Yeasen เจลแอนตี้-DYKDDDDK (Flag) Affinity: การทำให้บริสุทธิ์ที่แม่นยำสำหรับโปรตีนเมมเบรนที่มีปริมาณน้อย

ในสาขาการวิจัยทางชีวการแพทย์ การฟอกโปรตีนถือเป็นเทคโนโลยีสำคัญในการสำรวจความลึกลับของชีวิต อย่างไรก็ตาม วิธีการฟอกโปรตีนแบบดั้งเดิมประสบปัญหาเรื่องประสิทธิภาพที่ต่ำและต้นทุนสูง โดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับโปรตีนเยื่อหุ้มเซลล์ ซึ่งเป็นจุดเน้นของการวิจัยชีววิทยาโครงสร้าง โปรตีนเหล่านี้มีโครงสร้างที่ซับซ้อน มีระดับการแสดงออกต่ำในเยื่อหุ้มเซลล์ และไวต่อสภาพแวดล้อม ทำให้การฟอกโปรตีนทำได้ยากเป็นพิเศษ ปัจจุบัน Yeasen Biotech ซึ่งมีศักยภาพด้านการวิจัยและพัฒนาที่โดดเด่น ได้เปิดตัวรุ่นอัพเกรด เจลแอนตี้-DYKDDDDK(แฟลก) (รหัสแมว#20584ES)เครื่องมืออันทรงพลังสำหรับการฟอกโปรตีนที่มีประสิทธิภาพและสะดวกสบาย แม้กับโปรตีนเยื่อหุ้มเซลล์ที่ท้าทาย

ประสิทธิภาพของผลิตภัณฑ์

1. ความจำเพาะสูงและความสามารถในการจับสูง: ข้อได้เปรียบหลักสำหรับการจับโปรตีนเป้าหมาย

Yeasen เจลแอนตี้-DYKDDDDK(แฟลก) (รหัสแมว#20584ES) จัดทำขึ้นโดยการจับคู่แอนติบอดีโมโนโคลนอล IgG2b ของเมาส์คุณภาพสูงกับเจลอะกาโรสที่มีการเชื่อมโยงสูง 4% อย่างโควาเลนต์ กระบวนการผลิตที่ไม่เหมือนใครนี้ทำให้ผลิตภัณฑ์มีความจำเพาะสูงมาก ทำให้สามารถจดจำและจับโปรตีนฟิวชันกับแท็ก Flag ได้อย่างแม่นยำ ไม่ว่าจะเป็นโปรตีนฟิวชัน Flag ที่ปลาย N ที่ดัดแปลงโดย Met (เมทแฟล็กโปรตีน) โปรตีนฟิวชันแฟล็กปลายเอ็น (โปรตีนธง) หรือโปรตีนฟิวชันแฟล็กปลาย C (โปรตีน-แฟล็ก) เจลสามารถจัดการได้อย่างง่ายดาย

ในการฟอกโปรตีนเมมเบรน ความจำเพาะนี้มีความสำคัญเป็นพิเศษ เนื่องจากโปรตีนเหล่านี้มีโครงสร้างที่ซับซ้อนและมีแนวโน้มที่จะจับกับโปรตีนอื่นแบบไม่จำเพาะเจาะจง ความจำเพาะสูงของเจล Flag ช่วยลดการรบกวนจากโปรตีนที่ไม่จำเพาะเจาะจงได้อย่างมีประสิทธิภาพ ช่วยให้มั่นใจได้ว่าโปรตีนเมมเบรนที่ฟอกแล้วจะมีความบริสุทธิ์สูง นอกจากนี้ เจลยังมีความสามารถในการจับกับโปรตีนฟิวชันที่มีแท็ก Flag สูง (อย่างน้อย โปรตีน 1.1 มก./มล. เจล) ซึ่งหมายความว่าแม้ว่าโปรตีนเป้าหมายจะถูกแสดงออกมาในระดับต่ำ ก็ยังสามารถจับและทำให้บริสุทธิ์ได้อย่างมีประสิทธิภาพโดยใช้เจล Flag ได้

