เมื่อใช้เอนไซม์ที่มีความเที่ยงตรงสูงแบบดั้งเดิมสำหรับ PCR ย่อมต้องพบกับปัญหายุ่งยากบางประการอย่างหลีกเลี่ยงไม่ได้ ตัวอย่างเช่น ความเที่ยงตรงอาจไม่เพียงพอ ส่งผลให้เกิดการกลายพันธุ์หรือการลบออกในเบสเป้าหมายแม้หลังจากจัดลำดับชิ้นส่วนที่ขยายแล้ว เวลาในการขยายยังค่อนข้างนาน บางครั้ง การขยายชิ้นส่วนขนาด 5 กิโลเบสอาจใช้เวลานานเกือบ 2 ชั่วโมง ตอนนี้ XiaoYi ขอแนะนำ PCR ความเที่ยงตรงสูงแบบรวดเร็วเพื่อแก้ปัญหาของคุณ! -- Hieff Canace™ AdvanceFast PCR Master Mix (พรีมิกซ์ PCR ความเร็วสูงพิเศษที่มีความเที่ยงตรงสูง)
การ 2× ฮิฟฟ์ คานาเซ™ AdvanceFast PCR Master Mix (พร้อมสีย้อม) ประกอบด้วยตัวบ่งชี้อิเล็กโทรโฟรีซิสที่เติมไว้ล่วงหน้า ทำให้สามารถใช้ผลิตภัณฑ์ PCR สำหรับอิเล็กโทรโฟรีซิสได้โดยตรง ผลิตภัณฑ์ที่ถูกขยายจะมีปลายทู่ ส่วนผสมเอนไซม์ที่มีความเที่ยงตรงสูงนี้มีข้อดีคือรวดเร็ว เรียบง่าย มีความไวสูง จำเพาะสูง และเสถียร ในระบบปฏิกิริยา จำเป็นต้องเติมไพรเมอร์และเทมเพลตเท่านั้น นอกจากนี้ ผลิตภัณฑ์ยังมีสารป้องกันเฉพาะ ซึ่งช่วยให้มั่นใจได้ว่าส่วนผสม PCR ที่มีความเที่ยงตรงสูงจะรักษากิจกรรมที่เสถียรแม้จะแช่แข็งและละลายซ้ำแล้วซ้ำเล่า
คุณสมบัติผลิตภัณฑ์
- สูง ความภักดี: ต่ำ ไม่ตรงกัน ประเมิน, กับ เอ ฐาน ไม่ตรงกัน อัตราส่วน ของ 231/300,000 ใน สูง จีซี เสี่ยงต่อการกลายพันธุ์ ลำดับ;
- เร็ว การขยายเสียง ความเร็ว: ส่วนขยาย ประเมิน เช่น เร็ว เช่น 5 วินาที ต่อ กิโลไบต์;
- กว้าง ความสามารถในการใช้งาน: มีความสามารถ ของ ครอบคลุม ยีน กับ 20-80% จีซี เนื้อหา, ทนได้ หนู ไลเสท และ 20% เลือด;
- ดี ความเสถียร: สามารถ เป็น เก็บไว้ ที่ 37 องศาเซลเซียส สำหรับ 7 วัน ปราศจาก กระทบกระเทือน ผลิตภัณฑ์ ผลงาน;
- เร็ว และ สะดวก: อย่างง่าย เพิ่ม ไพรเมอร์ และ เทมเพลต สำหรับ การขยายเสียง, มา กับ กำลังโหลด ย้อม สำหรับ โดยตรง การวิเคราะห์ทางอิเล็กโทรโฟเรซิส
การสาธิตการทำงานของผลิตภัณฑ์
ความเที่ยงตรงสูง อัตราการไม่ตรงกันต่ำ
โดยใช้จีโนมของสปีชีส์ต่าง ๆ เป็นแม่แบบ ได้มีการคัดเลือกชิ้นส่วนที่มี GC สูงจำนวน 6 ชิ้นซึ่งมีแนวโน้มสูงที่จะเกิดการกลายพันธุ์/สูญเสียเบสสำหรับการขยายพันธุ์ จากนั้นโคลนผลิตภัณฑ์ PCR ที่เกี่ยวข้องลงในเวกเตอร์ และโคลนเดี่ยว 100 ชิ้นสำหรับแต่ละลำดับจะถูกเลือกสำหรับการจัดลำดับเพื่อยืนยันการเกิดความไม่ตรงกัน/การกลายพันธุ์ของเบส ผลลัพธ์แสดงให้เห็นว่ามาสเตอร์มิกซ์ PCR ที่มีความเที่ยงตรงสูงอย่างรวดเร็ว (10164ES) มีอัตราการเกิดความไม่ตรงกัน/การกลายพันธุ์ของเบสที่เหนือกว่าเมื่อเทียบกับรีเอเจนต์แบรนด์ในประเทศและต่างประเทศ
