การเพาะเลี้ยงเซลล์เป็นรากฐานสำคัญของการประยุกต์ใช้ในการวิจัยมากมาย ตั้งแต่การพัฒนายาไปจนถึงการบำบัดด้วยยีน อย่างไรก็ตาม การดูแลรักษาเซลล์ที่เจริญเติบโตและมีสุขภาพดีอาจเป็นเรื่องท้าทายหากไม่มีแนวทางและเครื่องมือที่เหมาะสม ไม่ว่าคุณจะเป็นนักวิทยาศาสตร์ที่มีประสบการณ์หรือเป็นมือใหม่ในการเพาะเลี้ยงเซลล์ การปรับปรุงทุกขั้นตอนของกระบวนการสามารถสร้างความแตกต่างได้ ในคู่มือนี้ เราจะแนะนำเคล็ดลับสำคัญ 5 ประการเพื่อให้แน่ใจว่าเซลล์เพาะเลี้ยงของคุณเจริญเติบโตได้ ตั้งแต่การย่อยอาหารไปจนถึงการป้องกันการปนเปื้อน
1. การปรับปรุงระบบย่อยเซลล์ของคุณให้สมบูรณ์แบบ
การย่อยเซลล์เป็นขั้นตอนสำคัญในการทดลองเพาะเลี้ยงเซลล์ ช่วยให้แยกเซลล์ออกจากพื้นผิวของเพาะเลี้ยงและแยกเซลล์ออกเป็นเซลล์แขวนลอยเดี่ยวสำหรับการเพาะเลี้ยงย่อยและการวิเคราะห์ในภายหลัง การเลือกเอนไซม์ย่อยที่เหมาะสมจะช่วยเพิ่มประสิทธิภาพการแยกเซลล์ ลดความเสียหายของเซลล์ และช่วยให้การทดลองดำเนินไปอย่างราบรื่น เพื่อช่วยให้คุณเลือกเอนไซม์ย่อยที่เหมาะสมที่สุดสำหรับความต้องการของคุณ เราได้จัดทำคู่มือเกี่ยวกับผลิตภัณฑ์เอนไซม์ที่ใช้กันทั่วไปและคุณลักษณะของผลิตภัณฑ์เหล่านั้น คุณสามารถเลือกผลิตภัณฑ์ที่เหมาะสมที่สุดได้ตามประเภทของเซลล์ ความต้องการของการทดลอง และการใช้งานต่อเนื่อง
เอนไซม์ย่อยอาหารทั่วไป
- ทริปซิน (ใช้ในการไฮโดรไลซ์โปรตีนระหว่างเซลล์)
- ทริปซินรีคอมบิแนนท์ (ปราศจากการปนเปื้อนจากสัตว์ เหมาะสำหรับการประยุกต์ใช้ทางชีวเภสัชกรรม)
- คอลลาจิเนส (ใช้ย่อยสลายเส้นใยคอลลาเจน เหมาะสำหรับการย่อยเนื้อเยื่อ)
- ทริปซินแบบผสม (เช่น แอคคูเทส ซึ่งช่วยรักษาแอนติเจนบนพื้นผิวเซลล์ได้ดีกว่า)
- ทางเลือกของทริปซิน (เช่น TrypLE™ เหมาะสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์แบบไม่ใช้ซีรั่ม)
- Dispase II (เพื่อแยกเนื้อเยื่อและเซลล์ต่างๆ)
เอนไซม์แต่ละชนิดมีการใช้งานและข้อดีเฉพาะตัว และการเลือกเอนไซม์ที่เหมาะสมจะช่วยปรับปรุงประสิทธิภาพการทดลองและคุณภาพของผลลัพธ์ของคุณได้อย่างมาก
ชื่อสินค้า | หมายเลขแมว | ข้อมูลจำเพาะ |
เพอร์ฟเซล™ทริปซิน-อีดีทีเอ (0.25%) เลขที่ ฟีนอลสีแดง | 40123ES60 | 100 มล. |
เพอร์ฟเซลล์™ ทริปซิน-ไม่มี EDTA (0.25%) ไม่มีฟีนอลเรด | 40124ES60 | 100 มล. |
เพอร์ฟเซลล์™ ทริปซิน (0.25%) ฟีนอลเรด | 40126ES60 | 100 มล. |
เพอร์ฟเซลล์™ ทริปซิน-EDTA (0.25%) ฟีนอลเรด | 40127ES60 | 100 มล. |
