พื้นหลัง

ทรานสเฟอร์ริน หรือที่รู้จักกันในชื่อทรานสเฟอร์ริน (TRF, Tf) ทำหน้าที่ขนส่งธาตุเหล็กที่ดูดซึมโดยทางเดินอาหารและธาตุเหล็กที่ปลดปล่อยออกมาจากการย่อยสลายของเม็ดเลือดแดง ทรานสเฟอร์รินเข้าสู่ไขกระดูกในรูปของสารประกอบธาตุเหล็กสามชนิด (Tf-Fe3+) เพื่อผลิตเม็ดเลือดแดงที่โตเต็มที่ ทรานสเฟอร์รินพบส่วนใหญ่ในพลาสมา ทรานสเฟอร์รินในพลาสมาจะส่งธาตุเหล็กไปยังเนื้อเยื่อส่วนใหญ่ของร่างกาย ในขณะที่ในบริเวณที่ทรานสเฟอร์รินเข้าถึงไม่ได้ ทรานสเฟอร์รินที่สังเคราะห์โดยเนื้อเยื่อเหล่านี้จะถ่ายโอนธาตุเหล็กไปยังบริเวณนั้นเอง

รูปที่ 1 โครงสร้างของทรานสเฟอริน

ทรานสเฟอร์รินของมนุษย์สังเคราะห์ส่วนใหญ่ในตับ เป็นไกลโคโปรตีนสายเดี่ยวที่ประกอบด้วยกลีบ 2 กลีบที่ปลาย N และปลาย C ทรานสเฟอร์รินของมนุษย์ประกอบด้วยกรดอะมิโน 678 ตัว จุดไอโซอิเล็กทริก 5.9 และน้ำหนักโมเลกุล 76kD โมเลกุลของทรานสเฟอร์รินแต่ละโมเลกุลสามารถพาไอออนเหล็กไตรวาเลนต์ได้ 2 ตัว (Fe³⁺) ปฏิสัมพันธ์ระหว่างทรานสเฟอรินและเฟอ³⁺ ขึ้นอยู่กับค่า pH ที่ pH 7.4 ทรานสเฟอร์รินและ Fe3+ จะจับกันอย่างมีประสิทธิภาพ และทั้งสองแยกจากกันที่ pH ที่เป็นกรด

การดำรงอยู่

โฮโล-ทรานสเฟอร์ริน、ทรานสเฟอร์รินที่อิ่มตัวบางส่วน、อะโพ-ทรานสเฟอร์ริน

กลไกการทำงาน

ทรานสเฟอร์ริน (Tf) จับกับเหล็กโดยทำปฏิกิริยากับตัวรับของมัน ซึ่งก็คือ ทรานสเฟอร์ริน รีเซพเตอร์ 1 (TfR1) TfR1 เป็นไกลโคโปรตีนที่แสดงบนพื้นผิวเซลล์ ประกอบด้วยซับยูนิตโฮโมไดเมอร์ 2 ซับยูนิตที่เชื่อมต่อกันด้วยพันธะไดซัลไฟด์ บนพื้นผิวเซลล์ Tf ทำปฏิกิริยากับ Fe3+ เพื่อสร้างโฮโล-Tf และจับกับตัวรับ TfR1 โดยเข้าสู่เอนโดโซมภายใต้เอ็นโดไซโทซิส ในสภาพแวดล้อมเอนโดโซมที่เป็นกรด Fe3+ จะแยกตัวออกจาก Tf และ STEAP3 จะลด Fe3+ ให้เป็น Fe2+ ซึ่งจะถูกขนส่งไปยังไซโทพลาซึมโดยตัวขนส่งไอออนโลหะที่มีประจุไฟฟ้า 1 (DMT1) จากนั้น Tf ที่ปล่อย Fe3+ จะสร้างคอมเพล็กซ์ Tf/TfR1 กับ TfR1 และอพยพกลับไปที่พื้นผิวเซลล์ผ่านการขับออกนอกเซลล์ บนพื้นผิวเซลล์ ทรานสเฟอริน (Tf) จะแยกตัวออกจากตัวรับ TfR1 เพื่อกลายเป็นอะโพ-Tf จากนั้นจึงจับกับ Fe3+ อีกครั้งเพื่อเข้าร่วมในวงจรเหล็ก เมื่อกระบวนการทั้งหมดเสร็จสิ้นแล้ว Tf และ TfR1 จะถูกรีไซเคิลและเข้าสู่วงจรถัดไปของการดูดซึมเหล็กในเซลล์

รูปที่ 2 แผนภาพกลไกของวงจรทรานสเฟอร์ริน^[1]

หน้าที่หลักของทรานสเฟอร์ริน

1. หลีกเลี่ยงการเกิดอนุมูลอิสระและปกป้องการเจริญเติบโตของเซลล์
2. ต่อต้านแบคทีเรีย ฆ่าเชื้อ ขับสารพิษ
3. รักษาการแพร่กระจายและการเจริญเติบโตของเซลล์
4. ส่งเสริมการเก็บและการขนส่งธาตุเหล็กนอกเซลล์

แหล่งที่มาของทรานสเฟอริน

	แหล่งที่มา	ความปลอดภัย	ความแตกต่างของแบตช์
ทรานสเฟอรินสกัดจากธรรมชาติ	สารสกัดจากพลาสมาของมนุษย์และโค	ความปลอดภัยต่ำ ผลิตภัณฑ์ขั้นสุดท้ายอาจมีเชื้อโรค	ทรานสเฟอรินถูกสกัดมาจากซีรั่มของมนุษย์หรือของโคหลายชุด และประสิทธิภาพจะแตกต่างกันอย่างมาก
ทรานสเฟอร์รินรีคอมบิแนนท์	แสดงออกจากเซลล์โพรคาริโอตและยูคาริโอต	ปลอดภัยดี ผลิตภัณฑ์ขั้นสุดท้ายไม่มีเชื้อโรค	แต่ละชุดจะถูกแสดงโดยใช้เซลล์สายพันธุ์เดียวกัน ซึ่งมีประสิทธิภาพที่เสถียร

