กรดนิวคลีอิกเป็นรากฐานของการวิจัยทางชีววิทยาโมเลกุลทั้งหมด นอกจากนี้ คุณภาพของกรดนิวคลีอิกที่สกัดออกมายังเป็นหนึ่งในปัจจัยสำคัญที่กำหนดความสำเร็จหรือความล้มเหลวของการทดลองต่อเนื่อง เมื่อพัฒนารีเอเจนต์การสกัดกรดนิวคลีอิก นอกจากส่วนประกอบทางเคมีทั่วไปแล้ว กรดนิวคลีอิกโมเลกุลเล็กหรือเอนไซม์บางชนิดสามารถปรับปรุงประสิทธิภาพการสกัดหรือขจัดการรบกวนของสารที่ไม่ใช่เป้าหมายได้อย่างมาก และกลายมาเป็นส่วนประกอบที่สำคัญในการสกัดกรดนิวคลีอิก
เรื่องสารช่วยการตกตะกอนกรดนิวคลีอิก
RNA พาหะ
- แนวคิดและการทำงานของ RNA พาหะ
RNA ตัวพา หรือที่เรียกอีกอย่างว่าสารช่วยตกตะกอนกรดนิวคลีอิกในภาษาจีน ในกระบวนการสกัดกรดนิวคลีอิก หลอดเหวี่ยงที่ใช้ในการสกัดส่วนใหญ่ทำจากโพลีโพรพีลีน มีไฟฟ้าสถิตย์บนผนังหลอดซึ่งจะดูดซับกรดนิวคลีอิก การใช้ RNA ตัวพาในกระบวนการสกัดและการทำให้บริสุทธิ์สามารถช่วยให้กรดนิวคลีอิกขจัดผลไฟฟ้าสถิตย์ ทำให้มั่นใจได้ว่ากรดนิวคลีอิกสามารถดูดซับได้ดีบนคอลัมน์การทำให้บริสุทธิ์ ปรับปรุงประสิทธิภาพการชะล้าง และด้วยเหตุนี้ จึงสามารถกู้คืนกรดนิวคลีอิกในตัวอย่างได้มากที่สุด
- ชนิดทั่วไปของ RNA ตัวพา
เนื่องจากเป็นสารเสริมสำหรับการตกตะกอนกรดนิวคลีอิก Carrier RNA มีหลายประเภท เช่น เกลือโพแทสเซียม PolyA, RNA E. coli ทั้งหมด, RNA ยีสต์ทั้งหมด, tRNA เป็นต้น
- ปัญหาทั่วไปในการใช้งาน RNA พาหะ
หลังจากวางไว้ที่อุณหภูมิห้องเป็นระยะเวลาหนึ่งแล้ว ยังสามารถใช้งาน Carrier RNA ได้หรือไม่ การสลายตัวของ Carrier RNA ส่งผลต่อการใช้งานหรือไม่ Carrier RNA ส่งผลกระทบต่อการทดลองต่อเนื่องหรือไม่
Carrier RNA จะถูกละลายในสารป้องกัน RNA Carrier RNA ในรูปแบบของเหลวจะมีผลกระทบเพียงเล็กน้อยเมื่อวางไว้ที่อุณหภูมิ 37°C หรืออุณหภูมิห้องเป็นระยะเวลาสั้นๆ (ภายใน 7 วัน) โดยพื้นฐานแล้ว Carrier RNA จะเป็นชิ้นส่วนที่มีขนาดระหว่าง 500 nt ถึง 1,000 nt การเสื่อมสภาพเล็กน้อยไม่ส่งผลต่อการใช้งานปกติ สำหรับการใช้งานต่อเนื่อง เช่น PCR เชิงปริมาณเรืองแสง Carrier RNA จะไม่มีผลต่อค่า Ct สำหรับการใช้งานต่อเนื่อง เช่น NGS สามารถเติมได้ตามความต้องการจริง
- การแนะนำผลิตภัณฑ์ RNA พาหะ
ชื่อสินค้า | ผลิตภัณฑ์ ตัวเลข | ข้อมูลจำเพาะ | เงื่อนไขการจัดเก็บและอายุการเก็บรักษา |
สารพาหะ RNA 6 μg/μL | 19701ES | 1มล. / 5มล. / 100มล. | เก็บรักษาที่อุณหภูมิ -25 ถึง -15 °C อายุการเก็บรักษา 2 ปี |
ผง RNA ตัวพา 216 μg/หลอด | 19703ES | 1หลอด / 100หลอด / 1000หลอด | เก็บรักษาไว้ที่อุณหภูมิห้อง อายุการเก็บรักษา 2 ปี |
19704ES | 1หลอด / 100หลอด / 1000หลอด | เก็บรักษาไว้ที่อุณหภูมิห้อง อายุการเก็บรักษา 2 ปี |
