คำอธิบาย
ฮิฟฟ์ คานาซทีเอ็ม Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase เป็นรุ่นใหม่ของ ดีเอ็นเอที่มีความเที่ยงตรงสูง โพลิเมอเรสที่มีพื้นฐานมาจาก Pfu DNA โพลิเมอเรส Hieff Canaceทีเอ็ม Uracil+ DNA Polymerase ที่มีความเที่ยงตรงสูงช่วยให้เกิดปฏิกิริยา PCR ได้อย่างรวดเร็วและแม่นยำสำหรับเทมเพลตที่ซับซ้อน ความเที่ยงตรงของปฏิกิริยานี้ได้รับการปรับปรุงอย่างมีนัยสำคัญ และหลีกเลี่ยงความล้มเหลวในการขยายที่เกิดจากการใช้ไพรเมอร์/เทมเพลต/dNTP ที่มี dUTP ได้อย่างสมบูรณ์ ผลิตภัณฑ์นี้มีบัฟเฟอร์เอนไซม์ที่ปรับให้เหมาะสมและเพิ่มส่วนประกอบที่ช่วยเพิ่มประสิทธิภาพ PCR ทำให้เอนไซม์มีประสิทธิภาพสูงและปรับให้เข้ากับเทมเพลตต่างๆ ได้หลากหลาย เหมาะสำหรับการขยายเทมเพลตที่ซับซ้อน
ส่วนประกอบของผลิตภัณฑ์
| หมายเลขส่วนประกอบ | ส่วนประกอบ | #/ขนาดแมว | |
| 10145ES60 | 10145ES76 | ||
| 10145-ก | ฮิฟฟ์ คานาซ™ ยูราซิล+ ดีเอ็นเอโพลีเมอเรสที่มีความเที่ยงตรงสูง (1 U/μL) | 100 ไมโครลิตร | 500 ไมโครลิตร |
| 10145-ข | 2×คานาเซ™ บัฟเฟอร์ Uracil+ PCR (ประกอบด้วย Mg2+, dNTPs) | 1 มล.×3 | 1 มล.×15 |
การขนส่งและการเก็บรักษา
ส่วนประกอบได้รับการจัดส่งพร้อมถุงน้ำแข็งและสามารถเก็บรักษาที่อุณหภูมิ -20°C ได้นานถึง 1 ปี
การประยุกต์ใช้ผลิตภัณฑ์
การขยายไลบรารีความเที่ยงตรงสูงโดยใช้ไพรเมอร์/เทมเพลต/dNTP ที่ประกอบด้วย dUTP
ข้อควรระวัง
1. เพื่อความปลอดภัยและสุขภาพของคุณ โปรดสวมเสื้อคลุมแล็บและถุงมือแบบใช้แล้วทิ้งขณะผ่าตัด
2. เพื่อการวิจัยเท่านั้น!
คำแนะนำ
ฮิฟฟ์ คานาซทีเอ็ม Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase ใช้ในวิธีที่แตกต่างจากเอนไซม์ที่มีความเที่ยงตรงสูงทั่วไปเล็กน้อย โปรดอ่านคำแนะนำอย่างละเอียดก่อนใช้งาน
1. ระบบการตอบสนองที่แนะนำ
ทุกปฏิบัติการจะต้องดำเนินการบนน้ำแข็ง 2×Canaceทีเอ็ม ควรผสมบัฟเฟอร์ PCR Uracil+ ให้เข้ากันดีหลังการละลาย ก่อนกำหนดค่าระบบ โปรดอุ่นเครื่อง PCR ล่วงหน้า หลังจากเติมส่วนประกอบแล้ว ให้ผสมตัวอย่างให้เข้ากันดีด้วยปิเปต แล้วหมุนลงไปที่ก้นหลอด จากนั้นจึงนำไปใส่ในเครื่อง PCR ที่อุ่นไว้แล้วเพื่อขยายปริมาณ หลังจากใช้งานแล้ว ให้คืนส่วนประกอบทั้งหมดที่อุณหภูมิ -20 °C เพื่อจัดเก็บ
ตารางที่ 1 ปฏิกิริยาการขยาย PCR
| ส่วนประกอบ | ปริมาณ |
| ผลิตภัณฑ์แม่แบบหรือการผูกมัด | X µL |
| บัฟเฟอร์ PCR Uracil+ 2×CanaceTM (ประกอบด้วย Mg2+, dNTPs) | 25 ไมโครลิตร |
| ไพรเมอร์ฟอร์เวิร์ด (10-25 μM) | 1-2.5 ไมโครลิตร |
| ไพรเมอร์ย้อนกลับ (10-25 μM) | 1-2.5 µL |
| Hieff CanaceTM Uracil+ ดีเอ็นเอโพลีเมอเรสที่มีความเที่ยงตรงสูง (1 U/µL) | 1 µL |
| ดีดีเอชทูโอ | รวมเป็น 50 µL |
[หมายเหตุ]:
1) สารเคมี: ละลายส่วนประกอบแต่ละส่วนให้เพียงพอ ก่อนใช้งาน
2) เทมเพลต: การใช้เทมเพลต DNA คุณภาพสูงที่ผ่านการทำให้บริสุทธิ์สามารถปรับปรุงประสิทธิภาพและอัตราความสำเร็จของการขยายพันธุ์ได้อย่างมีนัยสำคัญ
3)dNTPs: ความเข้มข้นขั้นสุดท้ายของ dNTPs ที่แนะนำคือ 200 μM dNTPs ที่ให้มาในชุดไม่มี dUTP หากสถานการณ์พิเศษจำเป็นต้องเตรียมเทมเพลตที่มี dUTP สามารถเพิ่ม dUTP เพิ่มเติมในความเข้มข้นขั้นสุดท้าย 400 μM ได้
4) ความเข้มข้นของพอลิเมอเรส: แนะนำให้ใช้ 1 U/50 μL โดยสามารถปรับให้เหมาะสมได้ระหว่าง 0.5-2 U/50 μL ไม่ควรเกิน 2 U/50 μL เพื่อป้องกันไม่ให้พอลิเมอเรสย่อยสลายไพรเมอร์เนื่องจากกิจกรรมเอ็กโซนิวไคลด์ 3 '→5' แนะนำให้เติมพอลิเมอเรสลงในระบบปฏิกิริยาในขั้นตอนสุดท้าย
5) ความเข้มข้นสุดท้ายของ Mg2+: ความเข้มข้นสุดท้ายของระบบคือ 2 mM โปรดขอให้บริษัทของเราจัดหาบัฟเฟอร์ที่มีความเข้มข้นของ Mg2+ ต่ำหรือไม่มี Mg2+ หากคุณมีความต้องการพิเศษ
2. ขั้นตอนปฏิบัติในการตอบสนองที่แนะนำ
ตารางที่ 2 ขั้นตอนการทำปฏิกิริยาการขยาย PCR
| ขั้นตอน | อุณหภูมิ | ระยะเวลา | จำนวนรอบ |
| การเปลี่ยนแปลงสภาพเบื้องต้น | 98 องศาเซลเซียส | 1 นาที | 1 |
| การเปลี่ยนแปลงสภาพธรรมชาติ | 98 องศาเซลเซียส | 10 วินาที | 1~15 |
| การอบอ่อน | 60 องศาเซลเซียส | 30 วินาที | |
| ส่วนขยาย | 72 องศาเซลเซียส | 30 วินาที | |
| ส่วนขยายสุดท้าย | 72 องศาเซลเซียส | 5 นาที | 1 |
| ถือ | 4°C | - | - |
[หมายเหตุ]：
1) อุณหภูมิและเวลาในการเปลี่ยนสภาพเบื้องต้น: แนะนำให้ใช้ 98℃ เวลาที่แนะนำคือ 30 วินาทีสำหรับเทมเพลตง่าย ๆ เช่น พลาสมิด DNA 1 นาทีสำหรับไลบรารี 3 นาทีสำหรับเทมเพลตที่ซับซ้อน เช่น cDNA และจีโนม DNA และ 5-10 นาทีสำหรับเทมเพลตที่มีเนื้อหา GC สูง
2) อุณหภูมิและเวลาในการอบ: แนะนำให้ใช้ 60℃ หรือสามารถตั้งค่าการไล่ระดับอุณหภูมิเพื่อค้นหาอุณหภูมิที่เหมาะสมสำหรับการอบไพรเมอร์ตามความต้องการ เวลาอบที่แนะนำคือ 20 วินาทีและสามารถปรับภายใน 10-30 วินาที เวลาอบนานเกินไปอาจทำให้ผลิตภัณฑ์ที่ขยายใหญ่กระจายบนเจล
3) อุณหภูมิและเวลาในการขยาย: แนะนำให้ใช้ 72℃ เวลาในการขยายจะปรับตามความต้องการจริง
การชำระเงินและความปลอดภัย
ข้อมูลการชำระเงินของคุณได้รับการดำเนินการอย่างปลอดภัย เราไม่เก็บรายละเอียดบัตรเครดิตและไม่สามารถเข้าถึงข้อมูลบัตรเครดิตของคุณได้
การสอบถาม
คุณอาจชอบ
คำถามที่พบบ่อย
ผลิตภัณฑ์นี้มีวัตถุประสงค์เพื่อการวิจัยเท่านั้น และไม่ได้มีวัตถุประสงค์เพื่อใช้ในการรักษาหรือวินิจฉัยโรคในมนุษย์หรือสัตว์ ผลิตภัณฑ์และเนื้อหาได้รับการคุ้มครองโดยสิทธิบัตร เครื่องหมายการค้า และลิขสิทธิ์ที่เป็นของ
แอปพลิเคชั่นบางตัวอาจต้องใช้สิทธิ์ในทรัพย์สินทางปัญญาของบุคคลที่สามเพิ่มเติม