Bakgrund
Transferrin, även känt som transferrin (TRF, Tf), ansvarar för att transportera järn som absorberas av matsmältningskanalen och järn som frigörs genom nedbrytning av röda blodkroppar. Det kommer in i benmärgen i form av trivalent järnkomplex (Tf-Fe3+) för produktion av mogna röda blodkroppar. Transferrin finns huvudsakligen i plasma. Transferrinet i plasma tillför järn till de flesta vävnader i kroppen, medan transferrinet som syntetiseras av dessa vävnader själva i områden som det inte kan nå producerar järnöverföring i det lokala området.
Figur 1. Transferrins struktur
Humant transferrin syntetiseras huvudsakligen i levern. Det är ett enkelkedjigt glykoprotein som består av två lober belägna vid den homologa N-terminalen och C-terminalen. Humant transferrin innehåller 678 aminosyrarester, en isoelektrisk punkt på 5,9 och en molekylvikt på 76 kD. Varje transferrinmolekyl kan bära 2 trevärda järnjoner (Fe3+). Interaktionen mellan transferrin och Fe3+ beror på pH. Vid pH 7,4 binder transferrin och Fe3+ effektivt, och de två separeras vid surt pH.
Existens
Holo-Transferrin 、 Delvis mättat transferrin 、 Apo-Transferrin
Funktionella mekanismer
Transferrin (Tf) binder järn genom att interagera med dess receptor, Transferrin Receptor 1 (TfR1). TfR1 är ett glykoprotein uttryckt på cellytan, sammansatt av två homodimera subenheter sammankopplade med disulfidbindningar. På cellytan interagerar Tf med Fe3+ för att bilda holo-Tf och binder till TfR1-receptorn och går in i endosomen under endocytos. I den sura endosommiljön separeras Fe3+ från Tf, och STEAP3 reducerar Fe3+ till Fe2+, som transporteras till cytoplasman av divalent metalljontransportör 1 (DMT1). Sedan bildar Tf som frisätter Fe3+ ett Tf/TfR1-komplex med TfR1 och migrerar tillbaka till cellytan genom exocytos. På cellytan separeras transferrin (Tf) från receptorn TfR1 för att bli apo-Tf och binds sedan på nytt med Fe3+ för att delta i järncykeln. Efter att hela processen är avslutad återvinns Tf och TfR1 och går in i nästa cykel av cellulärt järnupptag.
Figur 2. Mekanismdiagram för transferrincykeln[1]
Transferrins huvudsakliga funktion
- Undvik generering av fria radikaler och skydda celltillväxt.
- Antibakteriell, steriliserande, avgiftande
- Upprätthåll cellproliferation och tillväxt
- Främjar extracellulär lagring och transport av järn
Källor till transferrin
| Källa | Säkerhet | Batch-skillnader | |
| Naturligt extraherat transferrin | Extrakt från human och bovin plasma | Dålig säkerhet, slutprodukten kan innehålla patogener | Transferrin extraheras från olika partier av humant serum eller bovint serum, och dess prestanda varierar mycket |
| Rekombinant transferrin | Uttryckt från prokaryota och eukaryota celler | Bra säkerhet, slutprodukten innehåller inga patogener | Varje sats uttrycks med hjälp av samma cellinje, med stabil prestanda |
Produktegenskaper
Bra säkerhet: Produkten har klarat flera lager av kvalitetskontroll och testning, vilket undviker kontaminering av patogener;
Låg toxicitet: Cytotoxiciteten är mycket låg och har ingen inverkan på efterföljande experiment;
Stabil prestanda: Varje batch uttrycks från samma cellinje, med minimala prestandaskillnader och hög proteinrenhet
Lätt att använda: lägg helt enkelt till produkten till basen;
Allmänt tillämplig: kan användas för odling av olika typer av celler.
FAQ
F1: Bör extraherat transferrin eller rekombinant transferrin tillsättas till serumfritt odlingsmedium?
S: Extraherat transferrin har defekter som dålig säkerhet och stora skillnader mellan batch och batch. I synnerhet när extraherat transferrin tillsätts till serumfritt odlingsmedium för cellodling, kan det föra in mänskliga eller animala patogener (såsom galna ko-virus, Creutzfeldt-Jakob-virus och andra okända patogener) in i cellerna och kontaminera celler. Rekombinant transferrin undviker helt risken för patogenkontamination, så rekombinant transferrin bör tillsättas till serumfritt odlingsmedium.
F2: Bör järnmättat (Holo) transferrin eller apo (Apo) transferrin tillsättas till odlingsmediet?
S: När odlingsmediet inte innehåller järn eller järnhalten är låg, välj att tillsätta järnmättat (Holo) transferrin; när odlingsmediet är rikt på järn, välj apo transferrin.
F3: Vilken är bättre, järnmättat (Holo) transferrin eller apo (Apo) transferrin?
S: Det är omöjligt att teoretiskt sluta sig till effekten av de två, och experimentell testning krävs.
F4: Vad är koncentrationen av transferrin i serumfritt odlingsmedium?
Svar: Koncentrationen av transferrin är relaterad till celltypen. Den specifika koncentrationen är relaterad till celltillstånd, cellkoncentration och experimentellt syfte.Allmänna primära celler: 5-100 mg/L; äggstocksceller från kinesisk hamster: 10-50 mg/L; hybridom och Vero-celler: 5-20 mg/L
Beställningsinformation
| Produktnamn | Produktnummer | Specifikation |
| 40102ES60/80 | 100 mg | |
| Bovint transferrin (HOLO) | 40103ES60/80 | 100 mg/1 g |
| Humant transferrin (härlett från human plasma) | 40133ES60/76/80 | 100 mg/500 mg/1g |
| 92288ES60/76/80 | 100 mg/500 mg/1g | |
| 92289ES60/76/80 | 100 mg/5 |