แอนติบอดีต่อต้านการรับภาระช่วยในการวิเคราะห์ทางเภสัชจลนศาสตร์ของยา ADC

คอนจูเกตแอนติบอดี-ยา (ADC) คืออิมมูโนคอนจูเกตที่ประกอบด้วยแอนติบอดีโมโนโคลนอลที่เชื่อมกับยาที่เป็นพิษต่อเซลล์ (เรียกว่าเพย์โหลด) ผ่านตัวเชื่อมทางเคมี ส่วนประกอบที่ประกอบเป็น ADC ได้แก่ mAb ที่จำเพาะต่อแอนติเจนของเนื้องอก ตัวเชื่อมทางเคมีที่แยกออกได้หรือไม่ได้แยกออกได้อย่างเสถียร และเพย์โหลดที่เป็นพิษต่อเซลล์ที่มีศักยภาพ (รูปที่ 1)

รูปที่ 1: โครงสร้างของคอนจูเกตแอนติบอดี-ยา และคุณสมบัติของแอนติบอดี (และแอนติเจนเป้าหมาย) ตัวเชื่อม และส่วนประกอบของเพย์โหลดที่เป็นพิษต่อเซลล์^[1]

คุณสมบัติของเพย์โหลด

เพย์โหลดนั้นจะถูกผูกมัดอย่างโควาเลนต์กับแอนติบอดีผ่านตัวเชื่อม และยา ADC มีบทบาทสำคัญในการออกฤทธิ์ของยาทำลายเซลล์ภายในเซลล์ เนื่องจากกลไกการออกฤทธิ์จะกำหนดความแรงของ ADC ที่ได้ในฐานะสารประกอบต่อต้านมะเร็งและข้อบ่งชี้ที่อาจเกิดขึ้นได้ เพย์โหลดที่เหมาะสมควรมีลักษณะดังต่อไปนี้: มีพิษต่อเซลล์สูง ภูมิคุ้มกันต่ำ ความเสถียรสูง กลุ่มฟังก์ชันที่ปรับเปลี่ยนได้โดยไม่กระทบต่อประสิทธิผลอย่างมีนัยสำคัญ มีผลในการฆ่าผู้สังเกตการณ์ ความสามารถในการละลายที่เหมาะสม และเป้าหมายควรอยู่ภายในเซลล์ เนื่องจาก ADC ส่วนใหญ่ต้องเข้าไปในเซลล์เนื้องอกเพื่อปล่อยเพย์โหลดออกมา

การจำแนกประเภทบรรทุก

โหลดข้อมูลสามารถแบ่งได้เป็นประเภทที่เป็นพิษต่อเซลล์และไม่เป็นพิษต่อเซลล์ โดย ADC ส่วนใหญ่ใช้โหลดข้อมูลเป็นพิษต่อเซลล์ มีตัวแทนหลักสองประเภทของโหลดข้อมูลเป็นพิษต่อเซลล์ ได้แก่ สารยับยั้งไมโครทูบูลและสารยับยั้งดีเอ็นเอ โดยสารยับยั้งดีเอ็นเอแบ่งเพิ่มเติมได้อีกเป็นสารก่อความเสียหายต่อดีเอ็นเอและสารยับยั้งโทโพไอโซเมอเรส สารยับยั้งไมโครทูบูลสามารถขัดขวางไมโทซิส และเซลล์เนื้องอกแบ่งตัวเร็วกว่าเซลล์ปกติส่วนใหญ่ ทำให้สารยับยั้งไมโครทูบูลมีประสิทธิภาพมากกว่าในการฆ่าเซลล์มะเร็ง สารยับยั้งไมโครทูบูลแบ่งได้เป็นสองประเภท ประเภทหนึ่งกระตุ้นการเกิดพอลิเมอไรเซชันของไมโครทูบูล ซึ่งทำให้ไมโครทูบูลเติบโตอย่างควบคุมไม่ได้ เช่น อนุพันธ์โดลาสแตติน MMAE, MMAF อีกประเภทหนึ่งยับยั้งการประกอบไมโครทูบูลได้อย่างมีประสิทธิภาพ โดยทำให้เซลล์หยุดการแบ่งตัวแบบไมโทซิส เช่น อนุพันธ์มายแทนซีน DM1, DM4 สารยับยั้งไมโครทูบูลเป็นสารออกฤทธิ์ที่โตเต็มที่ที่ใช้อยู่ในปัจจุบัน โดยมีความเป็นพิษที่รุนแรงกว่ายาเคมีบำบัดแบบเดิมมาก แต่ก็มีปัญหาบางประการ เช่น สารยับยั้งไมโครทูบูลสามารถฆ่าเซลล์เนื้องอกได้เฉพาะในระยะแบ่งตัวของเซลล์เท่านั้น และไม่มีประสิทธิภาพต่อเซลล์มะเร็งที่ไม่แบ่งตัวและเซลล์มะเร็งที่หยุดนิ่ง และมีแนวโน้มที่จะดื้อยามากกว่า สารยับยั้ง DNA ที่ออกฤทธิ์ตลอดวงจรเซลล์ไม่เพียงแต่มีผลในการฆ่าเซลล์มะเร็งที่ไม่แบ่งตัวเท่านั้น แต่ยังฆ่าเซลล์มะเร็งที่ดื้อต่อสารยับยั้งไมโครทูบูลแบบคลาสสิกได้อีกด้วย เนื่องจากเป็นสารออกฤทธิ์รุ่นที่สาม สารยับยั้ง DNA จึงสามารถทำลายโครงสร้างและการทำงานของ DNA ได้โดยการแตกของสายคู่ การเติมหมู่อัลคิเลชัน การแทรกซึม การเชื่อมโยง และการยับยั้งโทโพไอโซเมอเรส I (TOPO1) ส่งผลให้เซลล์มะเร็งตาย

