คำอธิบาย
ไฮแฟร์™ Superior Universal Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus) เป็นชุดอุปกรณ์ PCR เชิงปริมาณแบบมัลติเพล็กซ์ที่ใช้ RNA เป็นแม่แบบ ในกระบวนการทดลอง จะมีการถอดรหัสย้อนกลับและ PCR เชิงปริมาณในหลอดเดียวกัน ซึ่งทำให้ขั้นตอนการทดลองง่ายขึ้นและลดความเสี่ยงต่อการปนเปื้อน
ในชุดนี้ cDNA สายแรกได้รับการสังเคราะห์อย่างมีประสิทธิภาพด้วย Hifair™ ที่ทนความร้อน ทรานสคริปเทสย้อนกลับและขยายเชิงปริมาณโดย UNICON™ HotStart Taq DNA Polymerase ชุดทดสอบประกอบด้วยบัฟเฟอร์ MP ที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมและเอนไซม์ผสม โดยสารละลายบัฟเฟอร์ประกอบด้วยแมกนีเซียมอยู่แล้ว2+ และ dNTP Mix นอกจากนี้ ยังเพิ่มปัจจัยที่สามารถยับยั้งการขยาย PCR แบบไม่จำเพาะได้อย่างมีประสิทธิภาพและปรับปรุงประสิทธิภาพการขยายของปฏิกิริยา qPCR หลายปฏิกิริยา ซึ่งสามารถรับประกันประสิทธิภาพการขยายและดำเนินปฏิกิริยาการขยายได้หลายปฏิกิริยา ระบบ dUTP/UDG ได้รับการเพิ่มเข้ามาเพื่อป้องกันความเสี่ยงของการปนเปื้อนของละอองลอยได้อย่างมีประสิทธิภาพ
คุณสมบัติ
คุณสมบัติ
1. จีความอเนกประสงค์ที่ยอดเยี่ยม- เหมาะสำหรับการขยาย qPCR และการตรวจจับกรดนิวคลีอิกของจุลินทรีย์ก่อโรค จีโนมของมนุษย์ พืช และสิ่งมีชีวิตชนิดอื่นๆ-
2. ความไวสูง- ระบบบัฟเฟอร์ที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมอย่างระมัดระวังช่วยเพิ่มความไวในการตรวจจับเทมเพลตที่มีความเข้มข้นต่ำได้สูงสุดถึง 250 สำเนา/มล.-
3. ระบบ dUP/UDG- ได้มีการนำระบบป้องกันมลพิษ UDG ที่ไม่เสถียรต่อความร้อน dUTP มาใช้เพื่อลดมลพิษจากละอองลอยในผลิตภัณฑ์อย่างมีประสิทธิภาพ ลดผลบวกปลอม และรับรองผลลัพธ์ที่แท้จริง-
4. สนับสนุนกำลังทำ โปรแกรมรวดเร็ว: รองรับโปรแกรมด่วน 40 นาที-
5. ความเสถียรสูง: เสถียรอี ที่อุณหภูมิ 37℃ เป็นเวลา 14 วัน ทำซ้ำ 10 ครั้งด้วยการแช่แข็งและละลาย
ข้อมูลจำเพาะ
ส่วนประกอบ หมายเลข | 16901อีเอส60 - 16901อีเอส80 / 16901ES92 |
ขนาด | 100 ต / 1,000 ที / 10000 ตัน |
ส่วนประกอบ
ชื่อ | 16901อีเอส60 (100ตัน) | 16901อีเอส80 (1,000ตัน) | 16901ES92 (10,000ตัน) | |
16901-ก | 500 ไมโครลิตร | 5 มล. | 50 มล. | |
