5U/μL) | 14316ES |
| Hifair® V omvänt transkriptas, glycerolfri (600 U/μL) | 11301ES | |
| Uracil DNA-glykosylas (UDG), värmelabilt (1 U/μL, glycerolfri) | 10707ES | |
| Murin RNas-hämmare (200 U/µL, glycerolfri) | 10703ES |