1. Bakgrund Introduktion
Streptavidin är ett biotinbindande protein som härrör från Streptomyces avidinii. Dess ospecifika bindning är mycket lägre än avidins, och jämfört med äggviteavidin, som har en positiv nettoladdning vid neutralt pH och innehåller cirka 7 % kolhydrater, har streptavidin mer gynnsamma kemiska egenskaper som nästan ingen nettoladdning vid neutralt pH och inga kolhydrater. Därför används det i stor utsträckning som ett alternativ till avidin.
2. Produktegenskaper
Tetramer strukturStreptavidin existerar som en homotetramer med en storlek av 66KDa;
Hög affinitet: Varje molekyl av streptavidin kan mycket specifikt binda till fyra molekyler av biotin, med en extremt stark affinitet mellan dem;
Breda tillämpningar: Dissociationskonstanten för streptavidin-biotinkomplexet är i det nanomolära området, en egenskap som vanligen används i molekylärbiologiska tillämpningar; I de flesta tillämpningar kan den användas omväxlande med antikroppsproteiner;
Extraktion av hög kvalitet: Erhålls genom rening från Streptomyces avidinii;
Figur 1. Streptavidin
Produkt Ansökan
Användning 1: Renat harts med streptavidin
1) TillämpningsprincipBaserat på interaktionen mellan streptavidin och biotin, är streptavidin starkt tvärbundet till 6 % agaros, och den unika beredningsprocessen ger det högre fysikalisk-kemiska egenskaper, vilket gör att det tål högre tryck. Det kan uppnå rening av målproteinet vid relativt höga flödeshastigheter, vilket gör det mer lämpligt för storskalig industriell proteinrening.
Figur 2. Reningsprincip för streptavidinharts
2）Yeasen har åtagit sig att förse dig med högeffektiva produkter för att rena mer perfekta proteiner åt dig.
Figur 3. Protein renat med streptavidinharts
3）Vanliga frågor| Fråga | Möjlig anledning | Rekommenderad lösning |
| Mottrycket i kolonnen är för högt | Packningen är blockerad | Rengör hartset. |
| Lyseringsbuffert innehåller små fasta partiklar, det rekommenderas att filtrera med 0,22μm eller 0,45μm filtermembran före laddning, eller centrifugera för att ta bort. | ||
| Provet är för trögflytande. | Provet innehåller hög koncentration av nukleinsyror, förläng lyseringstiden tills viskositeten minskar, eller tillsätt DNas I (slutkoncentration på 5 μg/ml), Mg2+ (slutkoncentration på 1 mM), inkubera på is i 10-15 minuter | |
| Bufferten är för trögflytande | Organiska reagenser eller proteinstabiliserande reagens (som glycerol, etc.) kan orsaka ökat mottryck, minska driftsflödet. | |
| Oavsett protein i elueringskomponent | Överdriven klyvning denaturerar proteinet av intresse | Använd milda lyseringsförhållanden. experimentella förhållanden är baserade på erfarenhet. |
| Målproteinet aggregerar för att producera utfällning | Tillsätt DTT till förcellslyslösning vid en slutlig koncentration av 1-10 mM. | |
| Målproteinet elueras inte fullständigt | Elueringsvolymen är för liten | Öka elueringsvolymen och minska elueringsflödet. |
| Elueringsbuffertens pH ändras | Använd nyberedd eluent | |
| Inkubationstiden för elueringsmedlet räcker inte | Öka inkubationstiden för elueringsbufferten med gelén. |
Användning 2: Streptavidin märkt med fluorescerande grupp och enzymkonjugat.
Figur 4. Olika konjugerade streptavidiner
1）Enzymkonjugerade streptavidiner- Pepparrotsperoxidas (HRP) konjugerad streptavidin
Ⅰ.Producerad av högrent streptavidin och pepparrotsperoxidas genom en speciell konjugeringsteknik;
Ⅱ.Behåller den höga specifika aktiviteten av peroxidas. Tillämpningar: Immunohistokemi (IHC), Immunocytokemi (ICC), In situ Hybridization (ISH), etc.
Rekommenderad koncentration: 0,01-0,1 µg/mL för WB (kemiluminescensmetod); 1-2 µg/mL för ELISA, HC/ICC, WB (substratfärgutveckling)
- Alkaliskt fosfatas (AP) konjugerat streptavidin
Ⅰ.Lämplig för fastfasanalys, vävnads-/cellfärgningssystem och blötapplikationer, med specifik kovalent koppling;
Ⅱ.Konjugatet är stabilt och mycket aktivt.
Tillämpningar: Immunhistokemi (IHC), Immunocytokemi (ICC), Enzyme-Linked Immunospot Assay (ELISPOT), Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA), In situ Hybridization (ISH) och blot-applikationer.
Rekommenderad koncentration: 1-2 µg/ml för ELISA, IHC/ICC; 0,1-1 µg/ml för WB
2) Fluoroforkonjugerade streptavidiner- Fluor® Fluorescein Conjugated Streptavidin
Ⅰ.Rekommenderas för rutinmässig immunofluorescens;
Ⅱ. Mycket renad med mycket låga ospecifika bindningsegenskaper;
Ⅲ.Hög affinitet för biotin;
Applikationer: Immunfluorescens (IF), Hybridisering in situ (ISH), Flödescytometri (Flödescyt).
Rekommenderad koncentration: 0,5-2 µg/ml (IF)
- DyLight™ Dye Conjugated Streptavidin
Ⅰ.Kan användas för att detektera biotinylerade andra antikroppar och andra stora molekyler i immunfluorescens, in situ hybridisering eller flödescytometriapplikationer;
Ⅱ. Mycket renad med mycket låga ospecifika bindningsegenskaper;
Ⅲ.Extremt hög affinitet för biotin;
Ⅳ.Hög fotostabilitet, pH-okänslig och ljusare fluorescens;
Applikationer: Immunfluorescens (IF), Hybridisering in situ (ISH), Flödescytometri (Flödescyt).
Rekommenderad koncentration: 0.5-2 µg/ml (IF)
Produktinformation
| Produktserie | Produktnummer | Produktnamn | Specifikation |
| Streptavidin | 35099ES | Streptavidin (pulver) | 100 mg/1 g |
| 35101ES | Streptavidin (5mg/ml) | 1 mg/5 mg/10 mg/100 mg/1 g | |
| Enzymkonjugerade streptavidiner | 35105ES | HRP Streptavidin | 100 μL |
| 35106ES | AP Streptavidin | 100 μL | |
| Fluorescensmärkt streptavidin | 35102ES | DyLight 405™ Streptavidin | 100 μL |
| 35103ES | YSFluorTM 488-konjugerad streptavidin | 100 μL | |
| 35104ES | YSFluorTM 647-konjugerad streptavidin | 100 μL | |
| 35107ES | YSFluorTM 584-konjugerad streptavidin | 100 μL | |
| 35108ES | Cy3-konjugerad streptavidin | 1 mg | |
| Streptavidin Purification Series | 20512ES | Streptavidin Agarose Resin 6FF | 5 ml/5 ml x 5/100 ml |
| 20513ES | BiotSep Streptavidin 6FF kromatografikolonn, 1 ml | 1 ml/1 ml×5 | |
| 20514ES | BiotSep Streptavidin 6FF kromatografikolonn, 5 ml | 5 mL/5 mL×5 |