ชุด Enhanced ECL Chemiluminescent Substrate Kit ออกแบบมาเพื่อตรวจจับแอนติบอดีและแอนติเจนที่เกี่ยวข้องที่ติดฉลากด้วยเอนไซม์ฮอร์สแรดิชเปอร์ออกซิเดส (HRP) โดยตรงหรือโดยอ้อม หลักการของชุด Enhanced ECL Chemiluminescent Substrate Kit คือ โปรตีนหรือกรดนิวคลีอิกถูกถ่ายโอนไปยังเมมเบรนที่พิมพ์แล้วหลังจากการวิเคราะห์ด้วยอิเล็กโทรโฟเรซิส และโปรตีนเป้าหมายบนเมมเบรนจะถูกจับด้วยแอนติบอดีปฐมภูมิและแอนติบอดีทุติยภูมิที่ติดฉลากด้วย HRP หรือกรดนิวคลีอิกบนเมมเบรนจะถูกจับโดยตรงหรือโดยอ้อมด้วยโพรบที่ติดฉลากด้วย HRP หลังจากล้างเมมเบรนแล้ว สารละลายทำงาน ECL ที่เตรียมโดยผลิตภัณฑ์จะถูกใช้ในการฟักเมมเบรนที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลาหลายนาที เมมเบรนที่พิมพ์แล้วจะถูกห่อด้วยพลาสติกแรปและติดเข้ากับตลับฉายรังสีเอกซ์ จากนั้นกดฟิล์มเอกซ์เรย์ลงบนเมมเบรนในห้องมืดและฉายแสงเป็นเวลาหลายวินาทีถึงหลายชั่วโมง หลังจากการพัฒนาและการตรึงแล้ว แถบโปรตีนหรือกรดนิวคลีอิกจะปรากฏอย่างชัดเจนบนฟิล์มเอกซ์เรย์

ชุดนี้มีระบบสารตั้งต้นเรืองแสงเฉพาะตัวซึ่งช่วยลดการเปิดรับแสงพื้นหลังในขณะที่แนะนำสารออกซิแดนท์ใหม่ซึ่งช่วยเพิ่มความเสถียรของชุดได้อย่างมาก ทำให้ชุดมีเสถียรภาพที่อุณหภูมิห้องได้นานถึงหนึ่งปี นอกจากเอกซเรย์แล้ว การสแกน CCD เรืองแสงยังใช้โดยตรงได้โดยเฉพาะสำหรับการตรวจจับ WB และระบบตรวจจับภูมิคุ้มกันเคมีเรืองแสง

คุณสมบัติ

ความไวสูงและอัตราส่วนสัญญาณต่อสัญญาณรบกวนสูง สามารถตรวจจับแอนติเจนระดับกลางได้

ส่องสว่างอย่างรวดเร็วและสดใส สามารถมองเห็นแถบฟิล์มที่พิมพ์ได้ภายใต้หลอดไฟฟลูออเรสเซนต์

เหมาะเป็นพิเศษสำหรับการตรวจจับความอุดมสมบูรณ์ของเป้าหมายที่สูงกว่าตัวอย่างโปรตีนแบบเดิม

สารออกซิไดเซอร์ใหม่ มีความคงตัวที่อุณหภูมิห้องได้นานถึงหนึ่งปี

แอปพลิเคชั่น

เคมีเรืองแสง ELISA

เวสเทิร์นบล็อต

ด็อตบล็อต-ดีเอ็นเอ/อาร์เอ็นเอ

ดีเอ็นเอบล็อตใต้

นอร์เทิร์นบล็อต-อาร์เอ็นเอ

ข้อมูลจำเพาะ

ส่วนประกอบ

การขนส่งและการเก็บรักษา

สินค้าจัดส่งที่อุณหภูมิห้อง สามารถเก็บได้ 1 ปี หากไม่ได้ใช้เป็นเวลานาน แนะนำให้เก็บที่อุณหภูมิห้อง 2℃~8℃ เพื่อขยายระยะเวลาการใช้งาน

หมายเหตุ : 36222-A ควรเก็บให้ห่างจากแสง!