16901-บี | ไฮแฟร์™ เอนไซม์ผสม | 100 ไมโครลิตร | 1 มล. | 10 มล. |
บันทึก- 1) 5×ไฮแฟร์™ MP Buffer คือคำย่อของ Hifair™ บัฟเฟอร์โพรบ RT-qPCR แบบขั้นตอนเดียวมัลติเพล็กซ์ที่เหนือกว่า ซึ่งรวมถึง dNTPs, dUTP, Mg2+, สารคงตัว และอื่นๆ
2) ไฮแฟร์™ เอนไซม์ผสม ส่วนใหญ่ประกอบไปด้วย ไฮแฟร์™ ทรานสคริปต์ย้อนกลับ, UNICON™ ฮอตสตาร์ท แทค ดีเอ็นเอ โพลีเมอรา, สารยับยั้งเอนไซม์ RNase, และ UDGase และอื่นๆ
พื้นที่จัดเก็บ
ควรเก็บผลิตภัณฑ์ที่อุณหภูมิ -25℃ ~ -15℃ เป็นเวลา 1 ปี ควรหลีกเลี่ยงการแช่แข็งและละลายซ้ำๆ
คำแนะนำ
ปริมาณ -ไมโครลิตร) | ความเข้มข้นขั้นสุดท้าย | |
5×ไฮแฟร์™ บัฟเฟอร์ MP | 5 | 1× |
ไฮแฟร์™ เอนไซม์ผสม | 1 | - |
ไพรเมอร์มิกซ์ (10 μM) | 0.4 อันละ | 0.16 ไมโครโมลาร์ |
โพรบมิกซ์ (10 μM) | 0.2 อันละ | 0.08 ไมโครโมลาร์ |
1-5 | - | |
อาร์เอ็นเอส ฟรี เอช2โอ้ | ถึง 25 | - |
1. ส่วนประกอบของปฏิกิริยา:
บันทึก-ต้องแน่ใจว่าผสมให้เข้ากันก่อนใช้ หลีกเลี่ยงฟองอากาศมากเกินไปที่เกิดจากการสั่นอย่างรุนแรง
เอ) ความเข้มข้นของไพรเมอร์: ไพรเมอร์ ผสมรวมไพรเมอร์มัลติเพล็กซ์ ขึ้นอยู่กับสถานการณ์ ความเข้มข้นของไพรเมอร์ที่เหมาะสมอาจอยู่ระหว่าง 0.1 ถึง 1.0 μM
บี) ความเข้มข้นของโพรบ: การผสมโพรบรวมถึงการติดฉลากโพรบแบบมัลติเพล็กซ์ของกลุ่มฟลูออเรสเซนต์ โดยขึ้นอยู่กับสถานการณ์ ความเข้มข้นของโพรบที่เหมาะสมที่สุดอาจอยู่ระหว่าง 0.05 ถึง 05 ไมโครโมลาร์
ซี) การเจือจางเทมเพลต: qPCR มีความไวสูงและแนะนำให้เจือจางเทมเพลต ค่า Ct ควบคุมเหมาะสมระหว่าง 20 ถึง 35
ง) การเตรียมระบบ: ถอดหัวกรองออก หลีกเลี่ยงการปนเปื้อนข้ามและการปนเปื้อนของละอองลอย
2. โปรโตคอลการปั่นจักรยานที่ได้รับการปรับให้เหมาะสม
(1) ขั้นตอนการขยายเสียงมาตรฐาน
ระยะปฏิกิริยา | อุณหภูมิ | เวลา | วงจร | |
1 | การถอดความย้อนกลับ | 50 องศาเซลเซียสเอ | 1 | |
2 | การเปลี่ยนสภาพเบื้องต้น | 95 องศาเซลเซียส | 5 นาที | 1 |
3 | ปฏิกิริยาการขยาย | 95 องศาเซลเซียส | 15 วินาที | 45 รอบ |
60 องศาเซลเซียสบี | 30 วินาทีซี |
บันทึก-
ก) การถอดเสียงย้อนกลับ: สามารถเลือกอุณหภูมิได้ 50°C หรือ 55องศาเซลเซียส ประมาณ 10-15 นาที-
ข) ปฏิกิริยาการขยาย: อุณหภูมิจะถูกปรับตามค่า Tm ของไพรเมอร์ที่ออกแบบไว้