คุณสมบัติผลิตภัณฑ์

ความปลอดภัยที่ดี: ผลิตภัณฑ์ได้ผ่านการตรวจสอบและทดสอบคุณภาพหลายชั้น หลีกเลี่ยงการปนเปื้อนจากเชื้อโรค

ความเป็นพิษต่ำ: ความเป็นพิษต่อเซลล์มีน้อยมากและไม่มีผลกระทบต่อการทดลองต่อไป

ประสิทธิภาพการทำงานที่มั่นคง: แต่ละชุดจะถูกแยกออกมาจากเซลล์สายพันธุ์เดียวกัน โดยมีความแตกต่างด้านประสิทธิภาพเพียงเล็กน้อยและโปรตีนมีความบริสุทธิ์สูง

ใช้งานง่าย: เพียงเพิ่มผลิตภัณฑ์ลงในฐาน

ใช้ได้อย่างกว้างขวาง: สามารถนำไปใช้เพาะเลี้ยงเซลล์หลายประเภทได้

คำถามที่พบบ่อย

คำถามที่ 1: ควรเติมทรานสเฟอร์รินที่สกัดแล้วหรือทรานสเฟอร์รินแบบรีคอมบิแนนท์ลงในอาหารเลี้ยงเชื้อที่ไม่มีซีรั่มหรือไม่?

A: ทรานสเฟอร์รินที่สกัดออกมามีข้อบกพร่อง เช่น ความปลอดภัยต่ำ และความแตกต่างระหว่างชุดการผลิตจำนวนมาก โดยเฉพาะอย่างยิ่ง เมื่อทรานสเฟอร์รินที่สกัดออกมาถูกเติมลงในอาหารเลี้ยงเชื้อที่ไม่มีซีรั่มสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ อาจทำให้เชื้อก่อโรคของมนุษย์หรือสัตว์ (เช่น ไวรัสโรควัวบ้า ไวรัสครอยต์ซ์เฟลด์-จาคอบ และเชื้อก่อโรคที่ไม่รู้จักอื่นๆ) เข้าไปในเซลล์และทำให้เซลล์ปนเปื้อน ทรานสเฟอร์รินแบบรีคอมบิแนนท์สามารถหลีกเลี่ยงความเป็นไปได้ของการปนเปื้อนของเชื้อก่อโรคได้อย่างสมบูรณ์ ดังนั้น จึงควรเติมทรานสเฟอร์รินแบบรีคอมบิแนนท์ลงในอาหารเลี้ยงเชื้อที่ไม่มีซีรั่ม

คำถามที่ 2: ควรเติมทรานสเฟอร์รินที่อิ่มตัวด้วยเหล็ก (โฮโล) หรือทรานสเฟอร์รินอะโป (Apo) ลงในอาหารเลี้ยงเชื้อหรือไม่?

A: เมื่ออาหารเลี้ยงเชื้อไม่มีธาตุเหล็กหรือมีปริมาณธาตุเหล็กต่ำ ให้เลือกเติมทรานสเฟอร์รินที่มีธาตุเหล็กอิ่มตัว (โฮโล) เมื่ออาหารเลี้ยงเชื้อมีธาตุเหล็กสูง ให้เลือกอะโปทรานสเฟอร์ริน

คำถามที่ 3: อะไรดีกว่ากัน ระหว่าง ทรานสเฟอร์รินที่อิ่มตัวด้วยธาตุเหล็ก (Holo) หรือ ทรานสเฟอร์รินที่อิ่มตัวด้วยธาตุเหล็ก (Apo)?

A: ไม่สามารถอนุมานผลของทั้งสองสิ่งได้ในเชิงทฤษฎี จำเป็นต้องมีการทดสอบเชิงทดลอง

คำถามที่ 4: ความเข้มข้นของทรานสเฟอรินในอาหารเลี้ยงเชื้อที่ปราศจากซีรั่มคือเท่าใด

คำตอบ: ความเข้มข้นของทรานสเฟอรินขึ้นอยู่กับชนิดของเซลล์ ความเข้มข้นเฉพาะขึ้นอยู่กับสถานะของเซลล์ ความเข้มข้นของเซลล์ และวัตถุประสงค์ของการทดลองเซลล์ปฐมภูมิทั่วไป: 5-100 มก./ล.; เซลล์รังไข่หนูแฮมสเตอร์จีน: 10-50 มก./ล.; เซลล์ไฮบริดโดมาและเวโร: 5-20 มก./ล.

ข้อมูลการสั่งซื้อ

ชื่อสินค้า	หมายเลขสินค้า	ข้อมูลจำเพาะ
ทรานสเฟอร์รินจากวัว -อป.)	40102ES60/80	100 มิลลิกรัม
ทรานสเฟอร์รินจากวัว (HOLO)	40103ES60/80	100 มก./1ก.
ทรานสเฟอร์รินของมนุษย์ (สกัดจากพลาสมาของมนุษย์)	40133ES60/76/80	100 มก./500 มก./1ก.
โฮโลทรานสเฟอร์รินของมนุษย์ที่สร้างใหม่	92288ES60/76/80	100 มก./500 มก./1ก.
โปรตีน Apo-Transferrin ของมนุษย์แบบรีคอมบิแนนท์	92289ES60/76/80	100 มก./5