คำอธิบาย
ผลิตภัณฑ์นี้เป็นแบคทีเรียโฟจ T7 RNA โพลิเมอเรสที่ได้จากการแสดงออกของโปรตีนรีคอมบิแนนท์ใน Escherichia coli เป็นตัวเร่งปฏิกิริยาการสังเคราะห์ RNA จาก 5'→3' บน DNA สายคู่จากลำดับโปรโมเตอร์ T7 (5'-TAATACGACTCACTATAG*-3') และใช้ NTP เป็นสารตั้งต้น DNA ที่มีปลายทู่เชิงเส้นสายคู่หรือปลายยื่น 5' สามารถใช้เป็นแม่แบบสำหรับแบคทีเรียโฟจ T7 RNA โพลิเมอเรส จึงสามารถใช้พลาสมิดเชิงเส้นและผลิตภัณฑ์ PCR เป็นแม่แบบสำหรับการทดลองในหลอดทดลองได้ การสังเคราะห์ RNA
หมายเหตุ: G* เป็นเบสแรกของทรานสคริปต์ RNA
ผลิตภัณฑ์นี้ผลิตตามข้อกำหนด GMP และจัดมาให้ในรูปแบบของเหลว
คุณสมบัติ
- สังเคราะห์ทรานสคริปต์ยาวและทรานสคริปต์สั้น สามารถผลิต RNA ได้ 100-200 μg ด้วยเทมเพลต DNA 1 μg
- ผลผลิตสูงและใช้งานง่าย
- เอนโดทอกซินต่ำ
- ทดสอบการไม่มีเอ็นโดนิวคลีเอส เอ็กโซนิวคลีเอส RNases
แอปพลิเคชัน
- การเตรียมโพรบ RNA ที่มีฉลากกัมมันตรังสี
- การสร้าง RNA เพื่อศึกษาโครงสร้าง การประมวลผล และการเร่งปฏิกิริยาของ RNA
- การควบคุมการแสดงออกผ่านแอนติเซนส์อาร์เอ็นเอ
- การสังเคราะห์ mRNA, sgRNA
ข้อมูลจำเพาะ
| แหล่งที่มา | แสดงออกใน อี.โคไล ด้วยยีนโพลีเมอเรส RNA T7 แบบรีคอมบิแนนท์ |
| อุณหภูมิที่เหมาะสม | 37℃ |
| บัฟเฟอร์เก็บข้อมูล | 50 มิลลิโมลาร์ ทริส-HCl, 1 มิลลิโมลาร์ EDTA, 10 มิลลิโมลาร์ DTT, 100 มิลลิโมลาร์ NaCl, 0.1% ทริส-เอชซีแอล-100, 50% (v/v) กลีเซอรีน, pH7.9 ที่ 25℃ |
| คำจำกัดความของหน่วย | ปริมาณเอนไซม์ที่ต้องการเพื่อรวม 1 nmol ของ [3H] GMP ลงในตะกอนที่ไม่ละลายในกรดภายใน 1 ชั่วโมงที่ 37°C และ pH 8.0 กำหนดให้เป็น 1 หน่วย |
คุณภาพ
| รายการ COA | มาตรฐาน |
| กิจกรรม | 250-300U/ไมโครลิตร |
| โปรตีน ความเข้มข้น | ≥0.5มก./มล. |
| ความบริสุทธิ์ | ≥95% |
| เอนโดทอกซิน | <20 EU/มก. |
| โปรตีเอสตกค้าง | เชิงลบ |
| เอ็กโซนิวคลีเอสตกค้าง | เชิงลบ |
| ไนกาเซสตกค้าง | เชิงลบ |
| เอนไซม์ RNase ที่เหลือ | เชิงลบ |
| อี. โปรตีนโฮสต์โคไล | <50ppm |
| อีโคไลโฮสต์ ดีเอ็นเอ | <10 กรัม/หน่วย |
| ไมโคพลาสมา ดีเอ็นเอ | เชิงลบ |
ส่วนประกอบ
| ส่วนประกอบ หมายเลข | ชื่อ | 10625ES10 (10 ก.พ.) | 10625ES60 (100 ก.ว.) | 10625ES86 (2,500 คู) | 10625ES99 (100 มิว) |
| 10625 | โพลิเมอร์ RNA ของ T7 เกรด GMP (250 U/μL) | 40 ไมโครลิตร | 400 ไมโครลิตร | 10 มล. | 400 มล. |
การขนส่งและการเก็บรักษา
ผลิตภัณฑ์เกรด GMP ของ T7 RNA Polymerase จัดส่งด้วยน้ำแข็งแห้งและสามารถจัดเก็บที่อุณหภูมิ -15℃ ~ -25℃ ได้นานหนึ่งปี
ตัวเลข
รูปที่ 1 สังเคราะห์ RNA มาตรฐานในหลอดทดลองโดยใช้ชุดสังเคราะห์ RNA T7
ปฏิกิริยาถูกบ่มในเครื่อง PCR ที่อุณหภูมิ 37℃ เป็นเวลา 2 ชั่วโมง จากนั้นจึงทำการทำให้บริสุทธิ์ด้วยลูกปัดแม่เหล็ก (Cat#12602) ผลลัพธ์ที่ได้จะถูกวิเคราะห์โดยเครื่องสเปกโตรโฟโตมิเตอร์ NanoDrop ดังแสดงในรูปที่ 1
รูปที่ 2 การสาธิตการถอดรหัสของ RNA ที่มีความยาวต่างกันโดยใช้ชุด T7 ตามลำดับในอิเล็กโทรโฟเรโตแกรม (รูปที่ 2A) ไดอะแกรมอิเล็กโทรโฟเรซิสแบบแคปิลลารี (รูปที่ 2B) และโครมาโทแกรม (รูปที่ 2C)
รูปที่ 3 การสังเคราะห์ RNA ที่ถูกปิดฝาในหลอดทดลอง
ปฏิกิริยาถูกบ่มในเครื่อง PCR ที่อุณหภูมิ 37℃ เป็นเวลา 2 ชั่วโมง จากนั้นจึงทำการทำให้บริสุทธิ์ด้วยลูกปัดแม่เหล็ก (Cat#12602) ผลที่ได้จะถูกวิเคราะห์โดยเครื่องสเปกโตรโฟโตมิเตอร์ NanoDrop ตามที่แสดงในรูปที่ 3A ผลความสมบูรณ์จะถูกวิเคราะห์โดยอิเล็กโทรโฟรีซิสแบบแคปิลลารีตามที่แสดงในรูปที่ 3B
การชำระเงินและความปลอดภัย
ข้อมูลการชำระเงินของคุณได้รับการดำเนินการอย่างปลอดภัย เราไม่เก็บรายละเอียดบัตรเครดิตและไม่สามารถเข้าถึงข้อมูลบัตรเครดิตของคุณได้
การสอบถาม
คุณอาจชอบ
คำถามที่พบบ่อย
ผลิตภัณฑ์นี้มีวัตถุประสงค์เพื่อการวิจัยเท่านั้น และไม่ได้มีวัตถุประสงค์เพื่อใช้ในการรักษาหรือวินิจฉัยโรคในมนุษย์หรือสัตว์ ผลิตภัณฑ์และเนื้อหาได้รับการคุ้มครองโดยสิทธิบัตร เครื่องหมายการค้า และลิขสิทธิ์ที่เป็นของ
แอปพลิเคชั่นบางตัวอาจต้องใช้สิทธิ์ในทรัพย์สินทางปัญญาของบุคคลที่สามเพิ่มเติม