Nyckelord:
Låg resthalt, förblandad, Universal Multi-Target, One-Tube, qPCR, High Sensitivity.
Abstrakt:
Den nya tredje generationens qPCR-blandning med ultralåg resthalt, förblandad för att säkerställa hög känslighet, stöder ett snabbt 30-minutersprotokoll och utmärker sig i multiplexförstärkning i olika scenarier.
Bakgrund:
Kommersiella molekylära enzymer, primärt producerade via rekombinant uttryck i konstruerade stammar (t.ex. E. coli), innehåller ofta återstående värdgenomiskt DNA. Faktorer som beredningsmiljön och mänsklig kontaminering ökar ytterligare sannolikheten för kvarvarande DNA i dessa enzymer. Detta kan leda till felaktig kvantifiering av värdnukleinsyrarester i kvalitetskontrollprodukter, vilket utgör säkerhetsrisker för biofarmaceutisk tillverkning. Under patogendetektering kan kontaminerade bakteriella nukleinsyror i bakgrunden överväldiga målnukleinsyror med låg förekomst eller samtidigt detekteras med dem, vilket äventyrar testnoggrannheten.
Totallösning
För att hantera störningar från bakgrundsbakterier och värdnukleinsyrarester i patogendetektion har YEASEN Biotech utvecklat en unik kontrollteknologi med ultralåg resthalt. Vi etablerade UCF.ME, en ultraren molekylär enzymproduktionsbas som följer GMP-standarder, med strikt överensstämmelse med ISO 13485 kvalitetsledningssystem i alla steg. Detta inkluderar rigorös kontroll över personal, maskiner, material (reagens och förbrukningsvaror), processer, miljö och standarder. Genom att integrera effektiva tekniska åtgärder, en ren produktionsmiljö och strikt kvalitetskontroll möjliggör vi storskalig produktion av olika UCF.METMultralåga restmolekylära enzymer.
Hieff UniconTM Pure Pro U+ qPCR Mix(Ett rör）（Katt#16713ES）är en noggrant utformad universell qPCR-blandning av YEASEN Biotech, som har låg värd-DNA-rester. Denna produkt är baserad på en ny generation av universell förblandad qPCR-blandning (Cat#16713ES) som effektivt kontrollerar det återstående genomiska DNA från värden (E. coli), samtidigt som de kontrollerar kvarvarande nivåer av vanliga patogena bakterier såsom Pseudomonas aeruginosa och föroreningar som härrör från människor. Eftersom denna förblandade lösning (Cat#16713ES) inte bara effektivt kontrollerar nivån av patogenrester utan också tar itu med problem med stabilitet vid multipel detektion och målmångsidighet, förbättrar den nyckelprestandaindikatorer som reagensens känslighet och specificitet. Det förbättrar avsevärt detektionseffektiviteten och kan användas i stor utsträckning i tillämpningsscenarier som detektion av patogena mikroorganismer.
Produktfördelar
- Låg bakgrundsrester – Ingen detektering av Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa och mänskligt härledd genomisk DNA-rester i 48 brunnar.
- Exceptionell förblandad stabilitet: Stabil vid 37°C i upp till 14 dagar, vid 4°C i upp till 28 dagar och efter 50 frys-upptiningscykler.
- Utmärkt reagensmångsidighet – Kompatibel med en mängd multiplex primer-prob-uppsättningar (validerade för över 40 olika typer av mål), med utmärkt amplifieringsprestanda.
- Hög sensitivitet och specificitet – Känsligheten kan detektera 250 kopior/ml, med specificitet som säkerställer inga toppar i 48 negativa brunnar.
- Stöder snabba protokoll – Kompatibel med snabba protokoll, resultat kan erhållas på bara 30 minuter.
- dUTP/UDG anti-kontaminationssystem – Innehåller ett dUTP/UDG anti-kontaminationssystem för att effektivt förhindra aerosolkontamination.
- Kompatibilitet med flera plattformar och system – Kompatibel med plattformar som Bio-Rad CFX96, ABI Q5, 7500, Slan, Tianlong och andra.
Prestanda höjdpunkter
1, Ultralåg bakgrundsbakterierester
Baserat på bedömningen av reagensbakgrundsnivåer av bakterierester, användningen av YEASENs ultralåg resthalt universal somblandad qPCR-blandning (Cat#16713ES) och konventionella reagens (utan rester kontroll) för NTC (ingen mallkontroll) amplifiering i en Escherichia coli (E. coli) system, med 16713ES som också genomgår NTC-amplifiering i både Pseudomonas aeruginosa och mänskligt härledda genomiska DNA-system. Resultaten visar att Cat#16713ES inte uppvisar någon amplifiering i 48 brunnar i NTC, indikerar försumbar bakgrunds-DNA-rest (E. coli, P. aeruginosa och humant DNA) i reagenset.
