คำอธิบาย
ชุดตรวจ Hieff® Blood Advanced Direct PCR เป็นชุดตรวจที่สามารถขยายตัวอย่างเลือดทั้งหมดได้โดยตรง โดยไม่ต้องทำการทำให้บริสุทธิ์ด้วย DNA หรือทำการเตรียมตัวอย่างก่อน และสามารถใช้ได้กับเลือดสด เลือดที่แช่เย็น (แช่แข็ง) และเลือดแห้งที่ขายตามท้องตลาดที่มีสารกันเลือดแข็งทั่วไป เช่น EDTA เฮปาริน ซิเตรต เป็นต้น ชุดตรวจนี้ประกอบด้วยการผสมดีเอ็นเอโพลีเมอเรสที่ดัดแปลงพันธุกรรมซึ่งมีความแม่นยำสูงและทนต่อสารยับยั้ง PCR บัฟเฟอร์ Hieff® Blood Advanced Direct PCR 2 เท่าที่มีปัจจัยการต่อขยายที่แข็งแกร่ง ปัจจัยเสริมการขยาย และระบบบัฟเฟอร์ที่ปรับให้เหมาะสมเพื่อขยายชิ้นส่วนจีโนมขนาด 8 กิโลเบสได้อย่างมีประสิทธิภาพภายใต้สภาวะการขยายอย่างรวดเร็ว และตั้งเวลาการขยายชิ้นส่วนที่มีขนาดต่ำกว่า 2 กิโลเบสได้ 3-5 วินาทีต่อกิโลเบส จึงช่วยลดเวลาในการระบุและทดสอบตัวอย่างเลือดได้อย่างมาก
ข้อมูลจำเพาะ
| ความซื่อสัตย์ (เทียบกับ Taq) | 1 × |
| ฮอตสตาร์ต | ใช่ |
| ส่วนที่ยื่นออกมา | 3'-เอ |
| โพลิเมอเรส | เอนไซม์ Taq DNA Polymerase (รหัส: 10726) |
ส่วนประกอบ
| เลขที่ | ชื่อ | 10188ES20 | 10188ES60 |
| 10188-ก | 2× ฮิฟ บัฟเฟอร์ PCR ขั้นสูงของเลือด | 500 μล | 2.5 มล. |
| 10188-ข | ไฮฟ์ ส่วนผสมดีเอ็นเอโพลีเมอเรสขั้นสูงที่มีความเที่ยงตรงสูง | 20 μล | 100 ไมโครลิตร |
| 10188-ค | ไพรเมอร์ผสมควบคุมเชิงบวก (10 μM แต่ละตัว) | 100 ไมโครลิตร | 200 ไมโครลิตร |
| 10188-ง | บัฟเฟอร์โหลด DNA 10× | 1 มล. | 1 มล. |
คำแนะนำ
ระบบปฏิกิริยา PCR ที่แนะนำ
| ส่วนประกอบ | ปริมาตร (μL) |
| ดีดีเอช2โอ้ | ถึง 50 μL |
| 2× ฮิฟ บัฟเฟอร์ PCR ขั้นสูงของเลือด | 25 ไมโครลิตร |
| ไพรเมอร์ฟอร์เวิร์ด (10 μM) | 2 ไมโครลิตร |
| ไพรเมอร์ย้อนกลับ (10 μM) | 2 ไมโครลิตร |
| ไฮฟ์ ส่วนผสมดีเอ็นเอโพลีเมอเรสขั้นสูงที่มีความเที่ยงตรงสูง | 1 ไมโครลิตร |
| ตัวอย่างเลือด | เอ็กซ์ |
2. แนะนำให้ใช้ความเข้มข้นสุดท้ายที่ 0.4 μM ต่อไพรเมอร์ เพราะหากมากเกินไป จะทำให้การขยายตัวไม่จำเพาะ
3. ความเข้มข้นของเทมเพลตเลือดทั้งหมดที่เหมาะสมคือ 0.5% ถึง 20% และแนะนำให้ใช้ 10% เป็นเงื่อนไขการทดลองเริ่มต้น นั่นคือ เติมเลือดทั้งหมด 5 μL เป็นเทมเพลตในระบบปฏิกิริยา 50 μL โดยระวังอย่าให้เลือดแข็งตัว สำหรับคราบเลือดแห้งที่เก็บไว้บนแผ่นกรอง Whatman® สามารถนำกระดาษกลมที่มีคราบเลือดประมาณ 1 มม.2 มาขยายโดยตรงในปฏิกิริยา PCR โดยไม่ต้องเตรียมการล่วงหน้า
รายการรีแอคชั่น
