ไฮฟ์ เอ็นจีเอส^{ทีเอ็ม} UCF.ME ลูกปัดคัดเลือก DNA จะถูกเตรียมขึ้นตามหลักการ SPRI (Solid Phase Reverse Immobilization) และใช้ได้กับการทำให้บริสุทธิ์ของ DNA และการเลือกขนาดในระหว่างการเตรียมไลบรารีการจัดลำดับรุ่นถัดไป (NGS) Hieff NGS^{ทีเอ็ม} UCF.ME ลูกปัดคัดเลือก DNA เข้ากันได้กับชุดเตรียมไลบรารี DNA และ RNA ต่างๆ ผลิตภัณฑ์นี้ผลิตขึ้นในโรงงานที่สะอาดเป็นพิเศษและมีระดับความสะอาดสูง และสามารถใช้สำหรับขั้นตอนการทำให้ DNA บริสุทธิ์ระหว่างกระบวนการตรวจจับเชื้อโรค

ข้อมูลจำเพาะ

ส่วนประกอบ

พื้นที่จัดเก็บ

ผลิตภัณฑ์นี้ควรเก็บไว้ที่ 2-8℃ เป็นเวลา 18 เดือน

การขนส่งและการเก็บรักษา

ลูกปัดจะถูกจัดส่งพร้อมกับถุงน้ำแข็งและสามารถเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 2°C-8°C ได้นานหนึ่งปี

คำแนะนำ

• 1. การเตรียมพร้อม

ให้ปรับสมดุลลูกปัดคัดแยกที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลาอย่างน้อย 30 นาที ก่อนใช้งาน

• 2. การเลือกขนาด DNA

ขั้นตอนการดำเนินการเลือกขนาดแสดงอยู่ในรูปที่ 1 และโปรโตคอลเป็นดังต่อไปนี้

รูปที่ 1 แผนผังขั้นตอนการเลือกขนาด DNA

2.1 ผสมลูกปัดให้เข้ากันด้วยการเขย่าหรือปิเปตขึ้นลงทุกครั้งก่อนใช้งาน
2.2 เติมลูกปัดคัดเลือกรอบแรกลงในตัวอย่าง (ดูตารางที่ 1) ผสมให้เข้ากันโดยใช้เครื่องวอร์เท็กซ์หรือปิเปตขึ้นลงอย่างน้อย 10 ครั้ง
2.3 ฟักที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 5 นาที
2.4 หมุนหลอดลงสักครู่แล้ววางบนฐานแม่เหล็ก เมื่อสารละลายใส (ประมาณ 5 นาที) ให้ย้ายส่วนที่เป็นของเหลวใสกว่าลงในหลอด PCR หลอดใหม่
2.5 เติมลูกปัดคัดรอบที่ 2 ลงในตัวอย่างจากขั้นตอน 2.4 ตามตารางที่ 1 ผสมให้เข้ากันโดยใช้การเขย่าหรือปิเปตขึ้นและลงอย่างน้อย 10 ครั้ง
2.6 ฟักที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 5 นาที
2.7 หมุนหลอดลงสักครู่แล้ววางบนฐานแม่เหล็ก เมื่อสารละลายใส (ประมาณ 5 นาที) ให้ดูดของเหลวส่วนบนออกแล้วทิ้งไป
2.8 วางหลอดทดลองบนฐานแม่เหล็ก แล้วเติมเอธานอล 80% ที่เตรียมใหม่ 200 μL ลงไป โดยไม่รบกวนลูกปัด ฟักที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 30 วินาที ดูดเอธานอลออกแล้วทิ้งไป
2.9 ทำซ้ำขั้นตอน 2.8 หนึ่งครั้งเพื่อซักรวมสองครั้ง
2.10 กำจัดเอธานอลที่เหลือด้วยปลายปิเปตขนาด 10 µL วางหลอดทดลองบนขาตั้งแม่เหล็ก ปล่อยให้ลูกปัดที่เลือกแห้งโดยเปิดฝาทิ้งไว้จนกระทั่งมีรอยแตกร้าวปรากฏขึ้น (ประมาณ 5 นาที)
หมายเหตุ: อย่าทำให้ลูกปัดที่เลือกแห้งเกินไป เพราะอาจทำให้เป้าหมาย DNA ที่ได้รับการฟื้นฟูลดลง
2.11 ถอดหลอดออกจากฐานแม่เหล็ก เติม ddH2O (≥20 µL) ในปริมาณที่เหมาะสม และผสมให้เข้ากันโดยใช้เครื่องวอร์เท็กซ์หรือปิเปตขึ้นลงอย่างน้อย 10 ครั้ง
2.12 ฟักที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 5 นาที
หมุนหลอดลงสักครู่แล้ววางบนฐานแม่เหล็ก เมื่อสารละลายใส (ประมาณ 5 นาที) ให้ถ่ายของเหลวส่วนบน 20 μL ลงในหลอดใหม่

• 3.เงื่อนไขที่แนะนำสำหรับการเลือกขนาด DNA

ดีเอ็นเอจากต่อมไทมัสของลูกวัวถูกแบ่งส่วนโดยใช้คลื่นเสียงความถี่สูงเพื่อเตรียมชิ้นส่วนขนาด 100-1,000 คู่เบส และทำการคัดเลือกขนาดสองรอบตามตารางที่ 1 จากนั้นวิเคราะห์ผลลัพธ์โดยใช้เครื่อง Agilent 2100 Bioanalyzer (รูปที่ 2)

ตารางที่ 1 เงื่อนไขที่แนะนำสำหรับการเลือกขนาด DNA

หมายเหตุ: "×" ในตารางระบุปริมาตรของตัวอย่าง DNA ตัวอย่างเช่น หากความยาวของส่วนที่แทรกในคลังข้อมูลคือ 250 bp และปริมาตรของตัวอย่าง DNA คือ 100 μL ปริมาตรของลูกปัดแม่เหล็กที่ใช้ในการคัดแยกรอบแรกคือ 0.80×100 μL=80 μL ปริมาตรของลูกปัดแม่เหล็กที่ใช้ในการคัดแยกรอบที่สองคือ 0.20×100 μL=20 μL

รูปที่ 2 อิเล็กโทรเฟอโรแกรมของชิป DNA ความไวสูง Agilent 2100