2、Enastående stabilitet för den färdigblandade förblandningen
Baserat på undersökningen av stabiliteten hos förblandad reagens, Cat#16713ES behandlades på tre sätt (4°C, 37°C och frys-upptining). Experimentgrupperna behandlades vid 4°C och 37°C under 7 dagar respektive och utsattes för 50 frys-upptiningscykler. Stabiliteten utvärderades mot kontrollgruppen (förvarad vid -20°C) under fyra multiplex amplifieringssystem (Grupp 1, 2 och 4 är 4-plex amplifieringssystem och grupp 3 är ett 3-plex amplifieringssystem), med vissa amplifieringsgrupper som dessutom utvärderades för stabilitet efter 14 dagars acceleration vid 37°C. Resultaten visade att Ct värde avvikelse (ΔCt värde) mellan experiment- och kontrollreagensen var inom ±0,5, och fluorescensvärdets avvikelse var inom 15 %, vilket indikerar att YEASENs förblandade reagens har utmärkt stabilitet i multiplexförstärkning.
3、Utmärkt reagensmångsidighet
Baserat på undersökningen av reagensens mångsidiga tillämpningsscenarier, YEASEN (Cat#16713ES) användes tillsammans med flera konventionella reagens för att validera amplifieringsprestanda under olika målscenarier. Resultaten visade att produkten uppvisar god amplifieringsprestanda över en mängd olika mål, inklusive patogener, mänskliga källor och växter, vilket indikerar en hög nivå av reagens mångsidighet.
4、Enastående förstärkningskänslighet
Baserat på en bedömning av reagenskänslighet utfördes en utvärdering av detektionshastigheten för Cat#16713ES i ett multiplex amplifieringssystem (4-plex) med hjälp av prover i ultralåga koncentrationer (250 kopior/ml). Resultaten indikerar att YEASENs Cat#16713ES uppvisar utmärkt förstärkningskänslighet, med en detektionsgräns på minst 250 kopior/ml.
5、Kompatibilitet med flera snabba protokoll
Baserat på undersökningen av amplifieringsprestanda för reagensets snabba protokoll, validerades sju gradientprover (1~10^6 kopior/μL) med både konventionella (1 timme och 6 minuter) och snabba protokoll (30 minuter) på samma kvantitativa PCR-instrument (ABI Q5). Resultaten visade att amplifieringseffektiviteten för snabbprotokollet kvarstod över 99%, och Ct-värdesavvikelsen (ΔCt-värdet) mellan de konventionella och snabba protokollen var inom ±0,5, med en fluorescensvärdeavvikelse inom ±10 %och amplifieringskurvorna visade en "S"-form.
IVD-detektionsreagensdelning
Som leverantör av life science-verktyg, YEASEN Biotech har tillhandahållit högkvalitativa och kostnadseffektiva råvaror till IVD-företag under lång tid. Förutom universell helt färdigblandad qPCR/RT-qPCR-masterblandningar, vi erbjuder en mängd andra qPCR/RT-qPCR-detektionsreagenser som hjälper IVD företagskunder arbetar tillsammans med effektiv upptäckt av mänskliga patogener och djursjukdomar.
| Produkttyp | Produkt funktion | Produktnamn | Artikelnummer |
| qPCR-blandning | Helt ny 3:e generationens universal helt färdigblandad, hög känslighet stöder snabb testning | 16710ES | |
| Högkänslig universal (5× koncentration) | Hieff UniconTM Universal TaqMan Multiplex qPCR Master Mix(UDG plus） | 13891ES | |
| 2:a generationens snabba helt färdigblandade | Hieff UniconTM Superpro Ⅰ TaqMan qPCR Master Mix(UDG plus） | 11827ES | |
| Värdfri ultralåg rest | Hieff UniconTM Purepro Ⅰ TaqMan qPCR Master Mix(UDG plus） | 11853ES | |
| Högkänslig universell frystorkning | Hieff UniconTM Universal TaqMan Multiplex qPCR Master Mix(UDG plus） | 11893ES | |
| RT-qPCR-blandning | Högkänslig universal snabb | HifairTM C203P1 Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit(UDG Plus） | 16630ES |
| helt färdigblandad universal | HifairTM V Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit(UDG Plus） | 11899ES | |
| Universal snabbt lyofiliserbar | 11831ES |