คำอธิบาย
Hifair™ AdvanceFast One-step RT-gDNA Digestion SuperMix สำหรับ qPCR แสดงถึงการทำซ้ำที่ปรับปรุงของ Hifair™ Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix สำหรับ qPCR (gDNA Digester Plus) ออกแบบมาเพื่อตอบสนองความต้องการในการทำปฏิกิริยาการถอดรหัสย้อนกลับและการกำจัดจีโนมภายในหลอดเดียว นอกจากนี้ ยังทำให้กระบวนการปฏิกิริยามีประสิทธิภาพ ลดเวลาในการทำปฏิกิริยาลงอย่างมาก และเพิ่มผลผลิตของผลิตภัณฑ์การถอดรหัสย้อนกลับ 4×Hifair® AdvanceFast One-Step RT SuperMix ประกอบด้วยรีเอเจนต์ที่จำเป็นสำหรับปฏิกิริยาการถอดรหัสย้อนกลับ ในระหว่างปฏิกิริยา คุณเพียงแค่ต้องเสริมด้วย gDNA Remover Mix, เทมเพลต RNA และน้ำ เพื่อสังเคราะห์สายเริ่มต้นของ cDNA อย่างมีประสิทธิภาพพร้อมๆ กับกำจัดการปนเปื้อนของ DNA ในจีโนมไปพร้อมกัน ผลิตภัณฑ์นี้เหมาะอย่างยิ่งสำหรับการถอดรหัสย้อนกลับของเทมเพลต RNA ที่ซับซ้อน และพิสูจน์แล้วว่ามีประสิทธิภาพสูงสำหรับการถอดรหัสย้อนกลับที่เกี่ยวข้องกับปริมาณเทมเพลตที่น้อยและยีนที่มีสำเนาน้อย
ผลิตภัณฑ์การถอดรหัสย้อนกลับที่สร้างโดยผลิตภัณฑ์เฉพาะนี้เข้ากันได้ดีกับวิธี qPCR ทั้งแบบใช้โพรบและแบบใช้สีย้อม สำหรับ qPCR แบบใช้โพรบ เราขอแนะนำให้ใช้มาสเตอร์มิกซ์ qPCR แบบมัลติเพล็กซ์ Hieff Unicon® Universal TaqMan (Cat#11211) ในขณะที่สำหรับ qPCR แบบใช้สีย้อม Hieff UNICON® Universal Blue qPCR SYBR Green Master Mix (Cat#11184) เป็นตัวเลือกที่แนะนำสำหรับการวิเคราะห์การแสดงออกของยีนประสิทธิภาพสูง
อย่างไรก็ตาม สิ่งสำคัญคือต้องทราบว่าผลิตภัณฑ์การถอดรหัสย้อนกลับที่ผลิตโดยผลิตภัณฑ์นี้ไม่เหมาะสำหรับการใช้งานในภายหลัง เช่น การขยายชิ้นส่วนยาว หากคุณต้องการการถอดรหัสย้อนกลับที่มีประสิทธิภาพสำหรับวัตถุประสงค์เหล่านี้ เราขอแนะนำให้ใช้ชุดสังเคราะห์ cDNA Hifair® AdvanceFast 1st Strand (Cat#11149, Cat#11150)
คุณสมบัติ
- 5 นาทีของ RT
-
การย่อย RT และ gDNA แบบบูรณาการในหลอดเดียว
แอปพลิเคชั่น
- RT-qPCR
- การสังเคราะห์ RNA แอนติเซนส์
ข้อมูลจำเพาะ
| ประเภทของผลิตภัณฑ์ขั้นสุดท้าย | cDNA (สายแรก) |
| วิธี PCR | การตรวจด้วยวิธีอาร์ที-พีซีอาร์ |
| ชนิดของสารเคมี | การถอดเสียงย้อนกลับ |
| ประเภทของตัวอย่าง | อาร์เอ็นเอ |
| อุณหภูมิปฏิกิริยาที่เหมาะสม | 37℃ |
| ทรานสคริปเทสย้อนกลับ | เอ็ม-เอ็มแอลวี |
ส่วนประกอบ
| เลขที่ | ชื่อ | 11151ES10 (10ต) | 11151ES60 (100ตัน) |