สารละลายอะคริลาไมด์เชิงเส้น
- แนวคิดและฟังก์ชันของสารละลายอะคริลาไมด์เชิงเส้น
ลิเนียร์อะคริลาไมด์ มีชื่อภาษาอังกฤษว่า Linear Acrylamide (Linear Polyacrylamide หรือ LPA) เป็นสารตกตะกอนร่วมที่ช่วยตกตะกอนกรดนิวคลีอิกในระหว่างขั้นตอนการทำกรดนิวคลีอิกให้บริสุทธิ์
- ลักษณะของสารละลายอะคริลาไมด์เชิงเส้น
เป็นสารพาหะที่เป็นกลางและไม่มีแหล่งกำเนิดทางชีวภาพ ดังนั้นจึงไม่ประกอบด้วยกรดนิวคลีอิกหรือนิวคลีเอสที่อาจปนเปื้อน
จะไม่รบกวนการอ่านค่า A260/A280 และจะไม่ยับยั้งกิจกรรมของโพลิเมอเรสและเอนไซม์จำกัดเอ็นโดนิวคลีเอส
มีความเข้ากันได้กับการประยุกต์ใช้ทางชีววิทยาโมเลกุลอื่นๆ ตามมา เช่น PCR และการย่อยด้วยเอนไซม์
สามารถช่วยตกตะกอน DNA และ RNA ในระดับพิกกรัมหรือสูงกว่า (รวมถึงโอลิโก) ความยาวของชิ้นส่วนที่กู้คืนได้อยู่เหนือ 20 นิวคลีโอไทด์ และกรดนิวคลีอิกทั้งแบบสายเดี่ยวและแบบสายคู่สามารถใช้ได้
- การแนะนำผลิตภัณฑ์
ชื่อสินค้า | ผลิตภัณฑ์ ตัวเลข | ข้อมูลจำเพาะ | เงื่อนไขการจัดเก็บและอายุการเก็บรักษา |
สารละลายอะคริลาไมด์เชิงเส้น (5 มก./มล.) | 10408ES | 1 มล. | เก็บไว้ที่ 4 °C. อายุการเก็บรักษา 3 ปี. |
เอนไซม์เสริมการสกัดกรดนิวคลีอิก
อาร์เอ็นเอส เอ
- แนวคิดและหน้าที่ของ RNase A
ไรโบนิวคลีเอสเอ (RNase A) เป็นเอนโดริโบนิวคลีเอสที่ย่อยสลายไซโทซีน (C) หรือยูราซิล (U) บนอาร์เอ็นเอสายเดี่ยวโดยเฉพาะ การใช้งานไรโบนิวคลีเอสเอ (RNase A) ที่พบมากที่สุดคือการกำจัดอาร์เอ็นเอระหว่างการเตรียมพลาสมิดดีเอ็นเอหรือดีเอ็นเอจีโนม นอกจากนี้ ผลิตภัณฑ์นี้ยังสามารถใช้ในการทดลองทางชีววิทยาโมเลกุล เช่น การทดสอบการป้องกัน RNase และการวิเคราะห์ลำดับอาร์เอ็นเอ
- ลักษณะเฉพาะของ RNase A
RNase A ได้มาจากตับอ่อนของวัว ไม่มีการปนเปื้อนของเอ็นโดและเอ็กโซนิวคลีเอสดีออกซีไรโบนิวคลีเอส สามารถใช้โดยตรงได้โดยไม่ต้องอุ่นเครื่องก่อน และทนทานต่อสภาพแวดล้อมที่มีอุณหภูมิสูง
- การแนะนำผลิตภัณฑ์
ชื่อสินค้า | ผลิตภัณฑ์ ตัวเลข | ข้อมูลจำเพาะ | เงื่อนไขการจัดเก็บและอายุการเก็บรักษา |
RNase A(100 มก./มล.) | 10406ES | 1 มล. | เก็บรักษาที่อุณหภูมิ -20°C อายุการเก็บรักษา 2 ปี |
RNase A(10 มก./มล.) | 10405ES | 1มล. | เก็บไว้ที่อุณหภูมิห้อง.อายุการเก็บรักษาคือ 1 ปี. |
10407ES | 100มก./1ก. | เก็บรักษาไว้ที่อุณหภูมิห้อง อายุการเก็บรักษา 2 ปี |
ดีออกซีไรโบนิวคลีเอส I (ดีเอ็นเอส I)