ทริปซิน 1:250(ผง) | 40101ES25 | 25 กรัม |
เพอร์ฟเซลล์™ ทริปซินรีคอมบิแนนท์-ผง- | 40512ES10/60 | 10 มก./100 มก. |
20416ES60 | 100 μจี | |
PerfCel Tryzyme™ Express เอนไซม์ (1X) ฟีนอลเรด | 40134ES60 | 100 มล. |
PerfCel Tryzyme™ เอนไซม์เอ็กซ์เพรส (1X) เลขที่ ฟีนอลเรด | 40135ES60 | 100 มล. |
สารละลายแยกเซลล์ ACCUTASE | 40506ES60 | 100 มล. |
ดิสเพส II | 40104ES60/80 | 100 มก./1 ก. |
2. การสร้างสภาพแวดล้อมการเพาะเลี้ยงที่เหมาะสม
วัฒนธรรมที่มีสุขภาพดีเริ่มต้นด้วยสภาพแวดล้อมที่เหมาะสม ซึ่งรวมถึงอุณหภูมิ ค่า pH ที่เหมาะสม และสื่อที่เหมาะสมสำหรับประเภทเซลล์ของคุณ
การเพาะเลี้ยงเซลล์แบบปราศจากซีรั่ม ได้กลายมาเป็นเทคโนโลยีหลักในการวิจัยทางชีววิทยา โดยรับประกันถึงความสามารถในการทำซ้ำได้ ความสม่ำเสมอ และมีมาตรฐานทางจริยธรรม การเพาะเลี้ยงเซลล์แบบดั้งเดิมนั้นอาศัยซีรั่มจากตัวอ่อนวัว (FBS) ซึ่งทำให้ผลการทดลองมีความแปรปรวนและมีความเสี่ยงด้านจริยธรรมจากแหล่งกำเนิดสัตว์ เพื่อรับมือกับความท้าทายเหล่านี้ นักวิจัยจำนวนมากจึงเลือกใช้อาหารเลี้ยงเชื้อที่ปราศจากซีรั่มมากขึ้นเรื่อยๆ
ในการวิจัยด้านภูมิคุ้มกัน การเพาะเลี้ยงเซลล์ลิมโฟไซต์ มีบทบาทสำคัญ โดยเฉพาะอย่างยิ่งในด้านการตอบสนองภูมิคุ้มกัน การพัฒนาวัคซีน และภูมิคุ้มกันบำบัดมะเร็ง เนื่องจากเป็นส่วนประกอบหลักของระบบภูมิคุ้มกัน ลิมโฟไซต์จึงต้องการสภาวะเพาะเลี้ยงเฉพาะเพื่อขยายพันธุ์และกระตุ้นการทำงานในหลอดทดลอง
นอกจากนี้, การเพาะเลี้ยงออร์แกนอยด์ ถือเป็นความก้าวหน้าที่สำคัญอีกประการหนึ่งในเทคโนโลยีการเพาะเลี้ยงเซลล์ ออร์แกนอยด์เป็นโครงสร้างเซลล์สามมิติที่สามารถจำลองเนื้อเยื่อและการทำงานของอวัยวะของมนุษย์ในหลอดทดลอง ซึ่งถือเป็นแพลตฟอร์มการวิจัยใหม่สำหรับการสร้างแบบจำลองโรค การคัดกรองยา และการแพทย์ฟื้นฟู โครงสร้างสามมิติของออร์แกนอยด์สามารถจำลองความซับซ้อนและการทำงานทางสรีรวิทยาของอวัยวะของมนุษย์ได้ดีขึ้น และกลายมาเป็นเครื่องมือสำคัญในการศึกษาพัฒนาการของอวัยวะ กลไกของโรค และการตอบสนองต่อการรักษา
ชื่อสินค้า | หมายเลขแมว | ข้อมูลจำเพาะ |
CelCulSF™ อาหารเลี้ยงเซลล์แมลง-ปราศจากเซรั่ม- | 40140ES | 1,000 มล. |
เซลล์เพาะเลี้ยง CelCulSF™ 293-ปราศจากเซรั่ม- | 40141ES | 1,000 มล. |
อาหารเพาะเลี้ยงเซลล์ลิมโฟไซต์ CelCulSF™-ปราศจากเซรั่ม- | 40142ES | 1,000 มล. |
สื่อเพาะเลี้ยงเซลล์ไฮบริด CelCulSF™-ปราศจากเซรั่ม- | 40143ES | 1,000 มล. |
