คำอธิบาย
ชุด PCR สำหรับเนื้อเยื่อพืชโดยตรงเป็นชุดที่สามารถขยายใบพืชชนิดต่างๆ ได้โดยตรงด้วย PCR สามารถปรับใช้ได้หลากหลายและมีเสถียรภาพสูง ชุดใช้ระบบบัฟเฟอร์ไลซิสเฉพาะซึ่งสามารถไลซิสตัวอย่างพืชต่างๆ ได้อย่างรวดเร็วและปลดปล่อยดีเอ็นเอจีโนม ดีเอ็นเอจีโนมที่ปลดปล่อยออกมาสามารถใช้เป็นแม่แบบได้โดยตรงโดยไม่ต้องกำจัดโปรตีน อาร์เอ็นเอ หรือเมตาบอไลต์รองในปฏิกิริยา PCR นอกจากนี้ ชุดยังต้องการตัวอย่างในปริมาณเล็กน้อย โดยสามารถใช้ใบพืชที่มีขนาดเล็กเพียง 1 มม. สำหรับการทดลองได้
2×Plant Master Mix ที่ให้มาในชุดนี้รองรับการขยายพันธุ์ได้ดีและสามารถใช้ไลเสทของตัวอย่างเป็นแม่แบบสำหรับการขยายพันธุ์ที่มีประสิทธิภาพและเฉพาะเจาะจงได้โดยตรง รีเอเจนต์นี้เป็นส่วนผสมปฏิกิริยา PCR เข้มข้น 2 เท่า ซึ่งประกอบด้วยส่วนประกอบทั้งหมดที่ใช้ในการขยายพันธุ์ PCR ยกเว้นแม่แบบและไพรเมอร์ ซึ่งช่วยลดความซับซ้อนของกระบวนการทำงานและลดโอกาสการปนเปื้อนได้อย่างมาก
ชุดอุปกรณ์นี้สามารถใช้สำหรับการระบุพืชดัดแปลงพันธุกรรม การสร้างจีโนไทป์ของพืช ฯลฯ
การส่งสินค้า
สินค้ามีการจัดส่งพร้อมถุงน้ำแข็ง
พื้นที่จัดเก็บ
1. รีเอเจนต์ 10187-A [บัฟเฟอร์ P1] สามารถเก็บไว้ที่ 4℃ ได้นาน 1 ปี
2. รีเอเจนต์ 10187-B [บัฟเฟอร์ P2] ใช้ในการทำให้ไลเสทเป็นกลาง ซึ่งมีประโยชน์ต่อการเก็บตัวอย่างได้นานขึ้น และสามารถจัดเก็บที่อุณหภูมิ 4℃ ได้นานถึง 1 ปี
3. รีเอเจนต์ 10187-C [Plant Master Mix 2×] สามารถเก็บไว้ที่อุณหภูมิ -20℃ ได้นาน 1 ปี หลีกเลี่ยงการแช่แข็งและละลายซ้ำๆ
ข้อควรระวัง
1. เมื่อทำการทดลองใบไม้ แนะนำให้ใช้เนื้อเยื่อใบที่เพิ่งเก็บสดๆ หากเป็นเนื้อเยื่อแช่แข็งระยะยาว จะต้องเก็บไว้ที่อุณหภูมิ -80°C ควรหลีกเลี่ยงการแช่แข็งและละลายซ้ำๆ มากที่สุดเท่าที่จะทำได้ เพื่อหลีกเลี่ยงการเสื่อมสภาพของเทมเพลตและส่งผลต่อประสิทธิภาพของ PCR เนื้อเยื่อใบเหมาะสำหรับใบอ่อน หากเป็นใบแก่ ควรหลีกเลี่ยงการใช้เนื้อเยื่อของเส้นใบหลัก
2. ขอแนะนำให้ขยายชิ้นส่วนให้มีความยาวไม่เกิน 1 kb เพื่อประสิทธิภาพในการขยายเสียงที่ดีที่สุด