ในบรรดายา ADC 14 ชนิดที่ได้รับการอนุมัติ มียา ADC 6 ชนิดที่มีส่วนประกอบเป็น MMAE หรือ MMAF คิดเป็นเกือบ 50% นอกจากนี้ ยังมียาอีกกว่า 80 ชนิดที่อยู่ระหว่างการวิจัยโดยใช้ MMAE เป็นส่วนประกอบ ซึ่งทำให้โดลาสแตตินเป็นส่วนประกอบที่ใช้กันทั่วไปที่สุด

ตารางที่ 1: การจำแนกประเภทปริมาณสารพิษต่อเซลล์ทั่วไป

เป้าหมายการดำเนินการ	กลไก	การจำแนกประเภท
ไมโครทูบูล	สารยับยั้งไมโครทูบูล	โดลาสแตติน: MMAE, MMAF
		อนุพันธ์ของเมย์แทนซีน: DM1, DM4
		สารละลายไมโครทูบูล
		สารพิษฟองน้ำนุ่ม: ฮาลิคอนดริน
ดีเอ็นเอ	ความเสียหายของดีเอ็นเอ	คาลิเคียไมซิน
		พีบีดี
		ดูโอคาร์ไมซิน
	สารยับยั้งโทโพไอโซเมอเรส I	แคมโทธีซิน: DN38, Dxd

ส่วนประกอบของยา ADC และวิธีการวิเคราะห์ที่สอดคล้องกัน

ADC มีทั้งโมเลกุลขนาดใหญ่และโมเลกุลขนาดเล็ก ซึ่งต้องใช้การวิเคราะห์ทางชีวภาพและแพลตฟอร์มที่หลากหลายเพื่อวิเคราะห์ความหลากหลายของ ADC วิธีการวิเคราะห์โมเลกุลขนาดเล็ก LC-MS/MS แบบดั้งเดิมมักใช้ในการวิเคราะห์ปริมาณที่ยังไม่ได้จับคู่และการกระจายของ DAR (อัตราส่วนยาต่อแอนติบอดี ซึ่งแสดงถึงจำนวนโมเลกุลของปริมาณที่จับกับแอนติบอดีแต่ละตัวและเป็นคุณลักษณะสำคัญของ ADC) ในช่วงเวลาหนึ่ง ในขณะที่การวิเคราะห์การจับกับลิแกนด์ (LBA) และ LC-MS/MS สามารถใช้สำหรับการวิเคราะห์แอนติบอดีทั้งหมด (TAb) และ ADC ทั้งหมดได้ แอนติบอดีต่อปริมาณที่จับคู่มีบทบาทสำคัญในการวิเคราะห์ภูมิคุ้มกันของ ADC

การประยุกต์ใช้แอนติบอดีต่อต้านเพย์โหลด

• การวิเคราะห์เภสัชจลนศาสตร์ (PK) ของยา ADC ในพลาสมา/ซีรั่ม
• การกำหนดความสัมพันธ์ในการจับกับยา
• การวิเคราะห์ค่า DAR
• การประเมินประสิทธิผลของยา ADC

ข้อดีของผลิตภัณฑ์แอนติบอดีต่อต้านเพย์โหลด

• ความบริสุทธิ์สูง: ความบริสุทธิ์ได้รับการตรวจสอบโดย SDS-PAGE และ HPLC >95%
• ความสัมพันธ์สูง: ตรวจสอบโดย ELISA และวิธีการตรวจจับกิจกรรมอื่น ๆ ด้วยกิจกรรมสูง
• ความจำเพาะสูง: จดจำเป้าหมายได้อย่างเฉพาะเจาะจง
• การสนับสนุนทางเทคนิคระดับมืออาชีพ: การสนับสนุนทางเทคนิคระดับมืออาชีพเพื่อตอบคำถามก่อนและหลังการขายอย่างทันท่วงที

เลขที่แมว	ชื่อ	ขนาด
31901ES	แอนตี้-DM1 เมาส์ mAb	100ไมโครกรัม/1มก.
31902ES	แอนตี้-DXD Mouse mAb	100ไมโครกรัม/1มก.
31903ES	แอนตี้-MMAE Mouse mAb	100ไมโครกรัม/1มก.
31904ES	แอนตี้-MMAF Mouse mAb	100ไมโครกรัม/1มก.
31905ES	แอนตี้-SN-38 เมาส์ mAb	100ไมโครกรัม/1มก.

อ้างอิง:

[1] ซินดี้ เอช., แพทริเซีย เอส., วิลเลียม ดี.คอนจูเกตแอนติบอดี-ยาสำหรับมะเร็ง[J]. Lancet 2019, 394:793-804