เซลล์ต้นกำเนิดมีเซนไคมอล CelCulSF-เอ็มเอสซี-สื่อวัฒนธรรม-ปราศจากเซรั่ม- | 40144ES | 500 มล. |
CelCulSF™ สื่อเพาะเลี้ยงเซลล์ที่ยึดเกาะ-เซรั่มลดเลือน- | 40145ES | 1,000 มล. |
เซบรารี่® อาหารเลี้ยงเชื้อออร์แกนอยด์ในลำไส้ (หนู) | 41426ES60/76 | 100/500 มล. |
เซบรารี่® สื่อการเจริญเติบโตของออร์แกนอยด์มะเร็งลำไส้ (มนุษย์) | 41427ES50/60/76 | 50/ลิตร/500 มล. |
เซบรารี่® สื่อการเจริญเติบโตของออร์แกนอยด์มะเร็งกระเพาะอาหาร (มนุษย์) | 41428ES50/60/76 | 50/ลิตร/500 มล. |
เซบรารี่® สื่อการเจริญเติบโตของออร์แกนอยด์มะเร็งตับ (มนุษย์) | 41429ES50/60/76 | 50/ลิตร/500 มล. |
เซบรารี่® สื่อการเจริญเติบโตของออร์แกนอยด์มะเร็งเต้านม (มนุษย์) | 41430ES50/60/76 | 50/ลิตร/500 มล. |
เซบรารี่® สื่อการเจริญเติบโตของออร์แกนอยด์มะเร็งปอด (มนุษย์) | 41431ES50/60/76 | 50/ลิตร/500 มล. |
เซบรารี่® หลอดอาหาร สื่อการเจริญเติบโตของออร์แกนอยด์มะเร็ง (มนุษย์) | 41432ES50/60/76 | 50/ลิตร/500 มล. |
เซบรารี่® มะเร็งรังไข่ Organoid Growth Medium (มนุษย์) | 41433ES50/60/76 | 50/ลิตร/500 มล. |
Cebrary® สื่อการเติบโตของออร์แกนอยด์สำหรับมะเร็งตับอ่อน (มนุษย์) | 41434ES50/60/76 | 50/ลิตร/500 มล. |
3.การถ่ายโอนยีนที่มีประสิทธิภาพเพื่อการแสดงออกของยีนคุณภาพสูง
การถ่ายโอนยีนเป็นเทคนิคที่สำคัญในการวิจัยทางชีวการแพทย์ ช่วยให้สามารถนำกรดนิวคลีอิกจากภายนอก (เช่น DNA, mRNA, siRNA และ miRNA) เข้าไปในเซลล์เพื่อการแสดงออกของยีน การทำให้เงียบ หรือการศึกษาการทำงาน การเลือกรีเอเจนต์การถ่ายโอนยีนที่เหมาะสมกับประเภทเซลล์และกรดนิวคลีอิกที่หลากหลายถือเป็นสิ่งสำคัญสำหรับการทดลองที่ประสบความสำเร็จ
สารเคมีถ่ายโอนยีน รวมถึง สูตรที่ใช้ลิโพโซม PEI และแคลเซียมฟอสเฟตแต่ละข้อเสนอก็มีข้อดีที่แตกต่างกันออกไป
หมายเลขแมว | ชื่อสินค้า | กรดนิวคลีอิก | แอปพลิเคชัน |
40802ES | ดีเอ็นเอ | สารรีเอเจนต์การถ่ายโอนไลโปโซมประสิทธิภาพสูง | |
40804ES | แอลวี | เพิ่มความสามารถในการติดเชื้อเลนติไวรัส | |
40806ES | ไซอาร์เอ็นเอ ไมโครอาร์เอ็นเอ เอเอสโอ | รีเอเจนต์การถ่ายโอนยีนเฉพาะ siRNA และ miRNA ที่มีประสิทธิภาพในการน็อคดาวน์สูง | |
40808ES | ดีเอ็นเอ, ไซอาร์เอ็นเอ, ไมโครอาร์เอ็นเอ | รีเอเจนต์การถ่ายโอนยีนไลโปโซมที่ได้รับการอัพเกรดซึ่งสามารถดำเนินการถ่ายโอนยีน DNA และ RNA ในเซลล์หลายประเภท โดยยังคงแสดงผลดีต่อเซลล์ที่ถ่ายโอนยีนได้ยาก | |
