Hieff UNICON™ ColorGPS qPCR Master Mix (High Rox) เป็นสารละลายเบื้องต้นสำหรับการขยายสัญญาณ PCR เชิงปริมาณแบบเรียลไทม์ 2 เท่า ที่มีความเข้มของฟลูออเรสเซนต์สูง ความไวและความจำเพาะสูง และผลผลิตการขยายสัญญาณสูง ส่วนประกอบหลักคือ Hieff UNICON™ Taq DNA Polymerase ซึ่งเริ่มต้นอย่างรวดเร็วด้วยวิธีแอนติบอดี ซึ่งสามารถยับยั้งการขยายสัญญาณแบบไม่จำเพาะที่เกิดจากการอบไพรเมอร์ระหว่างการเตรียมตัวอย่างได้อย่างมีประสิทธิภาพ ในเวลาเดียวกัน สูตรจะเพิ่มปัจจัยเพื่อเพิ่มประสิทธิภาพการขยายสัญญาณของปฏิกิริยา PCR และตัวกระตุ้นเพื่อปรับให้การขยายสัญญาณของยีนที่มีเนื้อหา GC ต่างกัน (30~70%) เท่ากัน เพื่อให้ PCR เชิงปริมาณสามารถได้ความสัมพันธ์เชิงเส้นที่ดีในช่วงกว้างของภูมิภาคเชิงปริมาณ ผลิตภัณฑ์นี้ใช้ปฏิกิริยาเปลี่ยนสีผสมของสีย้อมต่าง ๆ เพื่อตรวจสอบการทำงานของการปิเปต ซึ่งช่วยลดการเกิดข้อผิดพลาดในการปิเปตได้อย่างมีประสิทธิภาพ

คุณสมบัติ

การติดตามการปิเปต: ลดความเสี่ยงของข้อผิดพลาดที่พลาด/การเพิ่มเติม

การขยายที่ยอดเยี่ยม: ความเป็นเส้นตรงที่ดีในช่วงเส้นตรงที่กว้าง

ความแม่นยำสูง: สามารถแยกแยะเทมเพลตได้อย่างแม่นยำด้วยความแตกต่างของความเข้มข้น 2 เท่า

ความสามารถในการทำซ้ำที่ดี: ความแปรปรวนระหว่างหลุมที่น้อยในหลุมจำลอง ส่งผลให้สามารถทำซ้ำได้ดีขึ้น

เสถียรและเชื่อถือได้: ระบบปฏิกิริยาสามารถเก็บไว้ที่อุณหภูมิห้องได้ 24 ชั่วโมง และผลิตภัณฑ์ยังคงไม่ได้รับผลกระทบหลังจากการแช่แข็งและละลาย 20 รอบ

แอปพลิเคชั่น

การวิเคราะห์ความแตกต่างของการแสดงออกของยีน

การวิเคราะห์เชิงปริมาณสัมบูรณ์

ข้อมูลจำเพาะ

ส่วนประกอบ

การขนส่งและการเก็บรักษา

ควรเก็บผลิตภัณฑ์นี้ไว้ที่ -25~-15℃ เป็นเวลา 1 ปี

ตัวเลข

รูปที่ 1 สามารถได้ผลลัพธ์ที่เชื่อถือได้ภายในช่วงไดนามิก

การใช้เทมเพลตพลาสมิด 2 µL ที่มีระดับความชัน 10^1-10^7 ทำให้ยีนที่เกี่ยวข้องได้รับการขยาย Hieff UNICON™ มาสเตอร์มิกซ์ ColorGPS สามารถตรวจจับช่วงปริมาณเทมเพลตได้อย่างมีประสิทธิภาพที่ระดับ 7 ลำดับขนาด โดยให้ความเป็นเส้นตรงที่ดีภายในช่วงเชิงเส้นที่กว้าง

รูป2. สามารถแยกแยะความแตกต่างของความเข้มข้นของเทมเพลตได้แม่นยำถึง 2 เท่า

การใช้พลาสมิด 2 µL ที่เจือจางแบบไล่ระดับ 2 เท่าเป็นแม่แบบ ยีนที่เกี่ยวข้องจะถูกขยาย Hieff UNICON™ มาสเตอร์มิกซ์ ColorGPS สามารถแก้ไขความแตกต่างของความเข้มข้นของเทมเพลตได้อย่างแม่นยำ

รูป3สังเกตเห็นความแปรปรวนระหว่างหลุมที่เล็ก แสดงให้เห็นถึงความสามารถในการทำซ้ำได้ดีกว่า

โดยใช้พลาสมิดหลายสิบชุดเป็นแม่แบบ การขยายพันธุ์จะดำเนินการโดยใช้รีเอเจนต์เรืองแสงเชิงปริมาณต่าง ๆ ตามขั้นตอนที่ระบุไว้ในคู่มือการใช้งานของแต่ละรีเอเจนต์ ค่า SD บ่งชี้ว่าเมื่อเทียบกับรีเอเจนต์ถอดรหัสย้อนกลับอื่น ๆ ผลิตภัณฑ์ใหม่นี้มีความแตกต่างระหว่างหลุมจำลองน้อยกว่าและมีความสามารถในการทำซ้ำได้ดีกว่า

รูป4. มีความยืดหยุ่นมากขึ้น เหมาะกับขั้นตอนมาตรฐานหรือแบบรวดเร็ว

ในขั้นตอนมาตรฐาน เวลาในการแยกโครงสร้างและเวลาขยายจะถูกตั้งเป็น 10 วินาทีและ 30 วินาทีตามลำดับ ในขณะที่ในขั้นตอนรวดเร็ว เวลาในการแยกโครงสร้างและเวลาขยายจะถูกตั้งเป็น 3 วินาทีและ 10 วินาทีตามลำดับ เพื่อตรวจจับค่า Ct ที่สอดคล้องกับยีนเป้าหมาย 10 ยีนผลการทดลองแสดงให้เห็นว่าค่า Ct ที่ได้จากผลิตภัณฑ์ใหม่ทั้งในขั้นตอนมาตรฐานและขั้นตอนด่วนมีความสัมพันธ์กันอย่างแน่นแฟ้น และผลิตภัณฑ์ใหม่สามารถให้ผลลัพธ์ที่ดีได้โดยใช้ขั้นตอนด่วน

รูป5. หลังจากที่เตรียมระบบปฏิกิริยาแล้ว สามารถคงความคงตัวที่อุณหภูมิห้องได้เป็นเวลา 24 ชั่วโมง

โดยใช้ยีนต่าง ๆ จากหนู เซลล์มนุษย์ 293 และ Arabidopsis thaliana เป็นเป้าหมาย หลังจากเตรียมระบบปฏิกิริยาแล้ว ระบบจะถูกวางไว้ในที่มืดที่อุณหภูมิต่างกันเป็นเวลา 24 ชั่วโมงก่อนการตรวจจับ เมื่อเปรียบเทียบกับการประมวลผลทันที ความแตกต่างของการตรวจจับสำหรับยีนต่าง ๆ จะไม่เกิน 0.5 Ct ซึ่งบ่งชี้ว่าสามารถได้ผลลัพธ์ที่เสถียรด้วยการดำเนินการระยะยาวได้เช่นกัน

เอกสาร:

คู่มือการใช้งาน

11190_คู่มือ_เวอร์ชั่นEN20241218.pdf