ดีออกซีไรโบนิวคลีเอส I (DNase I) เป็นเอ็นโดนิวคลีเอสที่พบในเซลล์และเนื้อเยื่อต่างๆ โดยจะกำหนดเป้าหมายและแยกพันธะฟอสโฟไดเอสเทอร์ที่อยู่ติดกับไพริมิดีน โดยสร้างโพลีนิวคลีโอไทด์ที่มีกลุ่มฟอสเฟตที่ปลาย 5' และกลุ่มไฮดรอกซิลที่ปลาย 3' ผลิตภัณฑ์ย่อยขั้นต่ำโดยเฉลี่ยคือพอลิเมอร์เทตระนิวคลีโอไทด์ DNase สามารถเร่งปฏิกิริยาของ DNA ในรูปแบบต่างๆ เช่น DNA สายเดี่ยว DNA สายคู่ และแม้แต่โครมาติน (ซึ่งอัตราการแยกตัวได้รับผลกระทบจากฮิสโตน) ในการทดลองทางชีววิทยาโมเลกุล มักใช้เพื่อแยก DNA ออกจากโปรตีนหรือใส่รอยหยักใน DNA เพื่อแทรกเบสที่มีฉลากลงใน DNA
2.ลักษณะของ DNAse I
ช่วงการทำงานที่เหมาะสมของ DNase I คือ pH 7-8 และกิจกรรมของมันขึ้นอยู่กับ Ca2+ และสามารถถูกกระตุ้นด้วยไอออนโลหะที่มีประจุไฟฟ้าสองชนิด เช่น Co2+, เอ็มเอ็น2+,สังกะสี2+, ฯลฯ 5 mM Ca2+ สามารถปกป้องเอนไซม์ไม่ให้ถูกไฮโดรไลซ์ได้ โดยมีแมกนีเซียม2+เอนไซม์นี้สามารถจดจำและตัดไซต์ใดๆ บนสาย DNA ทั้งสองสายได้อย่างสุ่ม ในขณะที่มี Mn2+สามารถจดจำสาย DNA ทั้งสองสายได้พร้อมกันและตัดที่ตำแหน่งเดียวกันเกือบหมด
3.การแนะนำผลิตภัณฑ์
ชื่อสินค้า | ผลิตภัณฑ์ ตัวเลข | ข้อมูลจำเพาะ | เงื่อนไขการจัดเก็บและอายุการเก็บรักษา |
ดีออกซีไรโบนิวคลีเอส I (DNase I) จากตับอ่อนของวัว | 10607ES | 15KU/10×15KU | เก็บรักษาที่อุณหภูมิ -20°C อายุการเก็บรักษา 2 ปี |
ดีออกซีไรโบนิวคลีเอส I (DNase I) จากตับอ่อนของวัว | 10608ES | 25 มก./100 มก./1ก. | เก็บรักษาที่อุณหภูมิ -20°C อายุการเก็บรักษา 2 ปี |
โปรตีเนส เค
1.แนวคิดและหน้าที่ของโปรตีเนสเค
โปรตีเนสเค (Proteinase K) เป็นซีรีนโปรตีเอสที่มีกิจกรรมการแตกตัวที่หลากหลาย มีน้ำหนักโมเลกุลสัมพัทธ์ประมาณ 29.3 kDa และสามารถแตกตัวของพันธะเปปไทด์ปลายคาร์บอกซิลของกรดอะมิโนอะลิฟาติกและกรดอะมิโนอะโรมาติก โปรตีเนสเคมีการใช้งานที่หลากหลายและสามารถใช้ในงานทดลอง เช่น การเตรียมดีเอ็นเอโครโมโซมสำหรับการวิเคราะห์ด้วยอิเล็กโทรโฟรีซิสแบบเจลแบบพัลส์ฟิลด์ การบล็อตแบบเวสเทิร์น และการกำจัดนิวคลีเอสในการเตรียมดีเอ็นเอและอาร์เอ็นเอ สารทำให้เสียสภาพ เช่น SDS (1%) สามารถเพิ่มกิจกรรมของสารนี้ได้
2.ลักษณะของโปรตีเนสเค
มาจากยีสต์สายพันธุ์ที่มีการรีคอมบิแนนท์ทางพันธุกรรม
ปราศจาก RNase และ DNase
มีฤทธิ์และเสถียรในยูเรียและ SDS
มีฤทธิ์ในช่วง pH กว้าง (pH 4.0 - 12.0) และช่วง pH ที่เหมาะสมคือ pH 7.5 - 9.0
ชื่อสินค้า | ผลิตภัณฑ์ ตัวเลข | ข้อมูลจำเพาะ | เงื่อนไขการจัดเก็บและอายุการเก็บรักษา |
10401ES | 100มก./1ก./5ก./100ก. | เก็บไว้ที่อุณหภูมิ 4°C อายุการเก็บรักษาคือ 3 ปี. | |
โปรตีเนส เค โซลูทิโอ (20 มก./มล.) | 10412ES | 1มล./10มล./25มล./500มล. | เก็บไว้ที่อุณหภูมิ 4°C อายุการเก็บรักษา 2 ปี. |
สารละลายโปรตีเนสเค (20 มก./มล.) | 10410ES | 1มล./10มล./25มล./500มล. | เก็บไว้ที่อุณหภูมิ 4°C อายุการเก็บรักษา 2 ปี. |