ค) การรับสัญญาณฟลูออเรสเซนต์ : กรุณากำหนดขั้นตอนการทดลองให้เป็นไปตามข้อกำหนดของ อุปกรณ์ คู่มือ-
(2) โปรแกรมขยายเสียงอย่างรวดเร็ว
| ระยะปฏิกิริยา | อุณหภูมิ | เวลา | วงจร |
1 | การถอดความย้อนกลับ | 50 องศาเซลเซียส | 5 นาที | 1 |
2 | การเปลี่ยนสภาพเบื้องต้น | 95 องศาเซลเซียส | 30 วินาที | 1 |
3 | ปฏิกิริยาการขยาย | 95 องศาเซลเซียส | 5 วินาที | 45 รอบ |
60 องศาเซลเซียส | 20 วินาที |
บันทึก-หากเครื่องตรวจจับ qPCR จริงรองรับการขยายอย่างรวดเร็ว โปรดทำการทดสอบล่วงหน้าเพื่อยืนยัน
3. อุปกรณ์การใช้งาน
เอบีไอ 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT เร็ว, StepOne™, StepOne Plus™-ABI 7500, 7500 Fast, ViiA™7, QuantStudio™ 3 และ 5, QuantStudio™ 6,7, 12k Flex-
สตราเทเจเน MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™-
ไบโอ-ราด CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™, iQ™5, MyiQ™, MiniOpticon™, Opticon®, Opticon® 2, Chromo4™-
เอพเพนดอร์ฟ Mastercycler® ep realplex, realplex 2 s;
คิอาเก้น คอร์เบตต์ โรเตอร์-ยีน® คิว, โรเตอร์-ยีน® 3000, โรเตอร์-ยีน® 6000-
โรช วิทยาศาสตร์ประยุกต์ LightCycler® 480, LightCycler® 2.0; Lightcycler® 96-
เทอร์โม เครื่องปั่นจักรยาน PikoReal ทางวิทยาศาสตร์ เซเฟอิด สมาร์ทไซเคลอร์®- อิลลูมิน่า อีโค คิวพีซีอาร์ สแลน 96เอส, 96พี.
หมายเหตุ
โปรดสวมอุปกรณ์ป้องกันส่วนบุคคลที่จำเป็น เช่น เสื้อคลุมแล็บและถุงมือ เพื่อให้แน่ใจว่าสุขภาพและความปลอดภัยของคุณ-
กรุณาใช้วัสดุสิ้นเปลือง RNasefree สำหรับ การทดลอง
ผลิตภัณฑ์นี้มีไว้สำหรับ วิจัย ใช้เฉพาะ-
การชำระเงินและความปลอดภัย
ข้อมูลการชำระเงินของคุณได้รับการดำเนินการอย่างปลอดภัย เราไม่เก็บรายละเอียดบัตรเครดิตและไม่สามารถเข้าถึงข้อมูลบัตรเครดิตของคุณได้
การสอบถาม
คุณอาจชอบ
คำถามที่พบบ่อย
ผลิตภัณฑ์นี้มีวัตถุประสงค์เพื่อการวิจัยเท่านั้น และไม่ได้มีวัตถุประสงค์เพื่อใช้ในการรักษาหรือวินิจฉัยโรคในมนุษย์หรือสัตว์ ผลิตภัณฑ์และเนื้อหาได้รับการคุ้มครองโดยสิทธิบัตร เครื่องหมายการค้า และลิขสิทธิ์ที่เป็นของ
แอปพลิเคชั่นบางตัวอาจต้องใช้สิทธิ์ในทรัพย์สินทางปัญญาของบุคคลที่สามเพิ่มเติม