คำแนะนำ (เช่น ฟิล์มเอกซเรย์)

1. การวิเคราะห์ทางอิเล็กโทรโฟรีซิสตามปกติ เมมเบรนถ่ายโอน แอนติบอดีที่ติดฉลากด้วย HRP หรือโพรบกรดนิวคลีอิกที่ติดฉลากด้วย HRP การฟักและล้างเมมเบรน

หมายเหตุ: สารละลายเรืองแสง ECL เป็นสารตั้งต้นสีของ HRP ดังนั้นระบบตรวจจับจะต้องใช้แอนติบอดีที่ติดฉลากเอนไซม์ HRP หรือโพรบกรดนิวคลีอิก

2. ในเวลาเดียวกันกับการล้างเมมเบรนเป็นครั้งสุดท้าย ให้เตรียมสารละลายเรืองแสงที่สดใหม่ (สารละลายเรืองแสง 100-200 μL ต่อเมมเบรน cm2) : ใช้รีเอเจนต์ A และ B ปริมาตรเท่ากัน ผสมให้เข้ากันเพื่อใช้ในภายหลัง

หมายเหตุ: ควรใช้น้ำยา A และน้ำยา B ต่างกัน แนะนำให้ใช้น้ำยาทำงานทันที น้ำยาทำงานยังสามารถใช้งานได้หลังจากผ่านไปสองสามชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง แต่ความไวจะลดลงเล็กน้อย

3.ใช้แหนบปากแบนเพื่อนำแผ่นเมมเบรนออก วางบนกระดาษกรองเพื่อสะเด็ดโลชั่น อย่าให้แผ่นเมมเบรนแห้งสนิท จุ่มแผ่นเมมเบรนลงในสารละลายเรืองแสงให้ทั่ว โดยให้สัมผัสกับของเหลวเรืองแสงในปริมาณที่เพียงพอ ฟักที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 1-2 นาที และเตรียมสำหรับการฉายแท็บเล็ตทันที

4.ใช้แหนบหยิบเมมเบรนขึ้นมาแล้ววางบนกระดาษกรองเพื่อระบายของเหลวเรืองแสงออก แต่ห้ามล้างของเหลวเรืองแสงออก

5. วางแผ่นพลาสติกห่อที่ใหญ่กว่าเมมเบรนบนพื้นผิวด้านในของฟิล์มออบสคูราเอกซเรย์ ติดเมมเบรนที่พิมพ์ลงบนฟิล์มห่อ พับฟิล์มห่อให้รอบเมมเบรนที่พิมพ์ทั้งหมด แล้วเอาฟองอากาศออกแล้วพับ จากนั้นตัดขอบฟิล์มห่อที่เกินออก ใช้กระดาษกรองดูดของเหลวทำงานเรืองแสงส่วนเกินออก ติดฟิล์มห่อที่ปิดเมมเบรนที่พิมพ์ไว้ในออบสคูราด้วยเทป โดยให้แถบโปรตีนหันขึ้นด้านบน

6. นำแผ่นฟิล์มเอกซเรย์ออกจากห้องมืดแล้ววางบนแผ่นฟิล์มที่หุ้มไว้ กดฟิล์มและฉายแสงเป็นเวลา 30 วินาทีถึง 2 นาที จากนั้นล้างฟิล์มและตรึงฟิล์ม

หมายเหตุ: ควรปรับเวลาในการรับแสงตามความเข้มข้นของแสงหากพื้นหลังสูงเกินไป ให้ใช้ฟิล์มเอกซเรย์ 2 แผ่นในเวลาเดียวกัน

วิธีการรับแสงอื่น ๆ

หากใช้การถ่ายภาพ CCD: สามารถวางเมมเบรนไว้ในของเหลวทำงาน หลังจากบูตเครื่องตามคำแนะนำการใช้งาน ให้ลอกฟิล์มออก ถ่ายภาพ นอกจากนี้ พารามิเตอร์การวัดของเครื่องยังสามารถปรับเปลี่ยนได้ตามสถานการณ์เพื่อปรับปรุงอัตราส่วนสัญญาณต่อสัญญาณรบกวน