| วงจร ก้าว | อุณหภูมิ | เวลา | วงจร |
| การเปลี่ยนสภาพเบื้องต้น | 95℃ | 5 นาที | 1 |
| การเปลี่ยนแปลงสภาพธรรมชาติ | 95℃ | 15 วินาที | 30-35 |
| การอบอ่อน | 60℃ | 15 วินาที | |
| ส่วนขยาย | 72℃ | 3-10 วินาที/กิโลไบต์ | |
| สุดท้าย ส่วนขยาย | 72℃ | 5 นาที | 1 |
อุณหภูมิการอบอ่อนเป็นค่า Tm ทั่วไปหรือต่ำกว่าค่า Tm ของไพรเมอร์ 1-2°C หากผลิตภัณฑ์ขยายสัญญาณมีความเฉพาะเจาะจงน้อยลง ก็สามารถกำหนดค่าการไล่ระดับอุณหภูมิการอบอ่อนเพื่อค้นหาเงื่อนไขการอบอ่อนที่เหมาะสมที่สุดได้
เวลาขยาย 10 วินาที/กิโลบิตต่อวินาทีสามารถขยายชิ้นส่วนเป้าหมายส่วนใหญ่ที่มีขนาดต่ำกว่า 8 กิโลบิตต่อวินาทีได้ และ 3-5 วินาที/กิโลบิตต่อวินาทีสามารถขยายชิ้นส่วนส่วนใหญ่ที่มีขนาดต่ำกว่า 2 กิโลบิตต่อวินาทีได้ หากประสิทธิภาพการขยายต่ำ เวลาขยายได้อย่างเหมาะสมเป็น 20-30 วินาที/กิโลบิตต่อวินาที และไม่ควรเกิน 60 วินาที/กิโลบิตต่อวินาที
การขนส่งและการเก็บรักษา
ผลิตภัณฑ์ควรเก็บไว้ที่อุณหภูมิ -15℃ ~ -25℃ สำหรับ 1 ปี
ตัวเลข
หมายเหตุ
1. ขอแนะนำให้ใช้เทมเพลตเลือดเป็น 10% ของปริมาตรปฏิกิริยาทั้งหมด นั่นคือ เติมเลือดทั้งหมด 5 μL ลงในระบบปฏิกิริยา 50 μL เป็นเทมเพลต โดยระวังอย่าให้เลือดแข็งตัว
2. เวลาในการขยาย 10 วินาที/กิโลไบต์สามารถขยายชิ้นส่วนเป้าหมายส่วนใหญ่ที่มีขนาดต่ำกว่า 8 กิโลไบต์ได้ และ 3-5 วินาที/กิโลไบต์สามารถขยายชิ้นส่วนส่วนใหญ่ที่มีขนาดต่ำกว่า 2 กิโลไบต์ได้ หากประสิทธิภาพการขยายต่ำ ก็สามารถขยายเวลาเป็น 30 วินาที/กิโลไบต์ได้
3. หลังจากปฏิกิริยา PCR แนะนำให้ปั่นผลิตภัณฑ์ปฏิกิริยาที่ 4,000 รอบต่อนาที (1,000× g) เป็นเวลา 1-3 นาที เพื่อตกตะกอนชิ้นส่วนเซลล์เม็ดเลือด และนำส่วนที่เป็นของเหลวใสไปวิเคราะห์ในขั้นตอนต่อไป
4. ผลิตภัณฑ์นี้ไม่สามารถใช้สำหรับการวินิจฉัยทางการแพทย์โดยตรง
5. เพื่อความปลอดภัยและสุขภาพของคุณ โปรดสวมเสื้อคลุมแล็บและถุงมือแบบใช้แล้วทิ้ง
การชำระเงินและความปลอดภัย
ข้อมูลการชำระเงินของคุณได้รับการดำเนินการอย่างปลอดภัย เราไม่เก็บรายละเอียดบัตรเครดิตและไม่สามารถเข้าถึงข้อมูลบัตรเครดิตของคุณได้
การสอบถาม
คุณอาจชอบ
คำถามที่พบบ่อย
ผลิตภัณฑ์นี้มีวัตถุประสงค์เพื่อการวิจัยเท่านั้น และไม่ได้มีวัตถุประสงค์เพื่อใช้ในการรักษาหรือวินิจฉัยโรคในมนุษย์หรือสัตว์ ผลิตภัณฑ์และเนื้อหาได้รับการคุ้มครองโดยสิทธิบัตร เครื่องหมายการค้า และลิขสิทธิ์ที่เป็นของ
แอปพลิเคชั่นบางตัวอาจต้องใช้สิทธิ์ในทรัพย์สินทางปัญญาของบุคคลที่สามเพิ่มเติม