โปรโตคอล WNER Cytokine แบบคลาสสิกสำหรับการเพาะเลี้ยงออร์กานอยด์

ออร์แกนอยด์มีสามมิติ ในหลอดทดลอง โครงสร้างที่จำลองโครงสร้างและการทำงานของอวัยวะจริง โดยได้มาจากเซลล์ต้นกำเนิดหรือเซลล์พลูริโพเทนต์ โมเดลที่ประกอบตัวเองได้เหล่านี้จำลองความหลากหลายของเซลล์และความซับซ้อนของการทำงานของเนื้อเยื่อ ออร์แกนอยด์ช่วยส่งเสริมการวิจัยด้านชีววิทยาการพัฒนา กลไกของโรค การค้นพบยา และการแพทย์เฉพาะบุคคล โดยจัดเตรียมระบบที่เกี่ยวข้องทางสรีรวิทยาเพื่อศึกษาชีววิทยาของมนุษย์

การ วเนอร์ การรวมกันของไซโตไคน์ (วนท์-3เอ- หัว- อีจีเอฟ, และ อาร์-สปอนดิน 1) เป็นมาตรฐานทองคำสำหรับการเพาะเลี้ยงออร์แกนอยด์ที่หลากหลาย รวมถึงแบบจำลองของกระเพาะ ลำไส้ ตับ ตับอ่อน เต้านม และต่อมลูกหมาก ไซโตไคน์เหล่านี้ทำงานร่วมกันเพื่อสนับสนุนการต่ออายุ การแบ่งตัว และการแบ่งตัวเฉพาะเนื้อเยื่อของเซลล์ต้นกำเนิด

บทบาทและการประยุกต์ใช้ไซโตไคน์

• อาร์-สปอนดิน 1 (RSPO1)

การทำงาน:สารกระตุ้นการส่งสัญญาณ Secreted Wnt ที่ขับเคลื่อนการสร้างเซลล์ต้นกำเนิดใหม่และการขยายตัวของเซลล์ออร์แกนอยด์
กลไกที่สำคัญ-
• จับกับ Lgr5 (เครื่องหมายเซลล์ต้นกำเนิด) เพื่อขยายการส่งสัญญาณ Wnt/β-catenin
• ทำให้ β-catenin มีเสถียรภาพ โดยกระตุ้นยีนที่ส่งเสริมการแบ่งตัวของเซลล์ (c-myc, Cyclin D1)
• ต่อต้านการส่งสัญญาณ BMP เพื่อรักษาศักยภาพของเซลล์ต้นกำเนิด Lgr5⁺
แอปพลิเคชั่น: จำเป็นสำหรับการเพาะเลี้ยงออร์แกนอยด์ในกระเพาะอาหาร ลำไส้ ตับ และเต้านม

• วนท์-3เอ

การทำงาน:ตัวกระตุ้นหลักของเส้นทาง Wnt/β-catenin แบบดั้งเดิม
กลไกที่สำคัญ-
• จับกับตัวรับ Frizzled/LRP5/6 เพื่อทำให้ β-catenin มีเสถียรภาพ
• กระตุ้นกิจกรรมการถอดรหัส TCF/LEF ของนิวเคลียส
• ทำงานร่วมกับ EGF/Noggin เพื่อการบำรุงรักษาออร์แกนอยด์ในระยะยาว
แอปพลิเคชั่น:มีความสำคัญต่อการเพิ่มจำนวนของออร์แกนอยด์ในลำไส้ สมอง และตับ

• EGF (เอพิเดอร์มอล โกรท แฟคเตอร์)

การทำงาน:ลิแกนด์ตัวรับ ErbB ที่ส่งเสริมการพัฒนาของเยื่อบุผิว
กลไกที่สำคัญ-
• กระตุ้นการสร้างไดเมอร์ของ EGFR → กระตุ้นเส้นทาง MAPK/PI3K
• ยับยั้งการเกิดอะพอพโทซิสในโครงสร้างคริปต์วิลลัสในลำไส้
แอปพลิเคชั่น:มีความสำคัญต่อการเจริญเติบโตของออร์แกนอยด์ในลำไส้และเซลล์ต้นกำเนิดของก้อนเนื้อในสมอง

• หัว

การทำงาน:ตัวต่อต้านโปรตีนสร้างกระดูก (BMP) มีความสำคัญต่อการสร้างสมดุลของการส่งสัญญาณ Wnt ในช่องของเซลล์ต้นกำเนิด
กลไกที่สำคัญ-
• จับและทำให้ BMP4/7 เป็นกลาง ทำลายแกนยับยั้ง BMP-PTEN-β-catenin
• ปลดปล่อยการยับยั้งเส้นทาง Wnt ทำให้สัญญาณที่ขึ้นอยู่กับ β-catenin ขยายขึ้น
• รักษาการแสดงออกของเครื่องหมายเซลล์ต้นกำเนิด Lgr5 เพื่อการมีอายุยืนยาวของออร์แกนอยด์
แอปพลิเคชั่น: จำเป็นสำหรับการเพาะเลี้ยงออร์แกนอยด์ของตับ ลำไส้ และท่อนำไข่ในระยะยาว