3. เมื่อทำการสุ่มตัวอย่าง ให้ใช้ที่เจาะรูหรือมีดเพื่อเจาะตัวอย่างให้ได้ขนาดที่เหมาะสม หากตัวอย่างมีขนาดแตกต่างกัน ต้องทำความสะอาดที่เจาะรูหรือมีดทุกครั้งก่อนทำการสุ่มตัวอย่าง
4. สำหรับเนื้อเยื่อใบ แนะนำให้ใช้ใบที่มีขนาด 1-10 มม. เพราะใบที่ยาวเกินไปจะทำให้ผลผลิต PCR ขยายต่ำ หากยาวเกินไปจะยับยั้งปฏิกิริยา PCR ให้ใช้วิธีการแตกร้าวด้วยความร้อน บดด้วยปลายปิเปต และบดด้วยเครื่องบดเพื่อบำบัดใบไม้ หลังจากบำบัดแล้ว จำเป็นต้องเขย่าและปั่นเหวี่ยง อย่าลืมนำส่วนที่เป็นของเหลวใสไปทดสอบ การตกตะกอนจะยับยั้งปฏิกิริยา PCR อย่างมาก
5. เพื่อความปลอดภัยและสุขภาพของคุณ โปรดสวมเสื้อคลุมแล็บและถุงมือแบบใช้แล้วทิ้งขณะผ่าตัด
6. ผลิตภัณฑ์นี้ใช้เพื่อการวิจัยเท่านั้น!
ปัญหาทั่วไป | สาเหตุที่เป็นไปได้ | โซลูชั่น |
ไม่มีแถบในตัวควบคุมเชิงบวกและตัวอย่างที่ต้องทดสอบ | ระบบปฏิกิริยา PCR หรือสภาวะปฏิกิริยาไม่เหมาะสม | ใช้ gradient PCR เพื่อสำรวจสภาวะปฏิกิริยาที่เหมาะสมที่สุดสำหรับ PCR |
การจัดเก็บสารเคมี PCR ที่ไม่เหมาะสมจะทำให้สารเคมีดังกล่าวไม่ทำงาน | ควรเก็บ 2×PCR Mix ไว้ที่ -20℃ หลีกเลี่ยงการแช่แข็งและละลายซ้ำๆ เมื่อใช้งาน หากใช้บ่อยครั้ง สามารถเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 4°C ได้เป็นเวลาสั้นๆ | |
ปัญหาการออกแบบไพรเมอร์ | ลองออกแบบไพรเมอร์ใหม่เพื่อตรวจสอบ | |
การควบคุมเชิงบวกมีแถบที่น่าสนใจ และตัวอย่างที่ต้องการทดสอบไม่มีแถบหรือแถบที่อ่อน | อัตราส่วนของบัฟเฟอร์ไลซิสและบัฟเฟอร์เป็นกลางไม่เหมาะสม และส่วนผสมไลซิสจะส่งผลต่อค่า pH ของระบบ PCR | ภายใต้สภาวะปกติ ค่า pH ของส่วนผสมไลซิสที่ถูกทำให้เป็นกลางควรอยู่ที่ประมาณ 7-8 (ผลิตภัณฑ์ไลซิสและบัฟเฟอร์ P2 ควรได้รับการทำให้เป็นกลางอย่างเคร่งครัดตามอัตราส่วน 5:1) |
ส่วนผสมไลซิสตัวอย่างถูกเก็บไว้ไม่ถูกต้องหรือเป็นเวลานานเกินไป และจีโนมของ DNA ก็ถูกย่อยสลาย | สามารถเก็บส่วนผสมไลเสทได้ที่อุณหภูมิ 4°C เป็นเวลา 5 วัน พยายามใช้ส่วนผสมไลเสทที่เตรียมใหม่สำหรับ PCR | |
จำนวนเทมเพลตที่เพิ่มไม่เหมาะสม | เพิ่มประสิทธิภาพปริมาณเทมเพลตที่เพิ่มเข้ามาภายในช่วง <5% ของระบบปฏิกิริยา | |
