UltraNuclease หรือที่รู้จักกันในชื่อเอ็นโดนิวคลีเอสแบบไม่จำกัดขอบเขต นิวคลีเอสแบบกว้างสเปกตรัม เป็นเอ็นโดนิวคลีเอสแบบไม่จำเพาะที่ได้จาก Serratia Marcescen ซึ่งไฮโดรไลซ์พันธะฟอสโฟไดเอสเทอร์ภายในระหว่างนิวคลีโอไทด์ใดๆ ในกรดนิวคลีอิกเพื่อผลิตโอลิโกนิวคลีโอไทด์ 5' โมโนฟอสเฟตที่มีความยาว 2-5 เบส สามารถย่อยสลาย DNA และ RNA ในรูปแบบต่างๆ (สายคู่ สายเดี่ยว เส้นตรง วงกลม ดั้งเดิม หรือเปลี่ยนสภาพ) ภายใต้เงื่อนไขที่หลากหลายมาก (ยูเรีย 6 M, กัวนิดีน HCl 0.1 M, ไตรตอน X-100 0.4%, SDS 0.1%, EDTA 1 mM, PMSF 1 mM) และใช้กันอย่างแพร่หลายเพื่อกำจัดกรดนิวคลีอิกออกจากผลิตภัณฑ์ทางชีวภาพ UltraNuclease ยังสามารถกำจัดได้โดยใช้วิธีการที่เกี่ยวข้องในภายหลัง

ชุดทดสอบนี้ใช้หลักการของการทดสอบแบบแซนวิชเอนไซม์ที่เชื่อมโยงด้วยอิมมูโนซอร์เบนต์แบบแอนติบอดีคู่ (แซนวิช ELISA) เพื่อตรวจหาสารตกค้างของ UltraNuclease ที่เปลี่ยนสภาพและไม่เปลี่ยนสภาพ ขั้นแรก ให้เคลือบไมโครเพลทด้วยแอนติบอดีโพลีโคลนัลกระต่ายต่อ UltraNuclease เพื่อสร้างแอนติบอดีเฟสแข็ง ขั้นที่สอง ให้เติมมาตรฐาน UltraNuclease และตัวอย่างทดสอบลงในไมโครเพลทแอนติบอดีเฟสแข็ง จากนั้นเติมแอนติบอดีโพลีโคลนัลต่อ UltraNuclease ที่ติดฉลากไบโอติน และสุดท้ายให้เติมสเตรปตาวิดินที่ติดฉลากด้วยเอนไซม์ฮอร์สแรดิชเปอร์ออกซิเดส (SA-HRP) เพื่อสร้างแอนติบอดี + แอนติเจน + แอนติบอดี-ไบโอติน + คอมเพล็กซ์ SA-HRP จากนั้นจึงเติมสารตั้งต้น TMB ลงในคอมเพล็กซ์เพื่อสังเกตปฏิกิริยาสีหลังจากล้างคอมเพล็กซ์ TMB จะถูกแปลงเป็นสีน้ำเงินภายใต้การเร่งปฏิกิริยาของเอนไซม์ HRP และสุดท้ายจะถูกแปลงเป็นสีเหลืองเมื่อมีกรด และเฉดสีจะมีความสัมพันธ์ในเชิงบวกกับปริมาณของ UltraNuclease ในตัวอย่าง

ช่วงการวัดปริมาณที่ตรวจจับได้ของชุดทดสอบนี้คือ 0.047-3 ng/mL โดยขีดจำกัดการตรวจจับต่ำสุดคือ 23.5 pg/mL

คุณสมบัติ

• มีความไวสูง: ตรวจจับสารตกค้าง UltraNuclease เพียง 23 pg/ml ในตัวอย่างทางชีววิทยาในกระบวนการและขั้นสุดท้าย
• รับประกันความแม่นยำ: สามารถตรวจจับสารตกค้างของ UltraNuclease ได้อย่างแม่นยำด้วยอัตราการฟื้นตัว 80%-110%
• ความเฉพาะเจาะจง: ใช้ร่วมกับ Yeasen อุลตรานิวคลีเอสสามารถตรวจจับสารตกค้างได้อย่างแม่นยำ
• มีเสถียรภาพ: ความแตกต่างระหว่างล็อตต่อล็อตอยู่ในระดับต่ำ คุณสมบัติของชุดไม่ได้รับผลกระทบภายใต้อุณหภูมิ 37℃ เป็นเวลา 6 วัน
• การรวบรวมสัญญาณที่ง่ายดาย: การใช้ระบบไบโอติน-สเตรปตาติดิน สามารถขยายสัญญาณได้อย่างเสถียร
• ชุดอุปกรณ์ครบชุด: ส่วนประกอบที่สำคัญทั้งหมดมีมาให้ในชุด คุ้มต้นทุนในการใช้งาน