หมายเหตุ

1. ควรหลีกเลี่ยงการเกิดฟองอากาศในการถ่ายโอนเมมเบรน การปิดผนึก และการฟักไข่ นอกจากนี้ การสวมถุงมือจะช่วยหลีกเลี่ยงการทิ้งรอยนิ้วมือบนเมมเบรนและช่วยให้เมมเบรนสะอาด

2. การเปิดรับแสงเป็นเวลานานหรือโปรตีนมากเกินไปจะทำให้พื้นหลังเข้มขึ้นและทำให้การเปลี่ยนแปลงของความเข้มของแถบสูญเสียความสัมพันธ์เชิงเส้น การเปิดรับแสงน้อยเกินไปจะทำให้แถบเบลอ

3. พลาสติกห่อบางชนิดอาจทำให้การเรืองแสงดับลงเมื่อห่อเมมเบรนที่พิมพ์ไว้ ควรเลือกใช้พลาสติกห่อคุณภาพสูง

4. หลีกเลี่ยงการวางเมมเบรนหลายแผ่นในกล่องเมมเบรนซักเดียวกัน เนื่องจากการดูดซับหรือการเสียดสีกันอาจทำให้เกิดพื้นหลังที่ลึกได้

5. สามารถระบุตำแหน่งและขนาดของแถบบนฟิล์มได้อย่างแม่นยำโดยใช้เครื่องหมายโปรตีนที่มองเห็นได้และแท็กการเปิดรับแสงฟลูออเรสเซนต์-ออโตราดิโอแกรม

6. ใช้ระบบไบโอติน-อะวิดิน และหลีกเลี่ยงการใช้การปิดนมซึ่งอาจทำให้พื้นหลังสูงเกินไป

7. อนุภาคออกไซด์ของโลหะอาจทำให้เกิดจุดเล็กๆ บนเมมเบรน หลีกเลี่ยงการใช้กรรไกรและแหนบที่เป็นสนิม ให้ใช้แหนบแบนพลาสติก

8. โซเดียมอะไซด์ (NaN3) สามารถยับยั้งการทำงานของ HRP ได้ หากการกู้คืนโพรบหรือแอนติบอดีที่ติดฉลาก HRP ควรหลีกเลี่ยงการใช้ NaN3 หากจำเป็น ไม่เกิน 0.01%

9. ผลิตภัณฑ์นี้ไม่มีพิษพิเศษ ตามการบำบัดด้วยสารเคมีทั่วไป

10. โปรดสวมอุปกรณ์ป้องกันส่วนบุคคลที่จำเป็น เช่น เสื้อคลุมแล็บและถุงมือ เพื่อให้แน่ใจว่าสุขภาพและความปลอดภัยของคุณ-

11. เพื่อการวิจัยเท่านั้น!

เอกสาร:

เอกสารข้อมูลความปลอดภัย

36222-A-MSDS-CN20250110

36222-B-MSDS-CN20250110

คู่มือการใช้งาน

36222_คู่มือ_HB221212_EN

การอ้างอิง & เอกสารอ้างอิง:

[1] He X, Li J, Zhou G และคณะ การกำหนดประตูจังหวะฮิปโปแคมปัสและความจำโดยความยืดหยุ่นของซินแนปส์ในอินเตอร์นิวรอนยับยั้ง Neuron. 2021;109(6):1013-1028.e9. doi:10.1016/j.neuron.2021.01.014(IF:17.173)

-2- Wang X, Zhang S, Jin D และคณะ ตัวกระตุ้นตัวรับ μ-opioid อำนวยความสะดวกในการสร้างเซลล์เนื้องอกที่หมุนเวียนในมะเร็งกระเพาะปัสสาวะผ่านทางเส้นทาง MOR/AKT/Slug: การศึกษาวิจัยที่ครอบคลุมรวมถึงการทดลองที่มีการควบคุมแบบสุ่มCancer Commun (Lond). 2023;43(3):365-386. doi:10.1002/cac2.12408(IF:16.2)

