คู่มือฟรี: การเพิ่มประสิทธิภาพเวิร์กโฟลว์การทำให้บริสุทธิ์โปรตีน

การทำให้โปรตีนบริสุทธิ์เป็นเทคนิคพื้นฐานในชีวเคมีและชีววิทยาโมเลกุล ซึ่งใช้กันอย่างแพร่หลายในการวิจัย การวินิจฉัยโรค และการประยุกต์ใช้ในการรักษา เพื่อศึกษาโปรตีนเฉพาะ ขั้นตอนแรกคือการแยกและการทำให้บริสุทธิ์จากตัวอย่างทางชีวภาพ อย่างไรก็ตาม การบรรลุโปรตีนที่มีความบริสุทธิ์สูงอาจเป็นเรื่องท้าทาย เนื่องจากโปรตีนมีความหลากหลายและความซับซ้อนของระบบทางชีววิทยา การทำความเข้าใจหลักการพื้นฐานของการทำให้โปรตีนบริสุทธิ์และการเลือกเทคนิคที่เหมาะสมสำหรับการวิจัยของคุณสามารถเพิ่มประสิทธิภาพเวิร์กโฟลว์และผลผลิตของคุณได้อย่างมาก

หลักพื้นฐานของการฟอกโปรตีน

การฟอกโปรตีนนั้นอาศัยความแตกต่างในคุณสมบัติทางกายภาพและเคมีของโปรตีน เช่น ขนาด ประจุ ความไม่ชอบน้ำ และความสัมพันธ์กับลิแกนด์เฉพาะ ด้วยการใช้ประโยชน์จากความแตกต่างเหล่านี้ นักวิจัยสามารถแยกโปรตีนเป้าหมายออกจากส่วนประกอบทางชีวภาพอื่นๆ ได้อย่างมีประสิทธิภาพ ซึ่งช่วยลดการปนเปื้อนให้เหลือน้อยที่สุด

ต่อไปนี้เป็นเทคนิคการแยกโปรตีนเบื้องต้นที่ใช้กลไกการแยกที่แตกต่างกัน:

เทคนิคแต่ละอย่างสามารถปรับให้เหมาะสมได้โดยการเลือกวัสดุและคอลัมน์ที่เหมาะสม วิธีที่ดีที่สุดขึ้นอยู่กับลักษณะของโปรตีนและระดับความบริสุทธิ์ที่จำเป็นสำหรับการใช้งานปลายทาง

เพิ่มประสิทธิภาพเวิร์กโฟลว์การฟอกโปรตีนของคุณด้วย Yอีเซน ผลิตภัณฑ์ชีววิทยา

ที่ Yeasen ชีววิทยา เราจัดหาสารเคมีและวัสดุคุณภาพสูงหลากหลายประเภทที่ออกแบบมาเพื่อเพิ่มประสิทธิภาพกระบวนการทำให้โปรตีนบริสุทธิ์ ไม่ว่าคุณจะต้องจัดการกับตัวอย่างทางชีวภาพที่ซับซ้อนหรือต้องการโปรตีนที่มีผลผลิตสูงและบริสุทธิ์สูง เรามีเครื่องมือที่จะช่วยปรับปรุงกระบวนการทำให้บริสุทธิ์ของคุณ นี่คือภาพรวมของผลิตภัณฑ์หลักบางส่วนของเราที่จะช่วยให้คุณเพิ่มประสิทธิภาพกระบวนการทำให้บริสุทธิ์ของคุณได้:

โปรตีนบริสุทธิ์แท็กของเขา -หมายเลขแมว#20502ES)-

ในการแสดงออกของโปรตีนรีคอมบิแนนท์ แท็กของเขา (โดยทั่วไปคือ 6×His) มีการใช้กันอย่างแพร่หลายเนื่องจากมีขนาดเล็ก ภูมิคุ้มกันต่ำ และมีผลกระทบต่อการทำงานของโปรตีนน้อยที่สุด โปรตีนแท็กของเขาสามารถทำการชำระได้อย่างมีประสิทธิภาพด้วยเรซินที่มีความสัมพันธ์ซึ่งถูกคีเลตด้วยไอออนของนิกเกิล เช่น เรซิน Ni-NTA เรซินอะกาโรส Ni-NTA HisSep -Cat#20502ES) จัดทำโดย Yอีเซน ชีววิทยา ใช้เจลอะกาโรสที่มีการเชื่อมขวางสูงเป็นเมทริกซ์ รวมกับลิแกนด์ไนโตรเจน-กรดไตรอะซิติก (NTA) ที่ประสานงานกันสี่ด้านเพื่อสร้างคีเลตไอออนนิกเกิลที่เสถียร โครงสร้างแบบผสมผสานทำให้จับโปรตีนและชะออกได้อย่างมีประสิทธิภาพ