แอปพลิเคชัน

• การทดสอบ UltraNuclease ที่เหลือในผลิตภัณฑ์ทางชีวภาพ

ข้อมูลจำเพาะ

ส่วนประกอบ

การขนส่งและการเก็บรักษา

ชุดทดสอบ UltraNuclease ELISA จัดส่งพร้อมถุงน้ำแข็งและสามารถเก็บไว้ได้ที่อุณหภูมิ 2°C ~8°C ผลิตภัณฑ์ที่ไม่ได้เปิดจะมีอายุ 1 ปี เมื่อเปิดรีเอเจนต์แล้ว จะมีอายุ 6 เดือน ห้ามแช่แข็งผลิตภัณฑ์นี้

การจัดเก็บสารเคมีที่เตรียมไว้:

1. บัฟเฟอร์ล้างเจือจางและบัฟเฟอร์เจือจางสามารถเก็บไว้ได้ที่อุณหภูมิ 2°C ~8°C เป็นเวลา 1 สัปดาห์

2. มาตรฐาน 36701-C เป็นของเหลวและเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 2°C ~8°C เป็นเวลา 1 ปี

3. แอนติบอดีตรวจจับที่เตรียมไว้และบัฟเฟอร์หยุดสามารถเก็บไว้ได้ที่อุณหภูมิ 2°C ~8°C เป็นเวลา 1 เดือน

ตัวเลข

• การสาธิตความจำเพาะ

รูปที่ 1. ความเฉพาะเจาะจงของชุด UltraNuclease ELISA แสดงไว้ในรูปด้านบน

ตัวอย่างจำลอง 8 ตัวอย่างได้รับการประมาณค่าสำหรับปฏิกิริยาที่ไม่จำเพาะกับแอนติบอดีในชุด ไม่มีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญระหว่างตัวอย่าง 8 ตัวอย่างและตัวอย่างที่เป็นลบ (*: ความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญจากตัวอย่างที่เป็นลบ NS: ไม่มีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญจากตัวอย่างที่เป็นลบ)

• จอแสดงผลแบบแม่นยำ

ก)

ข)

รูปที่ 2 ความแม่นยำของ UCF.ME™ UltraNuclease ELISA ถูกทดสอบดังข้างต้น แผนการ

ทดสอบซ้ำ 6 ชุดที่ความเข้มข้นแต่ละชุดบนกราฟมาตรฐาน และพบว่า CV% ทั้งหมดต่ำกว่า 5% (รูปที่ 2A) นักวิเคราะห์ 3 รายดำเนินการทดลอง UCF.ME™ UltraNuclease ELISA และพบว่า CV% ต่ำกว่า 15% (รูปที่ 2B)

• การตรวจสอบความถูกต้อง

ก)

ข)

รูปที่ 3 ความแม่นยำของ UCF.ME™ อัลตร้านิวคลีเอส ELISA คือ ทดสอบตามรูปแบบต่อไปนี้

UltraNuclease ถูกเติมลงในสารละลายไลซิสเซลล์ 5 μg/mL (HEK293, E.coli, CHO และ Vero) อย่างอิสระ โดยมีความเข้มข้นสุดท้ายที่ 1.5 ng/mL ความแม่นยำในตัวอย่างเซลล์ที่แตกต่างกันนั้นยอดเยี่ยมกว่าผู้ผลิตรายอื่น (รูปที่ 3A) UltraNuclease ถูกเติมลงในตัวอย่างจริง (ที่จัดเตรียมโดยลูกค้า) และถูกเจือจางเป็นลำดับ 2 เท่าจาก 3ng/mL เป็น 0.093ng/mL การคืนตัวของสไปค์ทั้งหมดอยู่ระหว่าง 80%~110% (รูปที่ 3B)