คำอธิบาย
Tth DNA Polymerase คือ DNA polymerase ที่ทนความร้อนซึ่งค้นพบจากแบคทีเรียที่ชอบความร้อน เทอร์มัส เทอร์โมฟิลัส HB8เอนไซม์นี้แสดงกิจกรรมของดีเอ็นเอโพลีเมอเรส 5′-3′ และกิจกรรมของเอ็กโซนิวคลีเอส 5′-3′ ในสภาวะที่มี Mg²⁺ แต่ขาดกิจกรรมของเอ็กโซนิวคลีเอส 3′-5′ ทำให้สามารถนำไปใช้ในปฏิกิริยาการขยาย PCR ได้อย่างกว้างขวาง ในสภาวะที่มี Mn²⁺ เอนไซม์จะแสดงกิจกรรมของทรานสคริปเทสย้อนกลับที่แข็งแกร่งที่อุณหภูมิ 55-70°C ทำให้เหมาะสำหรับปฏิกิริยา RT-PCR แบบขั้นตอนเดียว
ข้อมูลจำเพาะ
คำจำกัดความของหน่วย: กิจกรรมหนึ่งหน่วย (U) ถูกกำหนดให้เป็นปริมาณของเอนไซม์ที่รวมนิวคลีโอไทด์ทั้งหมด 10 nmol ลงในผลิตภัณฑ์ที่ไม่ละลายในกรดใน 30 นาทีที่ 74°C โดยใช้ DNA ของอสุจิปลาแซลมอนที่ถูกกระตุ้นเป็นเทมเพลต/ไพรเมอร์
ส่วนประกอบ
เลขที่ | ชื่อ | ขนาด | |
14607ES72 (250 ยู) | 14607ES80 (1250 อ) | ||
14607-ก | ทีทีดีเอ็นเอโพลีเมอเรส (5 U/μL) | 50 ไมโครลิตร | 250 ไมโครลิตร |
14607-ข | 5×RT-PCR ครั้งที่ 3 บัฟเฟอร์ | 1 มล. | 4×1.25 มล. |
14607-ค | 10×ทีทีพีซีอาร์ บัฟเฟอร์ (มี Mg2+) | 500 ไมโครลิตร | 2×1.25 มล. |
14607-ง | 50 มิลลิโมลาร์ (OAc)2 | 250 ไมโครลิตร | 1.25 มล. |
14607-อี | ส่วนผสม dNTP (10 mM ต่อชิ้น) | 150 ไมโครลิตร | 750 ไมโครลิตร |
การส่งสินค้า และการเก็บรักษา
การส่งสินค้าด้วยน้ำแข็งแห้ง เก็บไว้ ที่ -20°C อายุการเก็บรักษา 2 ปี
ข้อควรระวัง
1) หากมีตะกอนจำนวนเล็กน้อยปรากฏในบัฟเฟอร์เมื่อละลาย ถือเป็นปรากฏการณ์ปกติ โปรดพลิกกลับและผสมให้เข้ากันก่อนใช้งาน
2) เพื่อความปลอดภัยและสุขภาพของคุณ โปรดสวมเสื้อคลุมแล็บและถุงมือแบบใช้แล้วทิ้งในระหว่างการผ่าตัด
3) ผลิตภัณฑ์นี้ใช้เพื่อการวิจัยเท่านั้น!