แท็ก การทำให้บริสุทธิ์ด้วยความสัมพันธ์ของแอนติบอดี

การทำให้บริสุทธิ์ด้วยความสัมพันธ์ของแอนติบอดีแท็กใช้การจับกันจำเพาะสูงระหว่างแอนติบอดีและแท็กจำเพาะเพื่อให้เกิดการทำให้บริสุทธิ์ของโปรตีนฟิวชัน แท็กทั่วไปได้แก่ ธง HA MYCฯลฯ โดยการใช้สื่อสัมพันธ์แอนติบอดีที่สอดคล้องกัน จึงสามารถแยกโปรตีนที่สนใจจากตัวอย่างที่ซับซ้อนได้อย่างมีประสิทธิภาพ

Yeasen ชีววิทยา มีผลิตภัณฑ์การฟอกบริสุทธิ์ด้วยแอนติบอดีฉลากหลากหลายประเภท:

• ความสัมพันธ์ต่อต้านธง เจล -แมว#20584ES--
  เตรียมจากแอนติบอดีโมโนโคลนัล IgG2b ของหนูคุณภาพสูงด้วยเจลอะกาโรสที่เชื่อมขวางสูง 4% ผ่านการเชื่อมต่ออุปทาน ugh มีความสามารถในการโหลดโปรตีนฟิวชัน Flag-tag สูง suสามารถใช้ในการตกตะกอนภูมิคุ้มกันและการทำให้บริสุทธิ์ของโปรตีนแท็กแฟล็กได้ Yeasen.คอม

• เจลแอนตี้-เอชเอ แอฟฟินิตี้-แมว#20586อีเอส-
  เตรียมจากแอนติบอดีโมโนโคลนัล IgG1 ของหนูคุณภาพสูงและเจล Sepharose 4B โดยผ่านการจับคู่อุปทาน มีความจุการโหลดโปรตีนฟิวชัน HA-tag สูง เหมาะสำหรับการตกตะกอนภูมิคุ้มกันและการทำให้บริสุทธิ์ของโปรตีน HA-tag Yeasen-คอม

• เจลแอนตี้ไมก์แอฟฟินิตี้-แมว#20587อีเอส--
  แอนติบอดีโมโนโคลนัล IgG1 ของหนูคุณภาพสูงถูกจับคู่กับเจล Sepharose 4B ซึ่งออกแบบมาสำหรับการชำระโปรตีนที่มีแท็ก Myc โดยมีความจำเพาะสูงและมีความสามารถในการจับสูง

• เม็ดแม่เหล็กป้องกันอาการธง-แมว#20565ES--
  ลูกปัดแม่เหล็กภูมิคุ้มกันนี้จับคู่กับไมโครสเฟียร์อะกาโรสแม่เหล็กโดยใช้แอนติบอดีโมโนโคลนอล IgG2b ที่ได้จากเมาส์คุณภาพสูง ซึ่งสามารถทำให้โปรตีนที่มีแท็กแฟล็กบริสุทธิ์ได้อย่างรวดเร็วภายใต้การกระทำของสนามแม่เหล็ก และเหมาะสำหรับการทำให้ตัวอย่างที่มีขนาดเล็กบริสุทธิ์

การทำให้บริสุทธิ์ด้วยความสัมพันธ์ของแอนติบอดี (Cat#36401ES):

การชำระล้างความสัมพันธ์ของแอนติบอดี เป็นวิธีการใช้การจับเฉพาะของแอนติบอดีกับแอนติเจนของมันเพื่อทำการฟอกโปรตีน เรซินฟอกโปรตีนรีคอมบิแนนท์ A ที่ทนต่อด่าง (Cat#36401ES) มักใช้เป็นตัวกลางฟอกโปรตีนรีคอมบิแนนท์ A และใช้กันอย่างแพร่หลายในการฟอกและเพิ่มปริมาณของแอนติบอดี

โปรตีเนส

ในการศึกษาโปรตีน โปรตีเอสถูกนำมาใช้เพื่อแยกแท็กฟิวชัน ซึ่งจะช่วยคืนสภาพตามธรรมชาติของโปรตีนเป้าหมาย การนำโปรตีเอสเหล่านี้มาผสมผสานกับขั้นตอนการทำให้โปรตีนบริสุทธิ์จะช่วยเพิ่มคุณภาพและการทำงานของโปรตีนเป้าหมายของคุณ และอำนวยความสะดวกให้กับโครงการวิจัยและพัฒนาขั้นสูง