-3- Li Y, Zhou S, Song H, Yu T, Zheng X, Chu Q. อนุภาคนาโน CaCO3 ที่ผสมกับ KAE เพื่อให้สามารถขยายการบำบัดมะเร็งด้วยแคลเซียมเกินขนาดได้ Biomaterials. 2021;277:121080. doi:10.1016/j.biomaterials.2021.121080(IF:12.479)

-4- Xu Z, Xu J, Sun S และคณะ Mecheliolide กระตุ้นการตายของเซลล์ที่เกิดจากภูมิคุ้มกันโดย ERS ในมะเร็งเซลล์ตับ Redox Biol. 2022;54:102351 doi:10.1016/j.redox.2022.102351(IF:11.799)

-5- Cai Z, Zhang Y, Zhang W และคณะ การกักเก็บสารหนูในเม็ดเลือดแดงและการกินเอริโทรฟาโกไซโตซิสมากเกินไปเกี่ยวข้องกับสถานะซีลีเนียมต่ำจากภาวะสมดุลรีดอกซ์ที่บกพร่อง Redox Biol. 2022;52:102321. doi:10.1016/j.redox.2022.102321(IF:11.799)

-6- Kaushik AC, Wu Q, Lin L และคณะ โปรไฟล์ ncRNA ของเอ็กโซโซมสำหรับการติดเชื้อไมโคแบคทีเรียระบุว่า miRNA-185-5p เป็นไบโอมาร์กเกอร์ใหม่สำหรับวัณโรค Brief Bioinform 2021;22(6):bbab210 doi:10.1093/bib/bbab210(IF:11.622)

-7- Hu P, Li H, Sun W และคณะ ความผิดปกติของไลโซโซมที่เกี่ยวข้องกับคอเลสเตอรอลกระตุ้นให้เซลล์ตายจากมะเร็งเม็ดเลือด: การวิเคราะห์แบบไดนามิกเกี่ยวกับผลของพิษต่อเซลล์ของ LW-218 Acta Pharm Sin B. 2021;11(10):3178-3192. doi:10.1016/j.apsb.2021.02.004(IF:11.614)

-8- Wang X, Ni J, You Y และคณะ การตรวจจับ LPS ที่เกิดจาก SNX10 ทำให้เกิดความผิดปกติของผนังกั้นลำไส้ผ่านกระบวนการส่งสัญญาณที่ขึ้นอยู่กับคาสเปส-5 EMBO J. 2021;40(24):e108080 doi:10.15252/embj.2021108080(IF:11.598)

-9- Jiang K, Chen H, Fang Y และคณะ ANGPTL1 เอ็กโซโซมช่วยลดการแพร่กระจายของมะเร็งลำไส้ใหญ่และมะเร็งทวารหนักที่ตับโดยควบคุมรูปแบบการหลั่งของเซลล์คุปเฟอร์และขัดขวางการรั่วไหลของหลอดเลือดที่เกิดจาก MMP9 J Exp Clin Cancer Res. 2021;40(1):21. เผยแพร่เมื่อวันที่ 7 มกราคม 2021 doi:10.1186/s13046-020-01816-3(IF:11.161)

[10- Zhang S, Yang Z, Bao W และคณะ SNX10 (การเรียงลำดับเน็กซิน 10) ยับยั้งการเริ่มต้นและการดำเนินไปของมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักโดยควบคุมการย่อยสลาย SRC ของออโตฟาจี Autophagy 2020;16(4):735-749 doi:10.1080/15548627.2019.1632122(IF:11.059)

[11- Liu L, Liang L, Yang C, Zhou Y, Chen Y. เวสิเคิลนอกเซลล์ของ Fusobacterium nucleatum ทำลายกำแพงกั้นลำไส้โดยกำหนดเป้าหมายไปที่เส้นทางการตายของเซลล์ที่เกิดจาก RIPK1 Gut Microbes. 2021;13(1):1-20. doi:10.1080/19490976.2021.1902718(IF:10.245)