คำแนะนำ
ขั้นตอนการทำปฏิกิริยา PCR ที่แนะนำ:
1.การเตรียมระบบปฏิกิริยา
ชื่อ | ปริมาณ (ไมโครลิตร- |
10×ทีทีพีซีอาร์ บัฟเฟอร์ (มี Mg2+) | 5 |
ทีทีดีเอ็นเอโพลีเมอเรส (5 U/μL) | 0.5 |
ส่วนผสม dNTP (10 mM ต่อชิ้น) | 1 |
ต้นน้ำ ไพรเมอร์ 10ไมโครโมลาร์ | 2 |
ปลายน้ำ ไพรเมอร์ 10ไมโครโมลาร์ | 2 |
แม่แบบดีเอ็นเอ | 50 หน้า- 1 ไมโครกรัม |
ดีดีเอช2โอ้ | ถึง 50 |
[หมายเหตุ]: ปริมาณของ Tth DNA Polymerase ไพรเมอร์ต้นน้ำและปลายน้ำ และส่วนผสม dNTP สามารถปรับเปลี่ยนได้ตามความต้องการเฉพาะของการทดลอง
2. การตั้งค่ารอบ
ขั้นตอน | อุณหภูมิ(ºC- | เวลา | วงจร |
การเตรียมการก่อนการแปลงสภาพ | 94 | 30 วินาที-5 นาที | 1 |
การเปลี่ยนแปลงสภาพธรรมชาติ | 94 | 30 วินาที |
35
|
การอบอ่อน | 50-70 | 30 วินาที | |
ส่วนขยาย | 72 | 60 วินาที/กิโลไบต์ | |
ส่วนขยายสุดท้าย | 72 | 10 นาที | 1 |
[หมายเหตุ]: เงื่อนไขปฏิกิริยาสามารถปรับได้ตามข้อกำหนดการทดลองที่เฉพาะเจาะจง
ขั้นตอนการตอบสนอง RT-PCR ที่แนะนำ:
1. การเตรียมระบบปฏิกิริยา
ชื่อ | ปริมาณ (ไมโครลิตร- |
5×RT-PCR ครั้งที่ 3 บัฟเฟอร์ | 10 |
ทีทีดีเอ็นเอโพลีเมอเรส (5 U/μL) | 1.5 |
50 มิลลิโมลาร์ แมกนีเซียม (โอเอซี)2 | 2.5 |
ส่วนผสม dNTP (10 mM ต่อชิ้น) | 1.5 |
ต้นน้ำ ไพรเมอร์ 10ไมโครโมลาร์ | 2 |
ปลายน้ำ ไพรเมอร์ 10ไมโครโมลาร์ | 2 |
เทมเพลต อาร์เอ็นเอ | 50 หน้า- 1 ไมโครกรัม |
ดีดีเอชทูโอ | ถึง 50 |
[หมายเหตุ]: ปริมาณของ Tth DNA Polymerase ไพรเมอร์ต้นน้ำและปลายน้ำ และส่วนผสม dNTP สามารถปรับเปลี่ยนได้ตามความต้องการเฉพาะของการทดลอง
2.การตั้งค่ารอบ
ขั้นตอน | อุณหภูมิ (ºC- | เวลา | วงจร |
การถอดความย้อนกลับ | 55-70 | 30 นาที | 1 |
ก่อนการเปลี่ยนสภาพธรรมชาติ | 94 | 30 วินาที-5 นาที | 1 |
การเปลี่ยนแปลงสภาพธรรมชาติ | 94 | 30 วินาที |
35
|
การอบอ่อน | 50-70 | 30 วินาที | |
ส่วนขยาย | 72 | 60 วินาที/กิโลไบต์ | |
ส่วนขยายสุดท้าย | 72 | 10 นาที | 1 |
[หมายเหตุ]: เงื่อนไขปฏิกิริยาสามารถปรับได้ตามข้อกำหนดการทดลองที่เฉพาะเจาะจง
การชำระเงินและความปลอดภัย
ข้อมูลการชำระเงินของคุณได้รับการดำเนินการอย่างปลอดภัย เราไม่เก็บรายละเอียดบัตรเครดิตและไม่สามารถเข้าถึงข้อมูลบัตรเครดิตของคุณได้
การสอบถาม
คุณอาจชอบ
คำถามที่พบบ่อย
ผลิตภัณฑ์นี้มีวัตถุประสงค์เพื่อการวิจัยเท่านั้น และไม่ได้มีวัตถุประสงค์เพื่อใช้ในการรักษาหรือวินิจฉัยโรคในมนุษย์หรือสัตว์ ผลิตภัณฑ์และเนื้อหาได้รับการคุ้มครองโดยสิทธิบัตร เครื่องหมายการค้า และลิขสิทธิ์ที่เป็นของ
แอปพลิเคชั่นบางตัวอาจต้องใช้สิทธิ์ในทรัพย์สินทางปัญญาของบุคคลที่สามเพิ่มเติม