• รีคอมบิแนนท์เอนเทอโรคิเนส (Cat#20401ES):

เอนเทอโรคิเนส หรือที่เรียกอีกอย่างว่า เอนเทอโรเปปทิเดส เป็นซีรีนโปรตีเอสที่แยกออกโดยเฉพาะตามลำดับกรดอะมิโน DDDDK Yeasenเอนเทอโรไคเนสรีคอมบิแนนท์ของมันถูกแสดงออกใน อีโคไล และปราศจากแท็ก จึงมั่นใจได้ว่าจะไม่รบกวนการใช้งานต่อเนื่อง เอนไซม์นี้เหมาะอย่างยิ่งสำหรับการกำจัดแท็กฟิวชันจากโปรตีนรีคอมบิแนนท์ ช่วยให้ผลิตโปรตีนดั้งเดิมสำหรับการศึกษาโครงสร้างและการทำงานได้ง่ายขึ้น

• ลPNGase F (Cat#20407ES):

PNGase F เป็นอะไมเดสที่แยกเฉพาะระหว่างตำแหน่ง GlcNAc และ Asn ที่อยู่ด้านในสุดของไกลโคโปรตีนที่เชื่อมโยงกับ N YeasenPNGase F มีความเข้มข้น 100,000 U/mL ซึ่งให้กิจกรรมสูงสำหรับปฏิกิริยาดีไกลโคซิเลชัน เอนไซม์นี้มีความสำคัญในการศึกษาโครงสร้างและหน้าที่ของไกลโคโปรตีน เนื่องจากจะกำจัดไกลแคนที่เชื่อมโยงกับ N โดยไม่ส่งผลกระทบต่อโครงสร้างหลักของเปปไทด์

• ทริปซินรีคอมบิแนนท์ (MS-SAFE) (Cat#20416ES):

ทริปซินเป็นซีรีนโปรตีเอสที่ตัดพันธะเปปไทด์ที่ด้านคาร์บอกซิลของไลซีนและอาร์จินีน Yeasenทริปซินรีคอมบิแนนท์ของ 's เป็น MS-SAFE ซึ่งหมายความว่ามันเหมาะสำหรับการใช้งานแมสสเปกโตรเมทรีเนื่องจากมีความบริสุทธิ์สูงและมีกิจกรรมออโตไลติกน้อยที่สุด เอนไซม์นี้เหมาะอย่างยิ่งสำหรับการศึกษาโปรตีโอมิกส์ รวมถึงการย่อยโปรตีนสำหรับการวิเคราะห์แมสสเปกโตรเมทรี

