(1) ถาม: ความแตกต่างระหว่างการถ่ายโอนยีน DNA และการถ่ายโอนยีน siRNA คืออะไร?

A: 1. เนื่องจากมีเพียง 20 คู่เบส siRNA จึงมีขนาดเล็กกว่า DNA มาก โดยมีคู่เบสหลายพันคู่หรือมากกว่า 10,000 คู่เบส

2. สารเคมีสำหรับการถ่ายโอนยีนและวิธีการที่ใช้ในการถ่ายโอนยีน DNA ไม่เหมาะสำหรับการถ่ายโอนยีน siRNA

3. การถ่ายโอนยีน siRNA มีข้อกำหนดที่เข้มงวดกว่าเกี่ยวกับความเป็นพิษของรีเอเจนต์การถ่ายโอนยีนมากกว่าการถ่ายโอนยีน DNA

(2) ถาม: จำเป็นต้องเปลี่ยนสารเคมีสำหรับการถ่ายโอนยีนหลังการถ่ายโอนยีนหรือไม่?

A: สำหรับการเปลี่ยนแปลงขนาดกลาง สามารถแบ่งได้เป็น 2 สถานการณ์ คือ

1. หากไม่มีการเปลี่ยนแปลงตัวกลางก่อนการถ่ายยีน ควรเปลี่ยนตัวกลางประมาณ 6 ชั่วโมงหลังการถ่ายยีน เพื่อให้แน่ใจว่ามีสารอาหารที่จำเป็นต่อการเจริญเติบโตของเซลล์

2. หากมีการเปลี่ยนแปลงก่อนการถ่ายยีน สามารถเปลี่ยนอาหารเลี้ยงเชื้อได้ตามปกติเมื่ออาหารเลี้ยงเชื้อขาดสารอาหาร

(3) ถาม: ประสิทธิภาพของรีเอเจนต์การถ่ายโอนยีน PEI สำหรับการถ่ายโอนยีน siRNA และพลาสมิดคืออะไร

A: รีเอเจนต์การถ่ายโอนยีน PEI นี้ได้รับการพัฒนาเป็นพิเศษสำหรับ siRNA และไม่แนะนำการถ่ายโอนยีนพลาสมิด

(4) ถาม: สามารถแช่แข็งรีเอเจนต์การถ่ายโอนยีนได้หรือไม่?

A: ห้ามแช่แข็ง เนื่องจากรีเอเจนต์ทรานสเฟกชันเป็นรีเอเจนต์ทรานสเฟกชัน PEI ที่มีประจุบวก การแช่แข็งที่อุณหภูมิต่ำจะทำลายการทำงานของรีเอเจนต์ทรานสเฟกชัน PEI ดังนั้น จึงควรเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 4 องศาเพื่อรักษาประสิทธิภาพการทรานสเฟกชันให้ดีที่สุด

(5) ถาม: จะปรับปรุงประสิทธิภาพการถ่ายโอนยีนได้อย่างไร

A: a: ความหนาแน่นของเซลล์ในช่วงเวลาการถ่ายโอนยีน 30%-50%

b: ควรใช้ตัวกลางที่ปราศจากซีรั่ม Opti-MEM สำหรับการเจือจาง siRNA และการเจือจางไลโปโซมระหว่างการถ่ายโอนยีน

c: สามารถเปลี่ยนตัวกลางได้ 4-6 ชั่วโมงหลังการถ่ายยีน

[1] Zhang Y, Hu R, Xi B, Nie D, Xu H, Liu A. กลไกการปล่อยลิแกนด์ NKG2D ที่เกี่ยวข้องกับความชราและการหลบหนีของภูมิคุ้มกันที่เกิดจากเคมีบำบัดในเซลล์เนื้องอกของเซลล์ประสาท Front Cell Dev Biol. 2022;10:829404. เผยแพร่เมื่อวันที่ 2 มีนาคม 2022 doi:10.3389/fcell.2022.829404(IF:6.684)

[2] Cui B, Wang Y, Jin J และคณะ Resveratrol Treats UVB-Induced Photoaging by Anti-MMP Expression, through Anti-Inflammatory, Antioxidant, and Antiapoptotic Properties, and Treats Photoaging by Upregulating VEGF-B Expression. Oxid Med Cell Longev. 2022;2022:6037303. เผยแพร่เมื่อวันที่ 4 มกราคม 2022 doi:10.1155/2022/6037303(IF:6.543)

[3] Liu Y, Zeng Y, Si HB, Tang L, Xie HQ, Shen B. เอ็กโซโซมที่ได้จากเซลล์ต้นกำเนิดที่ได้จากปัสสาวะของมนุษย์ที่มีการแสดงออกของ miR-140-5p มากเกินไป บรรเทาโรคข้อเข่าเสื่อมผ่านการลดการแสดงออกของ VEGFA ในแบบจำลองหนู Am J Sports Med. 2022;50(4):1088-1105 doi:10.1177/03635465221073991(IF:6.203)

[4] Zhang ZD, Wen B, Li DJ และคณะ การฟอสโฟรีเลชันของแฟสซิน threonine 403 ที่เกิดจาก AKT serine/threonine kinase 2 ควบคุมความก้าวหน้าของมะเร็งหลอดอาหาร Int J Biochem Cell Biol. 2022;145:106188. doi:10.1016/j.biocel.2022.106188(IF:5.085)

[5] Tan S, Zhou Y, Zhao H และคณะ การวิเคราะห์ทรานสคริปโตมที่ครอบคลุมของไฮโปทาลามัสเผยให้เห็นยีนที่เกี่ยวข้องกับความผิดปกติของการพัฒนาเพศในหมู J Steroid Biochem Mol Biol. 2021;210:105875 doi:10.1016/j.jsbmb.2021.105875(IF:4.294)

[6] Niu M, Yi M, Dong B, Luo S, Wu K. การเพิ่มระดับแกน STAT1-CCL5 เป็นไบโอมาร์กเกอร์ของมะเร็งลำไส้ใหญ่และส่งเสริมการแพร่กระจายของเซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่ Ann Transl Med. 2020;8(15):951. doi:10.21037/atm-20-4428(IF:3.297)