40809ES | เอ็มอาร์เอ็นเอ | รีเอเจนต์การถ่ายโอนยีนเฉพาะ mRNA ที่มีประสิทธิภาพในการถ่ายโอนยีนสูงในเซลล์หลายประเภท | |
40815ES | ดีเอ็นเอ | สามารถนำไปประยุกต์ใช้ได้อย่างหลากหลายสำหรับการแสดงออกของโปรตีนและการบรรจุไวรัส (รูปแบบผง) | |
40816ES | ไฮเอฟ ทรานส์® โพลีเอทิลีนเอมีน ลิเนียร์ (PEI) เอ็มW40000-การสลายอย่างรวดเร็ว- | ดีเอ็นเอ | |
40820ES | ดีเอ็นเอ | สารเคมีถ่ายโอนยีนเฉพาะสำหรับการบรรจุไวรัส ซึ่งสามารถให้ผลผลิตที่สูงขึ้นสำหรับการบรรจุไวรัส AAV และ LV | |
40821ES | ดีเอ็นเอ | ||
40823ES | ดีเอ็นเอ | ประสิทธิภาพการถ่ายยีนสูงสุด เหมาะอย่างยิ่งสำหรับการผลิต AAV ในวัฒนธรรมการแขวนลอย โดยให้ผลผลิตสูงกว่า |
4. การแช่แข็งเซลล์ของคุณสำหรับการใช้งานในระยะยาว
การแช่แข็งเซลล์เป็นเทคนิคที่สำคัญสำหรับการเก็บรักษาเซลล์ในระยะยาว โดยมีจุดประสงค์เพื่อป้องกันการปนเปื้อน รักษาความสม่ำเสมอในการทดลอง อำนวยความสะดวกในการขนส่ง และจัดตั้งธนาคารเซลล์ ความเสี่ยงหลักระหว่างการแช่แข็ง ได้แก่ การก่อตัวของผลึกน้ำแข็งและความเสียหายของสารละลายเพื่อลดความเสี่ยงเหล่านี้ จำเป็นต้องใช้โปรโตคอลการแช่แข็งช้าและการละลายอย่างรวดเร็ว สารป้องกันการแข็งตัว เช่น กลีเซอรอลหรือไดเมทิลซัลฟอกไซด์ (DMSO) มักใช้เพื่อลดการก่อตัวของผลึกน้ำแข็งและความเครียดจากออสโมซิส
ชื่อสินค้า | หมายเลขแมว | ข้อมูลจำเพาะ |
การแช่แข็ง CellStore ของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม | 40128ES50 | 5×10 มล. |
การแช่แข็ง CellStore ของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม | 40128ES60 | 100 มล. |
เซลล์แมลง การเก็บรักษา การแช่แข็ง | 40129ES50 | 5×10 มล. |
เซลล์แมลง การเก็บรักษา การแช่แข็ง | 40129ES60 | 100 มล. |
สื่อแช่แข็งเซลล์แบบไม่มีซีรั่ม | 40151ES | 50มล./100มล. |
สารแช่แข็งเซลล์ที่ปราศจากซีรั่ม (ปราศจาก DMSO) | 40152ES | 100 มล. |
สารแช่แข็งเซลล์ปราศจากซีรั่ม (สำหรับเซลล์ต้นกำเนิด) | 40153ES | 100 มล. |
สารแช่แข็งเซลล์แบบไม่มีซีรั่ม (สำหรับเซลล์ต้นกำเนิด ปราศจาก DMSO) | 40154ES | 100 มล. |
5. การป้องกันการปนเปื้อนเพื่อวัฒนธรรมที่มีสุขภาพดี
การปนเปื้อนเป็นปัญหาที่แพร่หลายในการเพาะเลี้ยงเซลล์ ซึ่งมักส่งผลให้ผลการทดลองไม่เป็นไปตามเป้าหมายและเสียเวลาในการวิจัย การรับรู้ถึงการปนเปื้อนประเภทต่างๆ ถือเป็นสิ่งสำคัญสำหรับการป้องกันและแก้ไขอย่างมีประสิทธิภาพ