การชำระล้าง วิธี	ชนิดของสารเคมี	ประเภทสินค้า	สินค้าแนะนำ
การกรองแบบเจล	เดกซ์แทรน เจล โครมาโทกราฟี	ฟิลเลอร์สำหรับการกำจัดเกลือ การกำจัดเกลือออกจากคอลัมน์ที่บรรจุไว้ล่วงหน้า คอลัมน์แรงโน้มถ่วงสำหรับการกำจัดเกลือ คอลัมน์แบบหมุน	คอลัมน์กำจัดเกลือ G25 M-แมว#20590ES- คอลัมน์แยกเกลือแบบหมุน 0.5 มล. -แมว#20599ES- คอลัมน์การกำจัดเกลือโดยแรงโน้มถ่วง 83 มล. (แมว#20741ES-
	อะกาโรส เจล โครมาโทกราฟี	ฟิลเลอร์ คอลัมน์บรรจุล่วงหน้า	เจลเด็กซ์ 200 PG เจลโครมาโตกราฟีอะกาโรสที่มีความละเอียดสูง (10-600 kDa) (Cat#20598ES) คอลัมน์โครมาโตกราฟี Geldex 200 PG -แมว#20593ES-
การแลกเปลี่ยนไอออน	การแลกเปลี่ยนประจุลบ โครมาโทกราฟี	ฟิลเลอร์ คอลัมน์บรรจุล่วงหน้า	Q Agarose HP (Q Strong Anion Exchange Chromatography Packing HP) (หมายเลขสินค้า: 20460ES) คอลัมน์บรรจุล่วงหน้า Q HP Strong Anion Exchange ขนาด 5 มล. (Cat#20462ES)
	โครมาโตกราฟีแลกเปลี่ยนประจุบวก		SP Agarose HP (SP Strong Cation Exchange Chromatography Packing HP) (หมายเลขสินค้า #20463ES) คอลัมน์ SP HP Strong Cation Exchange Prepacked 5 มล. (Cat#20465ES)
โครมาโตกราฟีแบบปฏิสัมพันธ์แบบไม่ชอบน้ำ	ไฮโดรโฟบิกอ่อนแอ โครมาโทกราฟี	ฟิลเลอร์ คอลัมน์บรรจุล่วงหน้า	ตัวกลางโครมาโตกราฟีไฮโดรโฟบิกบิวทิลอ่อนความละเอียดสูง (Cat#20484ES) คอลัมน์พรีโหลดโครมาโตกราฟีไฮโดรโฟบิกแบบอ่อนบิวทิล HP ขนาด 5 มล. (Cat#20485ES)
	ไฮโดรโฟบิกที่แข็งแกร่ง โครมาโทกราฟี		สารโครมาโตกราฟีฟีนิลไฮโดรโฟบิกเข้มข้นความละเอียดสูง (Cat#20486ES) คอลัมน์พรีโหลดโครมาโตกราฟีไฮโดรโฟบิกเข้มข้นฟีนิล เอชพี 5 มล. (Cat#20487ES)
การชำระล้างความสัมพันธ์	แท็กของเขา การฟอกโปรตีน	เรซิน คอลัมน์บรรจุล่วงหน้า ลูกปัดแม่เหล็กเพื่อการฟอกอากาศ	เรซินบริสุทธิ์โปรตีนอะกาโรส His-tag (รหัสแมว#20502ES) คอลัมน์พรีโหลดสำหรับการฟอกโปรตีน His-tag ขนาด 5 มล. (Cat#20504ES) เม็ดแม่เหล็กสำหรับฟอกโปรตีน His-tag (Cat#20561ES)
	ภาษีมูลค่าเพิ่ม-แท็ก การฟอกโปรตีน	เรซิน คอลัมน์บรรจุล่วงหน้า ลูกปัดแม่เหล็กเพื่อการฟอกอากาศ	เรซินกลูตาไธโอนอะกาโรส (สำหรับการทำให้โปรตีนบริสุทธิ์ที่มีแท็ก GST) (หมายเลขสินค้า 20507ES) คอลัมน์บรรจุล่วงหน้าสำหรับการฟอกโปรตีนที่มีแท็ก GST ขนาด 5 มล. (Cat#20510ES) เม็ดแม่เหล็กสำหรับฟอกโปรตีนที่มีแท็ก GST (Cat#20562ES)
	เอ็มบีพี-แท็ก การฟอกโปรตีน	เรซิน คอลัมน์บรรจุล่วงหน้า	เรซินบริสุทธิ์ที่มีการเชื่อมโยงสูงที่มีแท็ก MBP โปรตีน (หมายเลขสินค้า 20515ES) คอลัมน์บรรจุล่วงหน้าสำหรับการฟอกโปรตีนที่มีแท็ก MBP ขนาด 5 มล. (หมายเลขสินค้า #20517ES)
	สเตร็ป(Ⅱ) แท็ก การฟอกโปรตีน	เรซิน คอลัมน์บรรจุล่วงหน้า	เรซินบริสุทธิ์โปรตีนอะกาโรสที่มีแท็ก Strep(II) (หมายเลขสินค้า 20495ES)
	ไบโอติ-แท็ก การฟอกโปรตีน	เรซิน คอลัมน์บรรจุล่วงหน้า ลูกปัดแม่เหล็ก	เรซินบริสุทธิ์สเตรปตาติดินอะกาโรส (Cat#20512ES) คอลัมน์บรรจุล่วงหน้าสำหรับการทำให้บริสุทธิ์ด้วยโมเลกุลไบโอติน 5 มล. (Cat#20514ES) ลูกปัดแม่เหล็กสเตรปตาติดิน (SAV) (Cat#47503ES)
	แท็ก ความสัมพันธ์ของแอนติบอดี การทำให้บริสุทธิ์	เจล ลูกปัดแม่เหล็ก	เจลทำความสะอาดแอนตี้แฟล็กแอฟฟินิตี้ (รหัสแมว#20584ES) เจลทำความสะอาดแอนตี้-เอชเอ แอฟฟินิตี้ (รหัสแมว#20586ES) เจลทำความสะอาดแอนตี้ไมก์แอฟฟินิตี้ (รหัสแมว#20587ES) เม็ดแม่เหล็กป้องกันอาการธง (แมว#20565ES)
	การทำให้บริสุทธิ์ด้วยความสัมพันธ์ของแอนติบอดี	เรซิน คอลัมน์บรรจุล่วงหน้า ลูกปัดแม่เหล็ก	เรซินบริสุทธิ์อะกาโรสโปรตีนรีคอมบิแนนท์เอ (รหัสแมว 36401ES) เรซินบริสุทธิ์โปรตีน G อะกาโรส (Cat#36405ES) เรซินบริสุทธิ์โปรตีน A/G อะกาโรส (Cat#36403ES) โปรตีน A/G เม็ดแม่เหล็กภูมิคุ้มกัน (รหัสแมว 36417ES)
	การทำให้บริสุทธิ์ด้วยความสัมพันธ์ของแอนติบอดีอื่น ๆ	เรซิน คอลัมน์บรรจุล่วงหน้า	เรซินทำความสะอาดที่มีประสิทธิภาพสูงในการกำจัดเอนโดทอกซิน (Cat#20518ES) ตัวกลางการทำให้บริสุทธิ์ที่มีความสัมพันธ์กับเฮปาริน (Cat#20493ES)
คนอื่นเป็นเกย์	โปรตีเอส	เอนไซม์ตัดแท็ก ไกลโคซิเดส เอนไซม์เกรดแมสสเปกโตรเมทรี	อี.เอ็นเทอโรคิเนสรีคอมบิแนนท์อีโคไลที่แสดงออก (ไม่มีฉลาก) (รหัสแมว#20401ES) ธรอมบินวัว (ความสามารถในการมีชีวิตสูง >2000 IU/มก.) (Cat#20402ES) โปรตีเอสไวรัสกัดยาสูบแบบรีคอมบิแนนท์ rTEV (Cat#20403ES) PNGase F, N-ไกลโคซิเดส F (100000 U/mL) (รหัสแมว#20407ES) ทริปซินรีคอมบิแนนท์ (MS-SAFE) ทริปซินรีคอมบิแนนท์ (เกรดแมสสเปกโตรเมทรี) (รหัสแมว 20416ES)
	วัสดุสิ้นเปลืองสำหรับโครมาโตกราฟี	คอลัมน์ว่างการไหลของแรงโน้มถ่วง พิมพ์คอลัมน์ว่าง คอลัมน์ YXK ถุงไดอะไลซิส	คอลัมน์เปล่าโครมาโตกราฟีแรงโน้มถ่วง 12 มล. (Cat#20523ES) คอลัมน์เปล่าประเภท C ขนาด 5 มล. (เชื่อมต่อกับ Akata, เข็มฉีดยาหรือปั๊มแบบลูกสูบ) (Cat#20526ES) คอลัมน์เปล่าโครมาโตกราฟี YXK16/70 (Cat#20443ES) ถุงไดอะไลซิสขนาด 27 มม. (MWCO 50 kDa) (Cat#20534ES)

