RNase HII คือเอนไซม์ภายในไรโบนิวคลีเอสที่ได้จาก ไพโรคอบิสซี และแสดงออกอย่างรีคอมบิแนนท์ใน อี.โคไลเอนไซม์ RNase HII ตรวจจับสายคู่ DNA-rN-DNA/DNA โดยตัดที่ตำแหน่งที่ไรโบนิวคลีโอไทด์ถูกผสมเข้ากับ DNA อย่างไรก็ตาม กิจกรรมของมันบน RNA สายเดี่ยวนั้นต่ำมาก และไม่มีกิจกรรมการตัดบน dsDNA หรือ ssDNA RNase HII ตัดที่ตำแหน่งของไรโบนิวคลีโอไทด์ที่เหลือจากปลาย 5' โดยสร้างกลุ่มฟอสเฟต 5' และปลายไฮดรอกซิล 3' หลังจากการตัด เอนไซม์ RNase HII นี้มีกิจกรรมที่เหมาะสมที่สุดที่อุณหภูมิ 70~75°C ทำงานได้ที่อุณหภูมิระหว่าง 50°C ถึง 75°C แต่มีกิจกรรมต่ำมากที่อุณหภูมิห้อง ผลิตภัณฑ์นี้มีความคงตัวทางความร้อนสูง โดยแทบจะไม่สูญเสียกิจกรรมหลังจากฟักที่อุณหภูมิ 95°C เป็นเวลา 45 นาที และเข้ากันได้กับระบบปฏิกิริยา PCR ต่างๆ

ข้อมูลจำเพาะ

ส่วนประกอบ

พื้นที่จัดเก็บ

ควรเก็บผลิตภัณฑ์นี้ไว้ที่ -25~-15℃ เป็นเวลา 2 ปี

การประยุกต์ใช้ผลิตภัณฑ์

1. การตรวจจับด้วย LAMP โดยใช้หัววัดความไวสูง
2. ปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรสแบบพึ่งพา RNase HII (rhPCR)
3. การกำจัดไรโบนิวคลีโอไทด์ที่ไม่ตรงกันซึ่งเกิดขึ้นระหว่างปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส
4. การสลายตัวของส่วน RNA ของชิ้นส่วนโอกาซากิ

หมายเหตุ

1. ผลิตภัณฑ์นี้ใช้เพื่อการวิจัยเท่านั้น
2. เพื่อความปลอดภัยของคุณ โปรดปฏิบัติงานโดยสวมเสื้อคลุมแล็บและถุงมือแบบใช้แล้วทิ้ง

ตัวเลข

1. อี.โคไล เศษดีเอ็นเอจีโนม < 0.5 สำเนา/100 หน่วย

การตรวจจับของ อี.โคไล พบว่าสารตกค้างของ DNA จีโนมในชุดต่างๆ ของ RNase HII แสดงให้เห็นว่าสารตกค้างของ DNA จีโนมของโฮสต์ Yeasenค่า RNase HII ของ 's อยู่ต่ำกว่า 0.5 สำเนา/100 U มาก

รูปที่ 4 การตรวจจับ อี.โคไล เศษดีเอ็นเอจีโนม

2. การทดสอบความทนทานต่อความร้อน 95°C

หลังจากให้ความร้อน RNase HII ที่อุณหภูมิ 95°C เป็นเวลา 0 ถึง 45 นาที ได้มีการทดสอบกิจกรรมเอนไซม์ของ RNase HII ผลการทดสอบระบุว่าแทบไม่มีการสูญเสียกิจกรรมเอนไซม์ใน YeasenRNase HII ยังคงสภาพดี แม้ผ่านการให้ความร้อนนานถึง 45 นาที

รูปที่ 5 การทดสอบความทนทานต่อความร้อน 95°C

3. ไม่มีสารตกค้างของเอ็กโซนิวคลีเอส เอ็นไซม์นิกกิ้ง หรือ RNase (โดส 1 ยู)

จากการฟัก RNase HII ในชุดต่างๆ จำนวน 1 หน่วยกับ DNA/RNA ซึ่งเป็นซับสเตรตตามลำดับที่อุณหภูมิ 37°C เป็นเวลา 4 ชั่วโมง ผลการวิเคราะห์อิเล็กโทรโฟรีซิสบนเจลอะกาโรสบ่งชี้ว่าไม่มีเอ็กโซนิวคลีเอส เอนไซม์นิกกิ้ง หรือสารตกค้าง RNase ใน RNase HII

รูปที่ 6 การตรวจหาเอนไซม์เอ็กโซนิวคลีเอส เอนไซม์นิกกิ้ง และสารตกค้าง RNase

เอกสาร:

คู่มือการใช้งาน