ระยะเวลาขยายได้ถึง 5 วินาที/กิโลไบต์
การใช้เอนไซม์พรีมิกซ์แบบรวดเร็วที่มีความเที่ยงตรงสูง (10164ES) และผลิตภัณฑ์ T สามารถขยายชิ้นส่วนที่มีความยาวต่างกัน (0.4-10 kb) จากเทมเพลต DNA จีโนมของมนุษย์ 100 นาโนกรัมด้วยอัตราการขยาย 5 วินาที/kb โดยต้องใช้เวลาขยาย 5 วินาที/kb ผลการทดลองแสดงให้เห็นว่าเอนไซม์พรีมิกซ์แบบรวดเร็วที่มีความเที่ยงตรงสูง (10164ES) สามารถขยายชิ้นส่วนที่มีขนาดภายใน 10 kb ด้วยอัตราการขยาย 5 วินาที/kb
สามารถขยายชิ้นส่วนยีนที่มีเนื้อหา GC ต่างกันได้
การใช้เอนไซม์พรีมิกซ์ที่มีความเที่ยงตรงสูงอย่างรวดเร็ว (10164ES) เพื่อขยายชิ้นส่วนยีนที่มีเนื้อหา GC 23-76% จากเทมเพลต DNA จีโนมของมนุษย์ โดยกำหนดเวลาการขยายไว้ที่ 5 วินาที/กิโลเบส ผลลัพธ์แสดงให้เห็นว่าผลิตภัณฑ์มีความจำเพาะในการขยายที่ดี และสามารถขยายชิ้นส่วนที่มีเนื้อหา GC ที่แตกต่างกันได้
มีความสามารถในการขยายชิ้นส่วนยีนที่มีเนื้อหา GC แตกต่างกัน
การใช้เอนไซม์พรีมิกซ์ความเร็วสูงแบบรวดเร็ว (10164ES) เพื่อขยายชิ้นส่วนที่มีความยาวแตกต่างกันจากตัวอย่างที่แตกต่างกัน โดยตั้งเวลาขยายไว้ที่ 5-10 วินาทีต่อกิโลเบส ผลลัพธ์บ่งชี้ว่าผลิตภัณฑ์นี้แสดงให้เห็นถึงความจำเพาะในการขยายที่ยอดเยี่ยม และเข้ากันได้กับการขยายชิ้นส่วนต่างๆ จากเทมเพลตต่างๆ
หมายเหตุ: 1. DNA จีโนมของหนู 1 กิโลเบส 2. DNA จีโนมของหนู 2 กิโลเบส 3. DNA จีโนมของหนู 6 กิโลเบส 4. DNA จีโนมของข้าวโพด 1 กิโลเบส 5. DNA จีโนมของข้าว 2 กิโลเบส-A 6. DNA จีโนมของข้าว 2 กิโลเบส-B 7. cDNA ของเซลล์มนุษย์ 293 1 กิโลเบส 8. cDNA ของเซลล์มนุษย์ 293 2 กิโลเบส 9. cDNA ของเซลล์มนุษย์ 293 3 กิโลเบส 10. cDNA ของเซลล์มนุษย์ 293 12 กิโลเบส 11. น้ำซุป E. coli 8 กิโลเบส 12. น้ำซุป E. coli 16 กิโลเบส 13. DNA จีโนมของข้าว 10 กิโลเบส-A 14. DNA จีโนมของข้าว 10 กิโลเบส-B 15. DNA จีโนมของข้าว 10 กิโลเบส-C 16. DNA จีโนมของข้าว 20 kb-A; 17. DNA จีโนมของข้าว 20 kb-B; 18. การขยายโดยตรงในเลือดมนุษย์ 3 kb
อัตราการตรวจจับการขยายเทมเพลตที่สูงระหว่างสายพันธุ์ที่แตกต่างกัน
การใช้เอนไซม์พรีมิกซ์แบบรวดเร็วที่มีความเที่ยงตรงสูง (10164ES) สามารถขยายชิ้นส่วนเนื้อหา GC ต่างๆ ที่มีขนาดตั้งแต่ 0.5-10 kb ใน Arabidopsis, rapeseed และมันฝรั่ง โดยมีระยะเวลาขยาย 5 วินาทีต่อ kb ผลลัพธ์แสดงให้เห็นว่าเอนไซม์พรีมิกซ์แบบรวดเร็วที่มีความเที่ยงตรงสูง (10164ES) สามารถรับประกันการขยายที่ประสบความสำเร็จได้
