คำอธิบาย
คำอธิบายสินค้า
2×ฮิฟฟ์ คานาเช™ Plus PCR Master Mix (With Dye) คือสารละลายผสมสำเร็จ 2× พร้อมใช้งานที่ประกอบด้วย Hieff Canace™ เอนไซม์โพลีเมอเรสดีเอ็นเอที่มีความเที่ยงตรงสูง dNTP และระบบบัฟเฟอร์ที่ปรับให้เหมาะสม ส่วนผสมนี้ประกอบด้วยแอนติบอดีโมโนโคลนัล 2 ชนิดที่ยับยั้งกิจกรรมโพลีเมอเรสและกิจกรรมเอ็กโซนิวคลีเอส 3'→5' ที่อุณหภูมิห้อง ทำให้สามารถทำ Hot Start PCR ได้อย่างเฉพาะเจาะจง การเพิ่มปัจจัยการต่อขยายทำให้สามารถขยายขนาดชิ้นส่วนยาวได้ โดยมีชิ้นส่วนเป้าหมายขนาดสูงสุด 13 กิโลเบส เอนไซม์นี้แสดงกิจกรรมโพลีเมอเรสดีเอ็นเอ 5'→3' และกิจกรรมเอ็กโซนิวคลีเอส 3'→5' โดยมีความเที่ยงตรงมากกว่าโพลีเมอเรสดีเอ็นเอ Taq 83 เท่า และมากกว่าโพลีเมอเรสดีเอ็นเอ Pfu ทั่วไป 9 เท่า เหมาะสำหรับการขยายเทมเพลตที่ซับซ้อน เพื่อผลิตผลิตภัณฑ์ PCR แบบปลายทู่
2×ฮิฟฟ์ คานาเช™ Plus PCR Master Mix (With Dye) มีข้อดีหลายประการ เช่น ความเรียบง่าย ความไวสูง ความจำเพาะสูง และความเสถียรที่ยอดเยี่ยม ระบบปฏิกิริยาต้องการเพียงการเติมไพรเมอร์และเทมเพลต และสามารถใช้โปรโตคอล PCR สองขั้นตอนเพื่อลดความซับซ้อนของขั้นตอนและประหยัดเวลาได้ ผลิตภัณฑ์ประกอบด้วยสีติดตามอิเล็กโทรโฟเรซิส ช่วยให้โหลดผลิตภัณฑ์ PCR ได้โดยตรงสำหรับการวิเคราะห์เจล นอกจากนี้ ยังมีสารป้องกันพิเศษที่ช่วยให้กิจกรรมมีเสถียรภาพแม้จะผ่านการแช่แข็งและละลายซ้ำหลายครั้ง
ข้อมูลจำเพาะ
แมวนโอ้- | 10154ES01 / 10154ES03 / 10154ES08 / 10154ES60 |
ขนาด | 100 ไมโครลิตร / 1 มล. / 5×1 มล. / 100×1 มล. |
พื้นที่จัดเก็บ
ควรเก็บผลิตภัณฑ์นี้ไว้ที่ -25~-15℃ เป็นเวลา 1 ปี.
คำแนะนำ
1. ระบบปฏิกิริยา PCR ที่แนะนำ
ส่วนประกอบ | ปริมาณ-ไมโครลิตร- | สุดท้าย ความเข้มข้น |
2× ไฮเอฟ คานาซ™ พลัส PCR Master Mix (พร้อมสีย้อม)* | 25 | 1× |
เทมเพลต**- | เอ็กซ์ | - |
ซึ่งไปข้างหน้า พีริเมอร์-10 ไมโครโมล/ล.-- | 2 | 0.4 ไมโครโมล/ล. |
อาร์ย้อนกลับ พีริเมอร์-10 ไมโครโมล/ล.-- | 2 | 0.4 ไมโครโมล/ล. |
ดีดีเอช2โอ้ | สูงถึง 50 | - |
-ความเข้มข้นสุดท้ายของส่วนผสม 1× ประกอบด้วยโพลีเมอเรส 1 U/50 μL, แมกนีเซียม 2 mmol/L2+และ 200 μmol/L dNTPs-
**ความเข้มข้นสุดท้ายที่แนะนำของไพรเมอร์ในปฏิกิริยา PCR คือ 0.2-1 μmol/L โดยแนะนำให้ใช้ 0.4 μmol/L-
***ปริมาณเทมเพลตที่แนะนำสำหรับระบบปฏิกิริยา 25 μL:
ประเภทเทมเพลต | ขนาดแฟรกเมนต์ (1 kb-10 kb) |
ดีเอ็นเอจีโนม | 50 นาโนกรัม-200 นาโนกรัม |
พลาสมิดหรือดีเอ็นเอของไวรัส | 10 pg-20 ng |
ซีดีเอ็นเอ | 1-2.5 μL (ไม่เกิน 1/10 ของปริมาตร PCR ทั้งหมด) |
2. รายการรีแอ็คชั่น
1)โปรโตคอลสองขั้นตอน (แนะนำ):