จำนวนรอบ PCR ไม่เพียงพอ | เพิ่มจำนวนรอบการทำ PCR อย่างเหมาะสม โดยควรเป็น 35-40 รอบ เนื่องจากเทมเพลตมีความซับซ้อน โดยทั่วไปแล้วควรใช้ปฏิกิริยา PCR เพิ่มขึ้น 5-10 รอบ แทนที่จะใช้เทมเพลต DNA ที่บริสุทธิ์ | |
การขยายสัญญาณแบบไม่จำเพาะ | อุณหภูมิการอบ PCR ต่ำเกินไป หมายเลขรอบ ความเข้มข้นของไพรเมอร์ หรือความเข้มข้นของเทมเพลตสูงเกินไป | เพิ่มอุณหภูมิการอบ PCR และลดจำนวนรอบ PCR ความเข้มข้นของไพรเมอร์หรือความเข้มข้นของเทมเพลต |
ไพรเมอร์ PCR ไม่ตรงกัน | ออกแบบไพรเมอร์ PCR ใหม่ | |
อุณหภูมิที่สูงเกินไปในการเตรียมระบบปฏิกิริยา PCR หรือระยะเวลาที่วางหลังจากการเตรียมนานเกินไป | การเตรียมระบบปฏิกิริยา PCR จะดำเนินการที่อุณหภูมิต่ำ และปฏิกิริยาการขยาย PCR จะดำเนินการโดยเร็วที่สุดหลังจากการเตรียมเสร็จสิ้น | |
แถบเป้าหมายปรากฏในการควบคุมเชิงลบ | การปนเปื้อนของเครื่องมือปฏิบัติการหรือสารเคมี | สารเคมีหรืออุปกรณ์ทั้งหมดในการทดลองจะต้องผ่านการนึ่งฆ่าเชื้อด้วยไอน้ำควรใช้ความระมัดระวังและเบามือเมื่อจัดการเพื่อป้องกันไม่ให้ลำดับเป้าหมายถูกดูดเข้าไปในปืนตัวอย่างหรือหกออกมาจากท่อเหวี่ยง |
การปนเปื้อนข้ามระหว่างตัวอย่าง | แต่ละใบเก็บตัวอย่างจะใช้กับตัวอย่างเพียง 1 ตัวอย่างเท่านั้น หรือหลังจากเก็บตัวอย่างไป 1 ตัวอย่างแล้ว ให้จุ่มใบมีดเก็บตัวอย่างในสารละลายโซเดียมไฮโปคลอไรต์ 2% ล้างซ้ำหลายๆ ครั้ง แล้วจึงเช็ดส่วนที่เหลือให้แห้งด้วยกระดาษเช็ดมือที่สะอาด |
การชำระเงินและความปลอดภัย
ข้อมูลการชำระเงินของคุณได้รับการดำเนินการอย่างปลอดภัย เราไม่เก็บรายละเอียดบัตรเครดิตและไม่สามารถเข้าถึงข้อมูลบัตรเครดิตของคุณได้
การสอบถาม
คุณอาจชอบ
คำถามที่พบบ่อย
ผลิตภัณฑ์นี้มีวัตถุประสงค์เพื่อการวิจัยเท่านั้น และไม่ได้มีวัตถุประสงค์เพื่อใช้ในการรักษาหรือวินิจฉัยโรคในมนุษย์หรือสัตว์ ผลิตภัณฑ์และเนื้อหาได้รับการคุ้มครองโดยสิทธิบัตร เครื่องหมายการค้า และลิขสิทธิ์ที่เป็นของ
แอปพลิเคชั่นบางตัวอาจต้องใช้สิทธิ์ในทรัพย์สินทางปัญญาของบุคคลที่สามเพิ่มเติม