• เครือข่ายการส่งสัญญาณแบบผสมผสาน

RSPO1-Wnt3A-EGF-น็อกกิน ร่วมมือกันเลียนแบบสภาพแวดล้อมของเซลล์ต้นกำเนิดในร่างกาย:

1. RSPO1 + Wnt3A เสริมสร้างการแพร่กระจายที่ขับเคลื่อนโดย Wnt/β-catenin

2. อีจีเอฟ กระตุ้นเส้นทางการเอาชีวิตรอดเพื่อต่อต้านอะพอพโทซิส

3. หัว ขัดขวางการยับยั้ง Wnt ที่เกิดจาก BMP ช่วยให้เซลล์ต้นกำเนิดขยายตัวได้อย่างยั่งยืน

ระบบนี้รองรับการเจริญเติบโตของออร์แกนอยด์ที่แข็งแรงและความแม่นยำของโครงสร้างในเนื้อเยื่อหลายประเภท

เหตุใดจึงควรเลือก Yeasenไซโตไคน์คือ?

- ปลอดสัตว์ | กำจัดความเสี่ยงจากการปนเปื้อน (ไวรัส, เชื้อโรค)

- ความบริสุทธิ์สูง | >95% โดย SDS-PAGE

- เอนโดทอกซินต่ำ | <0.01 EU/μg สำหรับการใช้งานที่ละเอียดอ่อน

- ความสม่ำเสมอของแบตช์ ประสิทธิภาพที่เชื่อถือได้ในทุกล็อตการผลิต

- กิจกรรมที่ได้รับการตรวจสอบ | แสดงให้เห็นในออร์แกนอยด์ของเนื้องอก (ปอด ปากมดลูก รังไข่ ตับอ่อน ลำไส้ใหญ่และทวารหนัก) และออร์แกนอยด์ปกติ (ลำไส้ของมนุษย์/หนู)

ข้อมูลการตรวจสอบจากวัฒนธรรมออร์แกนอยด์

Human Wnt3a, Human RSPO1, Human noggin และ Human EGF ได้รับการพิสูจน์แล้วในแบบจำลองในหลอดทดลอง เช่น ออร์แกนอยด์เนื้องอกของมนุษย์ เช่น มะเร็งปอด มะเร็งปากมดลูก มะเร็งรังไข่ มะเร็งตับอ่อน และมะเร็งลำไส้ และออร์แกนอยด์ปกติ เช่น ออร์แกนอยด์ลำไส้เล็กของมนุษย์และหนู

กิจกรรมสูง

รูป 1-มนุษย์ Wnt3a-วัดจากความสามารถในการกระตุ้นกิจกรรม Topflash reporter ในเซลล์ไตของตัวอ่อนมนุษย์ HEK293T ED50 สำหรับผลดังกล่าวนี้คือ 25 นาโนกรัม/มล.

รูป 2- วัดจากความสามารถในการกระตุ้นกิจกรรม Topflash reporter ในเซลล์ไตของตัวอ่อนมนุษย์ HEK293T EC50 สำหรับผลกระทบนี้คือ 1.0 - 10.0 ng/mL ในการมีอยู่ของ Wnt3a แบบรีคอมบิแนนท์ 5 ng/mL

สินค้าที่เกี่ยวข้อง

ชื่อสินค้า	หมายเลขแมว	ข้อมูลจำเพาะ
มนุษย์ Wnt-3a	92294ES10	10 ไมโครกรัม
	92294ES60	100 ไมโครกรัม
	92294ES80	1 มก.
มนุษย์ RSPO1	92278ES10	10 ไมโครกรัม
	92278ES60	100 ไมโครกรัม
	92278ES80	1 มก.
มนุษย์หัวสมอง	92623ES10	10 ไมโครกรัม
	92623ES50	50 ไมโครกรัม
	92623ES60	100 ไมโครกรัม
	92623ES80	1 มก.
EGF ของมนุษย์	92708ES60	100 ไมโครกรัม
	92708ES76	500 มก.
	92708ES80	1 มก.

สิ่งสำคัญที่ต้องจดจำ

- โปรโตคอล WNER สามารถใช้ได้ทั่วไปสำหรับ กระเพาะอาหาร, ลำไส้, ตับ, ตับอ่อนและวัฒนธรรมออร์แกนอยด์อื่น ๆ

- Yeasenไซโตไคน์ช่วยให้มั่นใจ ความสามารถในการทำซ้ำได้สูง และ การขยายตัวของออร์แกนอยด์ที่แข็งแกร่ง ด้วยการควบคุมคุณภาพที่เข้มงวด

สำหรับการเพิ่มประสิทธิภาพโปรโตคอลหรือสั่งซื้อจำนวนมาก โปรดติดต่อทีมงานด้านเทคนิคของเรา