เซลล์สามัญ สิ่งปนเปื้อน
- แบคทีเรีย
- เชื้อรา
- ไมโคพลาสมา
- โปรโตซัว
- จุดสีดำ
- ไวรัส
- ข้ามสายพันธุ์
มาตรการป้องกัน ได้แก่ การใช้ยาปฏิชีวนะ การฆ่าเชื้ออุปกรณ์เป็นประจำ การปฏิบัติตามเทคนิคปลอดเชื้อ และการรักษาพื้นที่ทำงานให้สะอาด โดยทั่วไปแล้วแนะนำให้ทิ้งเชื้อที่ได้รับผลกระทบเมื่อตรวจพบการปนเปื้อน เว้นแต่เชื้อเหล่านั้นจะหายากหรือมีค่า ในกรณีดังกล่าว ควรดำเนินการเพื่อกำจัดสารปนเปื้อน แนะนำให้สร้างสายเซลล์สำรองหรือรับเชื้อใหม่ในบางสถานการณ์ การบำบัดเฉพาะที่มุ่งเป้าไปที่สารปนเปื้อนเฉพาะอาจช่วยในการฟื้นฟูเซลล์เพาะเลี้ยง การรักษาสุขอนามัยที่เหมาะสม การแยกอุปกรณ์อย่างเคร่งครัด และการรักษาสภาพแวดล้อมที่ปลอดเชื้อเป็นสิ่งสำคัญสำหรับการป้องกันการปนเปื้อนและการรับรองการทดลองเพาะเลี้ยงเซลล์ที่ประสบความสำเร็จ
พิมพ์ | ชื่อสินค้า | หมายเลขแมว | ข้อมูลจำเพาะ |
สารต้านเชื้อแบคทีเรีย | เพนิซิลลิน-สเตรปโตไมซิน (100) เหมาะสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ | 60162ES76 | 100 มล. |
60230ES07/60 | 3.2/100 กรัม | ||
เกลือเจนตามัยซินซัลเฟต | 60214ES03/08/25 | 1/5/25 กรัม | |
เมโทรนิดาโซล | 60223ES25/60 | 25/100 มก. | |
สารต้านเชื้อรา | แอมโฟเทอริซิน บี | 60238ES01/03 | 100 มก./1 ก. |
ไนสแตติน | 60219ES08 | 5 กรัม | |
60231ES03/08 | 1/5 มก. | ||
การตรวจหาไมโคพลาสมา | 40601ES10/20 | 10/20 ทดสอบ | |
40612ES25/60 | 25/100 ตัน | ||
การกำจัดไมโคพลาสมา | มายค์อะเวย์™ สเปรย์ (พร้อมใช้งาน) | 40605ES02/03/08 | 1/2/10500 มล. |
40607ES03/08 | 1/5 มล. | ||
40608ES03/08 | 1/5 มล. | ||
40609ES60 | 100 มล. | ||
40610ES60 | 100 มล. |
บทสรุป
การปรับปรุงกระบวนการเพาะเลี้ยงเซลล์เป็นสิ่งสำคัญในการสร้างผลลัพธ์ที่เชื่อถือได้และทำซ้ำได้ตั้งแต่การเลือกเอนไซม์ที่เหมาะสมสำหรับการย่อยไปจนถึงการป้องกันการปนเปื้อน ขั้นตอนต่างๆ ในกระบวนการทำงานล้วนมีความสำคัญ ด้วยการใช้สารเคมีและเทคนิคที่มีคุณภาพสูงจาก
ต้องการเรียนรู้เพิ่มเติมหรือไม่?
เยี่ยมชมเว็บไซต์ของเราเพื่อดูคำแนะนำผลิตภัณฑ์โดยละเอียดและโซลูชันเพิ่มเติมเพื่อปรับปรุงเวิร์กโฟลว์การเพาะเลี้ยงเซลล์ของคุณ ไม่ว่าคุณจะต้องการเอนไซม์ ตัวกลาง รีเอเจนต์สำหรับการถ่ายโอน หรือการควบคุมการปนเปื้อน
หากต้องการข้อมูลเพิ่มเติมหรือต้องการซื้อ โปรดเยี่ยมชม เว็บไซต์อย่างเป็นทางการ-