บทสรุป: ปรับแต่งเวิร์กโฟลว์ของคุณให้เหมาะกับความต้องการของคุณ

การเพิ่มประสิทธิภาพเวิร์กโฟลว์การทำให้โปรตีนบริสุทธิ์เป็นสิ่งสำคัญสำหรับการบรรลุโปรตีนที่มีความบริสุทธิ์สูงและให้ผลผลิตสูงสำหรับการวิจัยหรือการใช้งานของคุณ การทำความเข้าใจหลักการทำให้บริสุทธิ์และเลือกเครื่องมือที่เหมาะสมจะช่วยให้คุณปรับกระบวนการให้มีประสิทธิภาพและหลีกเลี่ยงปัญหาทั่วไปได้ Yeasen บริษัท Biology จัดหาสารเคมีและวัสดุสิ้นเปลืองคุณภาพสูงสุดสำหรับทุกขั้นตอนของการฟอกโปรตีน เพื่อให้แน่ใจว่าโปรตีนของคุณบริสุทธิ์ ทำงานได้ และพร้อมสำหรับการวิเคราะห์

หากต้องการเรียนรู้เพิ่มเติมเกี่ยวกับวิธีที่ผลิตภัณฑ์ของเราสามารถเสริมกระบวนการฟอกโปรตีนของคุณได้ โปรดไปที่หน้าผลิตภัณฑ์ของเราหรือติดต่อทีมงานของเราเพื่อรับคำแนะนำส่วนบุคคล

หากต้องการข้อมูลเพิ่มเติมหรือต้องการซื้อ โปรดเยี่ยมชม อย่างเป็นทางการเราบีเว็บไซต์-