วงจร ก้าว | ทีเอ็มพี | เวลา | วงจร |
การเปลี่ยนสภาพเบื้องต้น | 98℃ | 3 นาที | 1 |
การเปลี่ยนแปลงสภาพธรรมชาติ | 98℃ | 10 วินาที | 30-35 |
ส่วนขยาย | 68℃ | 30 วินาที/กิโลไบต์ | |
เอฟอินัล อีเอ็กซ์เทนชัน | 72℃ | 5 นาที | 1 |
2)โปรโตคอลสามขั้นตอน (ทั่วไป):
วงจร ก้าว | ทีเอ็มพี | เวลา | วงจร |
การเปลี่ยนสภาพเบื้องต้น- | 98℃ | 3 นาที | 1 |
การเปลี่ยนแปลงสภาพธรรมชาติ | 98℃ | 10 วินาที | 30-35 |
การอบอ่อน** | 60℃ | 20 วินาที | |
ส่วนขยาย*** | 72℃ | 30 วินาที/กิโลไบต์ | |
เอฟอินัล อีเอ็กซ์เทนชัน | 72℃ | 5 นาที | 1 |
-การเปลี่ยนแปลงโครงสร้างเบื้องต้น: แนะนำที่อุณหภูมิ 98°C เป็นเวลา 3 นาที (5-10 นาทีสำหรับเทมเพลต GC สูง)
**การอบ: แนะนำให้ใช้อุณหภูมิ 60°C เป็นเวลา 20 วินาที (ปรับได้ระหว่าง 10-30 วินาที) การอบเป็นเวลานานอาจทำให้เจลเลอะได้
***ส่วนขยาย: แนะนำที่อุณหภูมิ 72°C เป็นเวลา 30 วินาที/กิโลไบต์ (สูงสุด 60 วินาที/กิโลไบต์ สำหรับเทมเพลตที่ซับซ้อน)
3)โปรโตคอลการอบไล่ระดับ (แนะนำสำหรับเป้าหมายที่ยาก):
วงจร ก้าว | ทีเอ็มพี | เวลา | วงจร |
การเปลี่ยนสภาพเบื้องต้น | 98℃ | 3 นาที | 1 |
การเปลี่ยนแปลงสภาพธรรมชาติ | 98℃ | 10 วินาที | 15 (ลดลง 1°C ต่อรอบ) |
การอบแบบไล่ระดับ | 70-55 องศาเซลเซียส | 20 วินาที | |
ส่วนขยาย | 72℃ | 30 วินาที/กิโลไบต์ | |
การเปลี่ยนแปลงสภาพธรรมชาติ | 98 องศาเซลเซียส | 10 วินาที | 20 |
การอบอ่อน | 55 องศาเซลเซียส | 20 วินาที | |
ส่วนขยาย | 72 องศาเซลเซียส | 30 วินาที/กิโลไบต์ | |
เอฟอินัล อีเอ็กซ์เทนชัน | 72℃ | 5 นาที | 1 |
4)ลักษณะเฉพาะของโปรโตคอล PCR ที่แตกต่างกัน:
ประเภทโปรโตคอล | ความเร็ว | ความเฉพาะเจาะจง | ผลผลิต PCR | อัตราการตรวจจับ |
สองขั้นตอน | เร็วที่สุด | สูง | ปานกลาง | สูง |
สามขั้นตอน | ปานกลาง | ปานกลาง | สูงสุด | ปานกลาง |
การอบแบบไล่ระดับ | ช้า | สูง | ปานกลาง | สูง |
หมายเหตุ
1.ผลิตภัณฑ์นี้ใช้เพื่อการวิจัยเท่านั้น
2. โปรดปฏิบัติงานโดยสวมเสื้อคลุมแล็บและถุงมือแบบใช้แล้วทิ้ง-เพื่อความปลอดภัยของคุณ
การชำระเงินและความปลอดภัย
ข้อมูลการชำระเงินของคุณได้รับการดำเนินการอย่างปลอดภัย เราไม่เก็บรายละเอียดบัตรเครดิตและไม่สามารถเข้าถึงข้อมูลบัตรเครดิตของคุณได้
การสอบถาม
คุณอาจชอบ
คำถามที่พบบ่อย
ผลิตภัณฑ์นี้มีวัตถุประสงค์เพื่อการวิจัยเท่านั้น และไม่ได้มีวัตถุประสงค์เพื่อใช้ในการรักษาหรือวินิจฉัยโรคในมนุษย์หรือสัตว์ ผลิตภัณฑ์และเนื้อหาได้รับการคุ้มครองโดยสิทธิบัตร เครื่องหมายการค้า และลิขสิทธิ์ที่เป็นของ
แอปพลิเคชั่นบางตัวอาจต้องใช้สิทธิ์ในทรัพย์สินทางปัญญาของบุคคลที่สามเพิ่มเติม