โดยใช้เอนไซม์พรีมิกซ์ที่มีความเที่ยงตรงสูงแบบรวดเร็ว (10164ES) ลำดับสุ่ม (เลือกแบบสุ่ม) จาก Arabidopsis, rapeseed, fruit fly, Caenorhabditis elegans และ zebrafish ที่มีขนาดชิ้นส่วนตั้งแต่ 0.5-10 kb และครอบคลุมเนื้อหา GC 20-80% ได้รับการขยายเวลาการขยายเวลาตั้งไว้ที่ 5 วินาที/kb ผลการทดลองแสดงให้เห็นว่าเอนไซม์พรีมิกซ์ที่มีความเที่ยงตรงสูงแบบรวดเร็ว (10164ES) มีอัตราการตรวจจับสูง
เสถียรภาพที่ดี
การใช้เอนไซม์พรีมิกซ์ความแม่นยำสูงแบบเร่งรัด (10164ES) ที่ได้รับการเร่งความร้อนและเก็บรักษาที่อุณหภูมิ 37℃ เป็นเวลา 3 วันและ 7 วันตามลำดับ เพื่อขยายชิ้นส่วน DNA ขนาด 3 kb และ 5 kb จาก DNA ของจีโนมมนุษย์ 100 นาโนกรัม โดยกำหนดเวลาขยายที่ 5 วินาที/kb ผลลัพธ์แสดงให้เห็นว่าผลิตภัณฑ์มีเสถียรภาพที่ดี
คำติชมการทดลองใช้ของลูกค้า
สัตว์ gDNA-120bp-50%GC
การประเมินของลูกค้า: กระบวนการ PCR รวดเร็ว แถบมีความเหมาะสม และสามารถโหลดลงในอิเล็กโทรโฟรีซิสเจลอะกาโรสได้โดยตรง แถบของแบรนด์ N จะเอนไปทางด้านบน ซึ่งอาจเกิดจากอิทธิพลของบัฟเฟอร์ของมันเอง และเนื่องจากไม่ได้เพิ่มบัฟเฟอร์สำหรับโหลด ผลิตภัณฑ์นี้สามารถแทนที่เอนไซม์ที่มีความเที่ยงตรงสูงในโปรโตคอลการทดลองปัจจุบันของฉันได้
ปลูก cDNA-729bp-45.13%GC
การประเมินของลูกค้า: เมื่อเปรียบเทียบกับแบรนด์ T แถบโคลนจะชัดเจนและสม่ำเสมอกว่า และกระบวนการ PCR ทั้งหมดก็เร็วกว่า ไม่จำเป็นต้องเพิ่มสีย้อมเพิ่มเติมเมื่อทำเจล ซึ่งสะดวกและประหยัดเวลามาก
จุลินทรีย์ gDNA-1158、1953bp-58.8%、52.9%GC
การประเมินของลูกค้า: เมื่อเปรียบเทียบกับแบรนด์ V ผลลัพธ์ก็ใกล้เคียงกันแต่โดยส่วนตัวแล้ว ฉันคิดว่ายังดีกว่าอีกด้วย
ปลูก cDNA-2000bp-40%GC
การประเมินของลูกค้า: ผลลัพธ์ดีมากและแถบก็ใส
คู่มือการเลือก PCR ความเที่ยงตรงสูง
| การวางตำแหน่งผลิตภัณฑ์ | ชื่อสินค้า | แมว# |
| 5s/kb รับประกันความเที่ยงตรงและความเร็ว (ด้วย ย้อม) | 10164ES | |
| 5s/kb รับประกันความเที่ยงตรงและความเร็ว (ไม่มี Dye) | 2× ฮิฟฟ์ คานาเซ™ แอดวานซ์ฟาสต์ พีซีอาร์ มาสเตอร์ มิกซ์ | 10163ES |
| 83×Taq อัตราการตรวจจับสูง (ด้วยสีย้อม) | 2×ไฮเอฟ คานาซ™ พลัส PCR มาสเตอร์ มิกซ์(พร้อมสีย้อม) | 10154ES |
| 83×Taq เอนไซม์เดี่ยว + บัฟเฟอร์แยก | 10153ES |