| 11151-ก | 4×ไฮแฟร์ AdvanceFast วันสเต็ป RT ซุปเปอร์มิกซ์ | 50 ไมโครลิตร | 500 ไมโครลิตร |
| 11151-ข | น้ำยาขจัดคราบ DNA | 10 ไมโครลิตร | 100 ไมโครลิตร |
| 11151-ค | น้ำปราศจาก RNase | 1 มล. | 2×1 มล. |
การขนส่งและการเก็บรักษา
ผลิตภัณฑ์จัดส่งพร้อมน้ำแข็งแห้งและสามารถจัดเก็บที่อุณหภูมิ -15℃ ~ -25℃ ได้นานถึง 12 เดือน
คำแนะนำการใช้งาน
ละลาย ส่วนประกอบ 11151-A/B/C บนน้ำแข็ง เขย่าเบาๆ และผสมส่วนประกอบรีเอเจนต์แต่ละส่วนให้เข้ากัน จากนั้นประกอบส่วนประกอบต่อไปนี้ ส่วนประกอบ ภายในหลอดที่ปราศจาก RNase:
| ส่วนประกอบ | ปริมาตร (μL) |
| ปราศจาก RNase น้ำ | ถึง 20 μL |
| 4×ไฮแฟร์ AdvanceFast วันสเต็ป RT ซุปเปอร์มิกซ์ | 5 ไมโครลิตร |
| น้ำยาขจัดคราบ DNA | 1 ไมโครลิตร |
| อาร์เอ็นเอทั้งหมด | 10 หน้า -5 ไมโครกรัม* |
| หรือ mRNA | 10 pg-500 ng* |
ตารางที่ 1: การเตรียมปฏิกิริยา
*เราขอแนะนำให้ใช้ปริมาณ RNA ไม่เกิน 2 μg ในกรณีที่มีการแสดงออกของยีนเป้าหมายในปริมาณต่ำ อาจเพิ่มปริมาณ RNA สูงสุดได้ไม่เกิน 5 μg
| อุณหภูมิ | เวลา |
| 37℃ | 5 นาที* |
| 85℃ | 30 วินาที |
ตารางที่ 2: โปรโตคอลการตอบสนอง
*กระบวนการนี้ครอบคลุมทั้งการถอดรหัสย้อนกลับและการย่อย gDNA
ผลิตภัณฑ์การถอดรหัสย้อนกลับเหมาะสำหรับการใช้งานทันทีในปฏิกิริยา qPCR หรือสามารถเก็บไว้ที่อุณหภูมิ -20°C เป็นระยะเวลาสั้นๆ สำหรับการจัดเก็บแบบขยายเวลา เราขอแนะนำให้แบ่งส่วนและจัดเก็บที่อุณหภูมิ -80°C เพื่อป้องกันการแช่แข็งและละลายซ้ำหลายครั้ง
ข้อควรระวัง:
1. ขั้นตอนทั้งหมดควรดำเนินการบนน้ำแข็ง โดยระมัดระวังสูงสุดเพื่อป้องกันการปนเปื้อนของ RNase
2. รับประกันความปลอดภัยและความเป็นอยู่ที่ดีของคุณด้วยการสวมเสื้อคลุมห้องปฏิบัติการและถุงมือแบบใช้แล้วทิ้ง
3. ผลิตภัณฑ์นี้มีวัตถุประสงค์เพื่อการวิจัยทางวิทยาศาสตร์เท่านั้น และไม่ควรนำไปใช้ในทางอื่น
การชำระเงินและความปลอดภัย
ข้อมูลการชำระเงินของคุณได้รับการดำเนินการอย่างปลอดภัย เราไม่เก็บรายละเอียดบัตรเครดิตและไม่สามารถเข้าถึงข้อมูลบัตรเครดิตของคุณได้
การสอบถาม
คุณอาจชอบ
คำถามที่พบบ่อย
ผลิตภัณฑ์นี้มีวัตถุประสงค์เพื่อการวิจัยเท่านั้น และไม่ได้มีวัตถุประสงค์เพื่อใช้ในการรักษาหรือวินิจฉัยโรคในมนุษย์หรือสัตว์ ผลิตภัณฑ์และเนื้อหาได้รับการคุ้มครองโดยสิทธิบัตร เครื่องหมายการค้า และลิขสิทธิ์ที่เป็นของ
แอปพลิเคชั่นบางตัวอาจต้องใช้สิทธิ์ในทรัพย์สินทางปัญญาของบุคคลที่สามเพิ่มเติม