สารทำให้เสถียร RNA
สารละลาย RNA เสถียรสำหรับเนื้อเยื่อสัตว์และพืช
1.หน้าที่ของสารละลาย RNA stabilizer สำหรับเนื้อเยื่อสัตว์และพืช
RNases พบได้ทั่วไปในสิ่งแวดล้อมและมีแนวโน้มที่จะย่อยสลาย RNA ในตัวอย่างเนื้อเยื่อสัตว์และพืชที่เพิ่งเก็บมาใหม่ๆ เลือด ของเหลวในร่างกาย ฯลฯ สารคงสภาพเนื้อเยื่อ RNAsafe สำหรับเนื้อเยื่อสัตว์และพืช (RNAsafe Tissue Stabilizer) ได้รับการพัฒนาเป็นพิเศษเพื่อทำให้ RNA ในตัวอย่างที่เก็บมาเสถียรและปกป้อง RNA เนื่องจากเป็นสารละลายที่ไม่เป็นพิษ จึงสามารถแทรกซึมเข้าไปในเนื้อเยื่อและทำลาย RNases ในร่างกายได้อย่างรวดเร็ว
2.คุณลักษณะของสารละลาย RNA stabilizer สำหรับเนื้อเยื่อสัตว์และพืช
ใช้งานง่ายมาก เพียงแค่ตัดเนื้อเยื่อสดเป็นชิ้นๆ ขนาดพอเหมาะ (≤0.5 ซม.) แล้วจุ่มลงใน RNAsafe ที่มีปริมาตร 5 ถึง 10 เท่า
ระยะเวลาการทำให้คงตัวยาวนาน: เนื้อเยื่อ/เซลล์ที่แทรกซึมด้วย RNAsafe สามารถเก็บรักษาได้ที่อุณหภูมิ 37°C เป็นเวลา 1 วัน ที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 1 สัปดาห์ ที่อุณหภูมิ 4°C เป็นเวลา 4 สัปดาห์ และสำหรับการจัดเก็บในระยะยาวที่อุณหภูมิ -20°C/-80°C
ความเข้ากันได้กับปลายทางที่กว้างขวาง: สามารถใช้งานร่วมกับวิธีการแยก RNA เกือบทั้งหมด เช่น HieffTM Total RNA Extraction Reagent (หมายเลขแคตตาล็อก: 10606ES60) และชุดสกัด RNA เชิงพาณิชย์เกือบทั้งหมด รวมถึงวิธีการสกัดด้วยคอลัมน์เหวี่ยงและวิธีการทำให้บริสุทธิ์ด้วยลูกปัดแม่เหล็ก
การประยุกต์ใช้ของวัสดุที่หลากหลาย: สามารถใช้เพื่อการเก็บรักษาเนื้อเยื่อของสัตว์และพืชต่างๆ (เช่น สมอง หัวใจ ตับ ตับอ่อน ไต ม้าม อัณฑะ กล้ามเนื้อ ลำต้นและใบของพืช ฯลฯ) และยังใช้สำหรับยีสต์ เซลล์เพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ ฯลฯ ได้อีกด้วย
3.การแนะนำผลิตภัณฑ์
ชื่อสินค้า | ผลิตภัณฑ์ ตัวเลข | ข้อมูลจำเพาะ | เงื่อนไขการจัดเก็บและอายุการเก็บรักษา |
สารคงสภาพเนื้อเยื่อ RNAsafe RNAsafe | 10604ES60 | 100 มล. | เก็บรักษาไว้ที่อุณหภูมิห้อง อายุการเก็บรักษา 5 ปี. |
สินค้าที่เกี่ยวข้อง
ชื่อสินค้า | ผลิตภัณฑ์ ตัวเลข | ข้อมูลจำเพาะ | เงื่อนไขการจัดเก็บและอายุการเก็บรักษา |
ไลโซไซม์ | 10402ES | 5/50 จี | เก็บรักษาที่อุณหภูมิ -20°C อายุการเก็บรักษา 3 ปี. |
ไลติเคส (10 U/μL) | 10403ES | 1500/3000/10000 ยู | เก็บไว้ที่ -20°C. |
สไนล์เลส | 10404ES | 5/10 จี | เก็บไว้ที่อุณหภูมิ 2-8°C อายุการเก็บรักษา 2 ปี. |
RNAsafe-ไอซ์ | 10605ES | 100 มล. | เก็บไว้ที่อุณหภูมิห้อง อายุการเก็บรักษา 2 ปี. |