สาระสำคัญของการวัดปริมาณไลบรารี NGS คือการวัดปริมาณกรดนิวคลีอิก (DNA หรือ RNA) การวิเคราะห์ปริมาณไลบรารี NGS ที่แม่นยำมีความสำคัญอย่างยิ่งในการรับข้อมูลการจัดลำดับที่มีคุณภาพสูง หากความเข้มข้นเชิงปริมาณของไลบรารี NGS สูง ผลผลิตของข้อมูลการจัดลำดับอาจต่ำเนื่องจากการจัดกลุ่มไม่เพียงพอ อย่างไรก็ตาม ความเข้มข้นเชิงปริมาณที่ต่ำอาจทำให้เกิดสัญญาณรบกวนระหว่างคลัสเตอร์เพื่อสร้างข้อมูลคุณภาพต่ำ และอาจนำไปสู่ความล้มเหลวในการจัดลำดับ นอกจากนี้ เมื่อฟลักซ์การจัดลำดับของเครื่องจัดลำดับเพิ่มขึ้น ไลบรารี NGS หลายตัวมักจะรวมกันเพื่อจัดลำดับ ตามข้อกำหนดของขนาดข้อมูลการจัดลำดับ ไลบรารี NGS ที่มีปริมาณโมลาร์ที่สอดคล้องกันจะผสมกันตามผลเชิงปริมาณเพื่อรักษาเสถียรภาพของขนาดข้อมูลตัวอย่างแต่ละตัวอย่าง ดังนั้น การวัดปริมาณไลบรารี NGS ที่แม่นยำจึงมีความสำคัญอย่างยิ่ง

ปัจจุบันมีวิธีหลักสองวิธีในการหาปริมาณไลบรารี NGS ได้แก่ วิธีการดูดกลืนรังสีอัลตราไวโอเลตและวิธีการใช้สีย้อมเรืองแสง NanoDrop เป็นเครื่องมือหาปริมาณ DNA ที่ออกแบบขึ้นตามหลักการดูดกลืนรังสีอัลตราไวโอเลต ส่วน Qubit เป็นเครื่องมือหาปริมาณ DNA ที่พัฒนาขึ้นตามหลักการของสีย้อมเรืองแสง ความแม่นยำเชิงปริมาณและต้นทุนของทั้งสองวิธีนี้แตกต่างกัน วิธีคิวบิตเป็นที่แนะนำเป็นหลักที่นี่ แล้วทำไมเราถึงแนะนำคิวบิตให้คุณล่ะ ผลิตภัณฑ์คิวบิตที่จัดหาโดยบริษัทมีลักษณะอย่างไร Yeasen? โปรดอ่านต่อ...

1. ทำไมเราจึงแนะนำ Qubit ให้กับคุณ?

2. ผลิตภัณฑ์ Qubit ที่จัดจำหน่ายโดยมีคุณสมบัติเด่นอะไรบ้าง Yeasen-

• Qubit ทำงานอย่างไร?
• สินค้ายอดนิยมที่จัดจำหน่ายโดย Yeasen
• คุณสมบัติผลิตภัณฑ์

3. เลือก Qubit สำหรับตัวอย่างที่แตกต่างกันอย่างไร?

1. ทำไมเราจึงแนะนำ Qubit ให้กับคุณ?

ไม่มีข้อสงสัยเลยว่า Qubit ดีกว่า Nanodrop แล้วทำไม qubit ถึงดีกว่า nanodrop? ความแตกต่างระหว่าง qubit และ nanodrop คืออะไร? ประการแรก ดังที่ได้กล่าวไปก่อนหน้านี้ ทั้งสองแตกต่างกันในหลักการของการวัดปริมาณ DNA โดย NanoDrop ได้รับการออกแบบโดยอาศัยการดูดกลืนแสงอัลตราไวโอเลต หลักการของวิธีการดูดกลืนแสงอัลตราไวโอเลตคือมีเบสพิวรีนและไพริมิดีนในส่วนประกอบของกรดนิวคลีอิก และเบสเหล่านี้มีพันธะคู่คอนจูเกต มีการดูดกลืนแสงที่แข็งแกร่งที่ 250-280 นาโนเมตรในบริเวณ UV และค่าการดูดกลืนสูงสุดคือประมาณ 260 นาโนเมตร ดังนั้น การดูดกลืนแสง UV ของกรดนิวคลีอิกจึงสามารถใช้เพื่อการวัดปริมาณความเข้มข้นได้ NanoDrop ใช้งานง่ายและรวดเร็ว แต่ไม่สามารถแยกแยะระหว่าง DNA, RNA, กรดนิวคลีอิกที่ย่อยสลาย, นิวคลีโอไทด์อิสระ และสิ่งเจือปนอื่นๆ ได้ ไม่เหมาะสำหรับการรับข้อมูลเชิงปริมาณที่แม่นยำจากห้องสมุด อย่างไรก็ตาม การวัดปริมาณด้วยคิวบิตถือเป็นทางเลือกที่ดีที่สุดสำหรับการวัดปริมาณไลบรารี NGS ที่แม่นยำ โดยเฉพาะการวัดปริมาณดีเอ็นเอ ดังนั้น การวัดปริมาณดีเอ็นเอด้วยคิวบิตมีคุณสมบัติอย่างไร โปรดดูตารางต่อไปนี้:

2. ผลิตภัณฑ์ Qubit ที่จัดจำหน่ายโดยมีคุณสมบัติเด่นอะไรบ้าง Yeasen-

ก่อนที่จะแนะนำคุณลักษณะของผลิตภัณฑ์ Qubit ที่จัดหาโดย Yeasenมาทำความเข้าใจกันดีกว่าว่ามันทำงานอย่างไร

2.1 Qubit ทำงานอย่างไร?

หลักการของ Qubit คือการใช้สีย้อมเรืองแสงเพื่อจับกับโมเลกุลของ DNA เพื่อปล่อยแสงเรืองแสง จากนั้นจึงวัดความเข้มของแสงเรืองแสงเพื่อให้ได้ความเข้มข้นของกรดนิวคลีอิก สีย้อมเรืองแสงจะเรืองแสงหลังจากจับกับสายคู่ของ DNA เท่านั้น และแสงเรืองแสงที่เกิดขึ้นจะแปรผันตามความเข้มข้นของ DNA

2.2 สินค้าที่ได้รับความนิยมจาก Yeasen

การ ชุดทดสอบ 1×dsDNA HS สำหรับ Qubit® (หมายเลขสินค้า: 12642ES) พัฒนาขึ้นบนพื้นฐานของ ชุดทดสอบ dsDNA HS สำหรับชุด Qubit® (หมายเลขสินค้า: 12640ES) เป็นสารละลายผสมล่วงหน้า Qubit ที่พร้อมใช้งานเพื่อเจือจางสีย้อมเข้มข้นในชุดเดิมให้เป็นสารละลายที่ใช้งานได้ เมื่อใช้งาน คุณเพียงแค่ผสมของเหลวที่ใช้งานได้กับตัวอย่างที่ต้องการทดสอบเพื่อกำหนดความเข้มข้นของตัวอย่างด้วยเครื่องวัดฟลูออโรมิเตอร์ Qubit® ซึ่งสะดวกต่อการใช้งานมากกว่า

2.3 คุณสมบัติผลิตภัณฑ์

เรียบง่ายและใช้งานง่าย: ของเหลวผสมสำเร็จรูปพร้อมใช้งาน ไม่จำเป็นต้องเตรียมของเหลวทำงาน การทำงานเรียบง่าย ประหยัดเวลาเชิงปริมาณมากขึ้น

รูปที่ 1 กระบวนการของชุดทดสอบ dsDNA HS สำหรับ Qubit

ความไวสูงพิเศษ: การวัดปริมาณที่แม่นยำด้วยการเจือจางแบบไล่ระดับ 64 เท่า dsDNA 0.2-100 ng มีความสัมพันธ์เชิงเส้นที่ดี

ความจำเพาะสูง: การตรวจจับ dsDNA ที่มีความจำเพาะ มีความทนทานต่อสารมลพิษทั่วไปบางชนิดได้ดีเยี่ยม

ความเร็วในการจับยึดสีที่รวดเร็ว: ความอิ่มตัวสามารถเข้าถึงได้ภายใน 2 นาที จึงไม่จำเป็นต้องรอผลการอ่านเชิงปริมาณที่แม่นยำอย่างรวดเร็ว

ความเสถียรสูง: สัญญาณการเรืองแสงคงอยู่เป็นเวลา 3 ชั่วโมง และความแม่นยำเชิงปริมาณไม่ได้รับผลกระทบหลังจากผ่านไป 20 วันที่อุณหภูมิห้อง

รูปที่ 1 การทดสอบความคงตัวของผลิตภัณฑ์ ผลการทดสอบแสดงให้เห็นว่ายังคง มีเสถียรภาพหลังจากเก็บไว้ที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 2 สัปดาห์ (ค่าเบี่ยงเบนระหว่างค่าที่วัดได้และค่าเชิงทฤษฎีน้อยกว่า 10%)

หมายเหตุ: เลือก dsDNA สองความเข้มข้น และเก็บ Thermo#Q33230 ไว้ที่ 4℃ Yeasen#12642 เก็บไว้ที่ 4℃ และ Yeasen#12642 ที่เก็บไว้ที่อุณหภูมิห้อง (ประมาณ 25℃) ถูกนำมาใช้เพื่อกำหนดค่าความเข้มข้นในเวลาต่าง ๆ และอัตราการเบี่ยงเบนระหว่างการวัดแต่ละครั้งและการวัดครั้งแรก (แสดงเป็น 0d) ได้ถูกคำนวณ

รูปที่ 2 การทดสอบความคงตัวของผลิตภัณฑ์ ความเสถียรสูง ผลการทดสอบมีความเกี่ยวข้องสูงภายในระยะเวลาใช้งาน

3. เลือก Qubit สำหรับตัวอย่างที่แตกต่างกันอย่างไร?

คิวบิต การวัดปริมาณที่รวดเร็ว! การใช้คิวบิตเพื่อการวัดปริมาณในไลบรารีมีข้อดีหลายประการ กระบวนการตรวจจับของคิวบิตรวดเร็วและมีประสิทธิภาพสามารถได้ผลลัพธ์ของการจัดลำดับภายในไม่กี่วินาทีสำหรับตัวอย่างเดียว และสามารถแสดงความเข้มข้นได้โดยตรง ซึ่งใช้งานง่ายมาก ในเวลาเดียวกัน ยังเข้ากันได้กับเครื่องมือติดฉลากเอนไซม์ส่วนใหญ่สำหรับการวัดปริมาณตัวอย่างแบบแบตช์ ซึ่งเป็นตัวเลือกแรกสำหรับการวัดปริมาณในห้องสมุดทั่วไปและการวัดปริมาณ dsDNA