เครื่องมือจับแอนติบอดี: จัดการ IP และ CO-IP ได้อย่างง่ายดายด้วยโปรตีน A/G agarose และลูกปัดแม่เหล็ก

โปรตีน A และโปรตีน G เป็นโปรตีนมาตรฐานสำหรับการทำให้บริสุทธิ์ด้วยความสัมพันธ์ของแอนติบอดีและการตกตะกอนภูมิคุ้มกัน (IP) โดยการจับคู่โปรตีน A และโปรตีน G เข้ากับอะกาโรสหรือเม็ดแม่เหล็กอย่างโคเวเลนต์ เครื่องมือเหล่านี้จึงมีช่วงการจับที่กว้างขึ้นเมื่อเทียบกับเม็ดที่มีโปรตีนเพียงชนิดเดียว ซึ่งช่วยเพิ่มความคล่องตัว นอกจากนี้ โปรตีน A และโปรตีน G ที่ใช้ในผลิตภัณฑ์เหล่านี้ได้รับการดัดแปลงพันธุกรรมเพื่อรักษาความสัมพันธ์สูงกับอิมมูโนโกลบูลิน (Ig) ขณะเดียวกันก็กำจัดโดเมนการจับที่ไม่ใช่โดเมนหลัก จึงลดปฏิสัมพันธ์ที่ไม่จำเพาะ

ตารางที่ 1：การเปรียบเทียบระหว่างเม็ดอะกาโรสโปรตีน A/G และเม็ดแม่เหล็ก

rโปรตีน เอ/จี อะกาโรส เรซิน

โปรตีน A/G MagBeads

เมทริกซ์

ไมโครสเฟียร์อะกาโรส 4% ที่มีการเชื่อมโยงสูง

ลูกปัดแม่เหล็กชนิดซิลิกา

ขนาดอนุภาค

45-165 ไมโครเมตร

200 นาโนเมตร

ความจุ

>20 มิลลิกรัม อิกกีสูง/มล. เรซิน

>0.7 มิลลิกรัม ลูกปัดแม่เหล็ก hIgG/mL

ข้อดี

ใช้งานง่าย ไม่ต้องใช้อุปกรณ์เสริม

การทำงานที่เรียบง่าย

ขนาดรูพรุนขนาดใหญ่ แรงยึดเกาะที่แข็งแกร่ง

เส้นผ่านศูนย์กลางเล็ก จลนพลศาสตร์ดี

ผลผลิตโปรตีนเป้าหมายสูง

พื้นผิวเรียบเนียน การดูดซับลูกปัดน้อยที่สุด พื้นหลังต่ำ การใช้แอนติบอดีน้อยลง

ข้อเสีย

มีรูพรุนและดูดซับได้ง่าย (ต้องเคลียร์ล่วงหน้า)

สะดวกในการใช้งานด้วยชั้นวางแม่เหล็ก

การใช้งานผลิตภัณฑ์

1. การชำระล้างแอนติบอดี

แยกแอนติบอดีที่มีความบริสุทธิ์สูงจากซีรั่มหรือภาวะบวมน้ำในช่องท้องในขั้นตอนเดียว

2. การตกตะกอนภูมิคุ้มกัน (IP)

เสริมโปรตีนเฉพาะส เพื่อศึกษาลักษณะเฉพาะของมัน (เช่น การดัดแปลงหลังการแปล)

3. การตกตะกอนร่วมด้วยภูมิคุ้มกัน (Co-IP)

เสริมสร้าง เป้า โปรตีนถึง สอบสวน โปรตีนชนิดอื่นที่จับกับมัน (เช่น ปฏิกิริยาระหว่างโปรตีนกับโปรตีน คอมเพล็กซ์โปรตีน ฯลฯ)

ขั้นตอนการดำเนินการ

ข้อมูลการทดสอบ

1. การชำระล้างแอนติบอดีจากซีรั่มกระต่ายโดยใช้ รโปรตีน เอ/จี อะกาโรส เรซิน-

Figure 1. Electrophoresis result of antibody purification using rProtein A/G Agarose Resin

ม: โปรตีนมาร์กเกอร์

ล:ตัวอย่างดิบก่อนคอลัมน์

เอลู: การชะล้าง

รูปที่ 1- ผลการวิเคราะห์อิเล็กโทรโฟรีซิสของการฟอกแอนติบอดีโดยใช้ รโปรตีน เอ/จี อะกาโรส เรซิน

2. การทดลองจับคู่แอนติบอดีด้วย โปรตีน เอ/จี แม็กบีอี๊ด

Figure 2. Yeasen Protein A/G Magbeads outperformed Competitor magnetic beads.

1: นอร์ทแคโรไลน่า

2: Yeasen โปรตีน A/G Magbeads

3: Yeasen โปรตีน A/G Magbeads

4: คู่แข่ง

รูป 2- Yeasen โปรตีน เอ/จี เอ็มAgbeads ทำผลงานได้ดีกว่า คู่แข่ง ลูกปัดแม่เหล็ก

3. การใช้โปรตีน A/G ลูกปัดแม็ก สำหรับ ไอพี

Figure 3. Yeasen Protein A/G Magbeads outperformed Competitor magnetic beads.

โปรตีนเป้าหมาย

1: นอร์ทแคโรไลน่า

2: Yeasen โปรตีน A/G Magbeads

3: Yeasen โปรตีน A/G Magbeads

4: คู่แข่ง

รูป 3- Yeasen โปรตีน เอ/จี เอ็มAgbeads ทำผลงานได้ดีกว่า คู่แข่ง ลูกปัดแม่เหล็ก

4. การใช้โปรตีน A/G ลูกปัดแม็ก สำหรับ Co-IP: แอนติบอดีจำเพาะต่อ p65 และไซคลินดีเพนเดนต์ไคเนส 9 (CDK9) ใช้สำหรับการวิเคราะห์การตกตะกอนภูมิคุ้มกันของโปรตีนเซลล์ทั้งหมดที่ถูกสกัด

Figure 4. Immunoprecipitants were then subjected to western blot analysis using specific antibodies against CDK9 and p65.

รูป 4- จากนั้นจึงนำสารกระตุ้นภูมิคุ้มกันไปวิเคราะห์เวสเทิร์นบล็อตโดยใช้แอนติบอดีจำเพาะต่อ CDK9 และ p65

ข้อมูลสินค้า

ชื่อสินค้า

หมายเลขสินค้า

ข้อมูลจำเพาะ

โปรตีน A/G Magbeads

36417ES03/05

1มล./5มล.

rโปรตีนเอ/จี อะกาโรส เรซิน

36403ES08/25/60

5 มล./25 มล./100 มล.

สินค้าที่เกี่ยวข้อง

ชื่อสินค้า

หมายเลขสินค้า

ข้อมูลจำเพาะ

ซูรีรโปรตีน เอ อะกาโรส เรซิน

36401อีเอส08-25/60

5 มล.-25 มล./100 มล.

รโปรตีน จี อะกาโรส เรซิน

36405อีเอส08-25/60

5 มล.-25 มล./100 มล.

การสอบถาม