2. ความบริสุทธิ์สูงและผลผลิตสูง: เปิดใช้งานแอปพลิเคชันปลายน้ำ

Yeasen เจลแอนตี้-DYKDDDDK(แฟลก) (รหัสแมว#20584ES) มีการจับกับสิ่งเจือปนแบบไม่จำเพาะขั้นต่ำ ส่งผลให้ได้ตัวอย่างโปรตีนที่มีความบริสุทธิ์สูงหลังจากการทำให้บริสุทธิ์ ซึ่งเป็นสิ่งสำคัญสำหรับการประยุกต์ใช้ในขั้นตอนต่อไป เช่น การทดสอบฤทธิ์ทางชีวภาพและการวิเคราะห์โครงสร้าง ตัวอย่างโปรตีนที่มีความบริสุทธิ์สูงให้ข้อมูลการทดลองที่แม่นยำยิ่งขึ้น ซึ่งช่วยวางรากฐานที่มั่นคงสำหรับการศึกษาวิจัยของนักวิจัย

3. เวิร์กโฟลว์การทดลองที่ปรับให้เหมาะสม: ความท้าทายในการทำให้โปรตีนบริสุทธิ์ง่ายขึ้น

การชำระโปรตีนจำเป็นต้องดำเนินการภายใต้สภาวะที่อ่อนโยนเพื่อหลีกเลี่ยงความเสียหายต่อโครงสร้างของโปรตีน โดยเฉพาะโปรตีนเยื่อหุ้มที่ซับซ้อน Yeasen เจลแอนตี้-DYKDDDDK(แฟลก) (รหัสแมว#20584ES) ได้รับการออกแบบมาโดยคำนึงถึงสิ่งนี้ บัฟเฟอร์จัดเก็บข้อมูลคือ TBS ที่ประกอบด้วยกลีเซอรอล 50% ที่ pH 74 ซึ่งไม่เพียงแต่ปกป้องกิจกรรมของเจลเท่านั้น แต่ยังจัดเตรียมสภาพแวดล้อมที่อ่อนโยนต่อการฟอกโปรตีนอีกด้วย

กระบวนการทำให้บริสุทธิ์ด้วยเจล Flag นั้นง่ายและมีประสิทธิภาพ เพื่อให้การใช้สารชะล้างเปปไทด์ 1×Flag สะดวกยิ่งขึ้น บรรจุภัณฑ์ผลิตภัณฑ์จึงรวมเปปไทด์ 1×Flag ฟรี (หมายเลขผลิตภัณฑ์ 20572ES) ซึ่งทำให้กระบวนการชะล้างเป็นไปอย่างนุ่มนวล (แทบไม่มีความเสียหายต่อโปรตีน) และสะดวกอย่างยิ่ง (ยิ่งทำให้การทดลองง่ายขึ้นอีกด้วย)

4. ขนาดหลากหลายและตัวเลือกการจัดส่งที่ยืดหยุ่น: ตอบสนองความต้องการในการทดลองที่หลากหลาย

เมื่อพิจารณาถึงขนาดและความต้องการที่แตกต่างกันของห้องปฏิบัติการต่างๆ Yeasen นำเสนอเจล Flag ในหลายขนาด รวมถึง 1 มล., 5 มล., 25 มล. และ 100 มล.ไม่ว่าจะสำหรับการสำรวจเบื้องต้นในระดับเล็กหรือการผลิตโปรตีนในระดับใหญ่ ก็มีตัวเลือกที่เหมาะสมให้เลือกใช้ สำหรับการซื้อปริมาณมากต่อปี ลูกค้าสามารถเลือกรับสินค้าเป็นชุดได้ ทำให้ได้รับส่วนลดราคาในขณะที่หลีกเลี่ยงแรงกดดันจากสินค้าคงคลังที่มากเกินไป

ข้อมูลการทดสอบ

ม: โปรตีนมาร์กเกอร์ 1: ตัวอย่างดิบก่อนคอลัมน์ของโปรตีน Flag-N/ Flag-M/ Flag-C 2: การไหลผ่านหลังคอลัมน์ของโปรตีน Flag-N/ Flag-M/ Flag-C 3: การชะล้าง (การชะล้างด้วย pH 2.7) 4: การชะล้าง (การชะล้าง pH 12) 5: การชะล้าง (1การชะเปปไทด์แฟล็ก) 6: เจลบริสุทธิ์ (ค่า pH 2.7) 7: เจลบริสุทธิ์ (ค่า pH 12) 8: เจลบริสุทธิ์ (1การชะเปปไทด์แฟล็ก) เอ-ธง-N   บี-ธง-M   ซี-ธง-C

รูปที่ 1-   Yeasen เจลแอนตี้-DYKDDDDK(แฟลก) ผลการทำให้บริสุทธิ์สำหรับโปรตีนที่แสดงออกต่ำ (Flag-N (a), Flag-M (b), Flag-C (c)) แสดงใน SDS-PAGE

