เจลโพลีอะคริลาไมด์ (เจล PAGE) มักใช้สำหรับการวิเคราะห์โปรตีนด้วยอิเล็กโทรโฟรีซิสเพื่อแยกโปรตีน เจลประเภทนี้มักประกอบด้วยเจลเข้มข้นและเจลแยก เจลโพลีอะคริลาไมด์ทำหน้าที่แยกโปรตีนตัวอย่างที่มีความเข้มข้น ในขณะที่เจลโพลีอะคริลาไมด์ทำหน้าที่แยกโปรตีนที่มีขนาดต่างกันตามความเข้มข้นของโมโนเมอร์อะคริลาไมด์และสารเชื่อมขวาง N,N-เมทิลีนบิสอะคริลาไมด์ (เมทิลีนอะคริลาไมด์) ที่ใช้ในเจล

ชุดอุปกรณ์นี้มีสารเคมีหลากหลายชนิดที่จำเป็นสำหรับการเตรียมเจล PAGE อย่างรวดเร็ว ผู้ใช้เพียงแค่เตรียมอุปกรณ์เตรียมเจลของตนเองเพื่อเตรียมเจล ซึ่งช่วยลดความยุ่งยากของกระบวนการเตรียมเจลได้อย่างมาก เจลที่เตรียมโดยชุดอุปกรณ์นี้ใช้สำหรับการทำลายโครงสร้างด้วยวิธีอิเล็กโทรโฟรีซิสเจล PAGE เท่านั้น ข้อกำหนดนี้สามารถเตรียมเจลขนาดเล็กได้ประมาณ 125 ชิ้น (คำนวณจากเจลหนา 0.75 มม.)

ข้อมูลจำเพาะ

ส่วนประกอบ

การขนส่งและการเก็บรักษา

สินค้าจัดส่งพร้อมถุงน้ำแข็งและสามารถเก็บไว้ได้ 2℃~8℃ เป็นเวลา 1 ปี.

คำแนะนำ: ขอแนะนำว่าไม่ควรใส่เจลหลายชิ้นเกินไปในคราวเดียว เพื่อหลีกเลี่ยงการเติมสารละลายด้านบนช้าเกินไป (แนะนำให้ใส่ 2-3 ชิ้นสูงสุด)

1. เลือกความเข้มข้นของเจลที่เหมาะสมตามน้ำหนักโมเลกุลของโปรตีนเป้าหมาย (ดูตารางที่ 1)

2.ขั้นตอนการทำเจล (ใช้เจลมินิขนาด 0.75/1.0/1.5 มม. เป็นตัวอย่าง)

2.1 นำบัฟเฟอร์เจลแยกและสารละลายเจลแยกปริมาณเท่ากันมาผสมกัน โดยใช้สารละลายทั้งสองอย่างในอัตราส่วน 2.0/2.7/4.0 มิลลิลิตร ตามลำดับ

2.2 ชั่งแอมโมเนียมเปอร์ซัลเฟต 0.1 กรัม แล้วละลายในน้ำดีไอออนไนซ์ 1 มิลลิลิตร ลูกค้าต้องซื้อแอมโมเนียมเปอร์ซัลเฟตเอง

2.3 เติม APS 35/45/70 μL ลงในสารละลายที่ผสมในขั้นตอนที่ 1 (สามารถลดปริมาณ APS ที่ใช้ลงครึ่งหนึ่งได้ หากการแข็งตัวเร็วเกินไป) และผสมให้เข้ากัน

2.4 ฉีดสารละลายในขั้นตอนที่ 2 ลงในแผ่นแก้วสำหรับทำเจล โปรดทราบว่าเจลเข้มข้นจะต้องฉีดเข้าไปในแม่พิมพ์เจลภายใน 2 นาทีหลังจากเติมเจลแยก และควรเทเจลเข้มข้นช้าๆ เพื่อป้องกันไม่ให้เจลเข้มข้นและเจลแยกผสมกัน หากบุคคลพบว่าการกำหนดค่าทำได้ยาก ก็สามารถปรับให้กำหนดค่าเจลเข้มข้นได้หลังจากปิดผนึกด้วยเอธานอล

2.5 การเตรียมเจลเข้มข้น: นำบัฟเฟอร์เจลเข้มข้นและสารละลายเจลเข้มข้นในปริมาตรเท่ากัน กล่าวคือ นำสารละลายทั้งสองอย่างในอัตรา 0.5/0.75/1.0 มล. ตามลำดับ จากนั้นเติม APS ปริมาณ 10/13/18 μL แล้วผสมให้เข้ากัน