ม: โปรตีนมาร์กเกอร์ 1: ตัวอย่างดิบของโปรตีน Flag-C ก่อนคอลัมน์ 2: การไหลผ่านหลังคอลัมน์ของโปรตีน Flag-C 3: การชะล้าง (การชะล้างด้วย pH 2.7) 4: การชะล้าง (การชะล้าง pH 12) 5: การชะล้าง (1การชะเปปไทด์แฟล็ก) 6: เจลบริสุทธิ์ (pH 2.7 การชะล้าง) 7: เจลบริสุทธิ์ (ค่า pH 12) 8: เจลบริสุทธิ์ (1การชะเปปไทด์แฟล็ก) เอ-Yeasen บี-ยี่ห้อ S*   ซี-ยี่ห้อ G*

รูป 2. การเปรียบเทียบ Yeasen (ก) ด้วยบีแรนด์ S* (b) และ บีrand G* (c) เจลต่อต้านแฟล็กในการทำให้โปรตีนที่แสดงออกต่ำบริสุทธิ์ (เช่น โปรตีนเยื่อหุ้มเซลล์) ตามที่แสดงใน SDS-PAGE

บทสรุป:

1. Yeasen เจลแอนตี้-DYKDDDDK(แฟลก) (รหัสแมว#20584ES) มีความจำเพาะสูงและสามารถจับกับแท็ก Flag ในตำแหน่งต่างๆ ได้ (โปรตีนฟิวชัน Flag ปลาย N, โปรตีนฟิวชัน Flag ปลาย N ที่ดัดแปลงโดย Met, โปรตีนฟิวชัน Flag ปลาย C)

2. ภายใต้เงื่อนไขของการแสดงออกของโปรตีนเป้าหมายที่ต่ำมาก (เช่น โปรตีนเยื่อหุ้มเซลล์) Yeasen เจลแอนตี้-DYKDDDDK(แฟลก) (Cat#20584ES) ให้ผลผลิตและความบริสุทธิ์ที่สูงกว่าอย่างเห็นได้ชัดเมื่อเทียบกับคู่แข่ง การใช้ Yeasen เปปไทด์ 1×Flag ที่ให้บริการฟรี (Cat#20572ES) สำหรับการชะออกจะให้ผลลัพธ์ที่ดียิ่งขึ้น

โซลูชันที่ครบวงจรสำหรับโปรตีนฟิวชันที่มีแท็กธง:

รีคอมบิแนนท์ เอนเทอโรคิเนส (Cat#20395ES):โปรตีเอสจำเพาะที่ตัดปลายคาร์บอกซิลของไลซีนซึ่งนำหน้าด้วยกรดแอสปาร์ติกสี่ชนิด ได้แก่ Asp-Asp-Asp-Asp-Lys ลำดับนี้เป็นส่วนหนึ่งของแท็กธงออกตาเปปไทด์ (DYKDDDDK) เอ็นเทอโรคิเนสแบบรีคอมบิแนนท์ (rEK) สามารถตัดแท็กธงออกจากโปรตีนฟิวชันได้อย่างง่ายดาย ทำให้เป็นเครื่องมือที่เหมาะสำหรับการศึกษาโครงสร้างและหน้าที่ของโปรตีนดั้งเดิม

ลูกปัดแม่เหล็กต่อต้าน DYKDDDDK(ธง) (แมว#20565ES):ไมโครสเฟียร์แม่เหล็กโพลิเมอร์ที่เตรียมโดยการจับคู่โควาเลนต์แอนติบอดีโมโนโคลนอลเมาส์คุณภาพสูงต่อต้าน DYKDDDDK (Flag) กับลูกปัดแม่เหล็กที่ใช้ซิลิกา (เส้นผ่านศูนย์กลาง ของ 200 นาโนเมตร) ลูกปัดเหล่านี้เหมาะสำหรับการตกตะกอนภูมิคุ้มกัน (IP) หรือการตกตะกอนร่วมภูมิคุ้มกัน (Co-IP) ของโปรตีนที่มีแท็ก Flag

ข้อมูลสินค้า

ชื่อสินค้า	หมายเลขสินค้า	ข้อมูลจำเพาะ
เจลแอนตี้-DYKDDDDK(แฟลก)	20584อีเอส03-25/08	1 มล.-5 มล./25 มล.
เอนไซม์ Enterokinase ของวัว Recombinant His ที่แสดงออกในยีสต์	20395ES60/76/90	100 คุณ-500 ยู/5000 ยู
ลูกปัดแม่เหล็กต่อต้าน DYKDDDDK(ธง)	20565ES03/08	1 มล.-5 มล.