2.6 ฉีดเข้าในแผ่นแก้วทำเจล และสอดฟันหวีเข้าไป (อย่าใช้แรงมากเกินไปในการสอดฟันหวีเข้าไปอย่างเบามือ)

2.7 หลังจากเจลเข้มข้นแข็งตัวเป็นเวลา 15 นาที สามารถถอดซี่หวีออกและนำไปใช้สำหรับการวิเคราะห์ด้วยไฟฟ้า หมายเหตุ: โปรดพยายามใช้บัฟเฟอร์การวิเคราะห์ด้วยไฟฟ้าที่เตรียมขึ้นใหม่

หมายเหตุ

1. แนะนำว่าแรงดันไฟฟ้าระหว่างการทำอิเล็กโทรโฟเรซิสควรอยู่ระหว่าง 100-120 V หากจำเป็นต้องเร่งความเร็วในการทำอิเล็กโทรโฟเรซิส ก็สามารถเพิ่มเป็น 150 V ได้

2. ก่อนที่จะเติมเจล ตรวจสอบให้แน่ใจว่าได้ปรับสมดุลสารละลายเจลให้มีอุณหภูมิห้อง (เช่น เก็บไว้เป็นเวลาหลายนาที) เพื่อหลีกเลี่ยงการเกิดฟองอากาศในเจลได้อย่างมีประสิทธิภาพ

3. ลูกค้าต้องซื้อแอมโมเนียมเปอร์ซัลเฟตเอง เราแนะนำให้ใช้ผลิตภัณฑ์ที่มี Cat#A3678 จาก Sigma

4. ปริมาณสารละลายแอมโมเนียมเปอร์ซัลเฟตเป็นเพียงข้อมูลอ้างอิงเท่านั้น และปริมาณจริงอาจเพิ่มขึ้นหรือลดลงตามนิสัยและประสบการณ์ในการทดลองส่วนบุคคล การเติมแอมโมเนียมเปอร์ซัลเฟตเพิ่มเติมสามารถเร่งความเร็วของเจลได้ และในทางกลับกัน อัตราการแข็งตัวของเจล PAGE สัมพันธ์อย่างใกล้ชิดกับอุณหภูมิและปริมาณแอมโมเนียมเปอร์ซัลเฟต

5. มีการเติมสารทดแทน TEMED ในปริมาณที่เหมาะสมลงในผลิตภัณฑ์นี้ หากจำเป็นต้องเร่งความเร็วของเจลเพิ่มเติม สามารถเติม TEMED ในปริมาณที่เหมาะสมตามต้องการก่อนจ่าย

6. มีความสัมพันธ์เชิงบวกอย่างมีนัยสำคัญระหว่างการแข็งตัวของเจลและอุณหภูมิ ภายใต้เงื่อนไขเดียวกัน ยิ่งอุณหภูมิสูงขึ้น ความเร็วในการแข็งตัวก็จะยิ่งเร็วขึ้น

7.เจลสีเข้มข้นอาจเกิดการตกตะกอนเล็กน้อยระหว่างการจัดเก็บ ซึ่งถือเป็นปรากฏการณ์ปกติ โปรดอย่าลังเลที่จะใช้

8. APS ถูกเก็บไว้ที่ -20℃เพื่อความสะดวก APS ที่ได้เปิดและใช้งานอยู่สามารถเก็บไว้ที่ 4℃-

9. โปรดสวมอุปกรณ์ป้องกันส่วนบุคคลที่จำเป็น เช่น เสื้อคลุมแล็บและถุงมือ เพื่อให้แน่ใจว่าสุขภาพและความปลอดภัยของคุณ-

10. เพื่อการวิจัยเท่านั้น!

ตารางที่ 1 ช่วงการแยกอ้างอิงของเจล SDS-PAGE ที่ความเข้มข้นต่างกัน

เอกสาร:

เอกสารข้อมูลความปลอดภัย

20324-A-MSDS-CN20250110

20324-B-MSDS-CN20250110

20324-ซี-MSDS-CN20250110

20324-ดี-MSDS-CN20250110

คู่มือการใช้งาน

20324_คู่มือ_HB230113_EN

การอ้างอิง & เอกสารอ้างอิง:

[1] Chen X, Zhang D, Su N และคณะ การสร้างภาพไดนามิกของ RNA ในเซลล์ที่มีชีวิตด้วย RNA เรืองแสงที่สว่างและเสถียร Nat Biotechnol. 2019;37(11):1287-1293 ดอย:10.1038/s41587-019-0249-1(IF:31.864)