Dekstran sodyum sülfat (DSS) kullanılarak Ülseratif Kolit Domuz Yavrusu Modellemesinin protokolü

Artan bağırsak geçirgenliği, IBD'nin etiyolojik faktörlerinden biridir ve bu nedenle küçük ve büyük bağırsak hasarının ciddiyetini değerlendirmek için bir biyobelirteç olarak kullanılabilir. Tüm kript villus ekseni boyunca emilebilen inert küçük bir karbonhidrat molekülü olan D-Mannitol, in vivo bağırsak geçirgenliğini değerlendirmek için kullanıldı[1].

Figure 1. Piglet

Şekil 1. Domuz yavrusu

1. Model oluşturma

2. Sonuçlar

3. Bu kaynağa bağlantılar

4. Yeasen DSS ile modelleme için başarılı bir vaka

5. Ürün siparişi

6. Reaktiflerimizle yayınlanan makaleler

7. Okumaya Dikkat Edin

1. Model oluşturma

1.1 Hayvan Modeli

4-5 günlük Yorkshire domuz yavruları

1.2 Malzeme

DSS(Yeasen#60316ES,MW36000-50000)

1.3 Protokol

a) Yorkshire domuz yavruları, kontrollü 12 saatlik ışık/karanlık döngüsüne sahip bir odada kauçuk zeminli metal zeminli bölmelerde ayrı ayrı barındırıldı. Oda sıcaklığı 26℃'de tutuldu ve ısıtma lambasıyla desteklendi;
b) Domuz yavrularına, ad libitum alım düzeylerine benzer şekilde günde üç kez ticari süt ikamesi formülü diyeti verildi;
c) Hayvanlara cerrahi olarak intragastrik bir kateter takıldı. Kateter, yaklaşık 30 mm'si gastrik lümenin içine yerleştirilerek gastrik duvara daha fazla dikilen bir silikon yamaya (yaklaşık 8×12 mm) sabitlendi. Her hayvana, kateterin dış segmentinin geçici olarak saklanması için sırt cebi olan özel yapım bir yelek giydirildi;
d) Hayvanlar pozitif kontrol grubu (Pos), negatif kontrol grubu (Neg) ve deney grubu (Trp) olmak üzere üç gruba ayrıldı;
e) Pozitif kontrol grubu (Pos): perfüzyon DSS (5 gün) + tuzlu su (5 gün); Negatif kontrol grubu (Neg): normal tuzlu su ile perfüze edildi (10 gün); Deney grubu (Trp): DSS infüzyonu (5 gün) + terapötik ilaçlar (5 gün);
f) DSS dozu: 1,25 g/kg, 5 gün süreyle oral yoldan alınır;
g) Son noktada, hayvanlar inhalasyon anesteziği izofluran ile sakinleştirildi ve 0,3 ml/kg vücut ağırlığı (VA) dozunda Etanol (pentobarbital) ile intrakardiyak enjeksiyon yoluyla ötenazi uygulandı.
h) Kolon dokuları derhal 0,1 mM fenilmetil sülfonil florür (PMSF) içeren soğuk tuzlu su solüsyonunda (154 mM, pH7,4) yıkandı ve histoloji için örneklendi veya sonraki analiz için sıvı nitrojende anında donduruldu.

2. Sonuçlar

2.1 Bağırsak geçirgenliği analizi

Figure 2. DSS-induced D-mannitol concentration in piglets was higher than that in the control group

Şekil 2. Domuz yavrularında DSS kaynaklı D-mannitol konsantrasyonu kontrol grubundakinden daha yüksekti

Domuz yavrularında DSS'ye bağlı D-mannitol konsantrasyonu arttı ve bağırsak bariyeri tahrip oldu.

2.2 H&E patolojik boyama kesiti

Figure 3. H&E pathological staining section (A: Neg group; B: Pos group)

Şekil 3. H&E patolojik boyama kesiti (A: Negatif grup; B: Pozitif grup)

Kolon inflamasyonunun şiddeti inflamasyon skorlaması ve histolojik ölçümlerle değerlendirildi.DSS ile tedavi edilen Pos grubunda reses yapısının bozulduğu, inflamatuvar hücrelerin mukoza ve submukozaya infiltre olduğu, reses absesi ve reses inflamasyonu gözlendi.

2.3 İnflamatuar faktörlerin tespiti

Figure 4. Detection of inflammatory factors

Şekil 4. İnflamatuar faktörlerin tespiti

DSS ile tedavi edilen Pos grubunda iki sitokinin konsantrasyonu arttı[1].

3. Bu kaynağa bağlantılar

[1]Connie J. Kim ve diğerleri. Beslenme Biyokimyası Dergisi 21 (2010) 468–475.

4. Yeasen DSS ile modelleme için başarılı bir vaka

Yeasen yüksek kalite sağlar DSS (Cat#60316ES): saflık (%98), kükürt içeriği %17-19, serbest kükürt <%0,2, çok sayıda literatür verisiyle desteklenmektedir.

Tablo 1 DSS ile farklı enterit modellerinin oluşturulması

Örnek

Modelleme örnekleri

Modelleme planı

Modelleme sonuçları

Değerlendirmeyi kullan

akut kolit

BALB/c fareleri, dişi, 6-8 hafta, 25 g

3%-5% DSS'yi 7 gün boyunca serbestçe içebilirsiniz

5. gün ortaya çıktı kolonun uzunluğu kısalmıştı, HE lekelenmesi vardı ve iltihap belirgindi

kalıplama hızı hızlıdır ve zaman kısadır. Akut kolit modelinin özellikleriyle tutarlıdır

C57BL/6 fareler, erkek, 8 hafta, 20 g

%3-%5 DSS gavajla, sürekli uygulama

5. gün meydana gelir, kolon kısalması, kilo kaybı, dışkıda kan, ishal

Yüksek küf oranı ve kısa süre. Akut kolit modelinin özellikleriyle tutarlı

kronik kolit

C57BL/6 fare, erkek, 8 hafta, 22 g

Gavaj yoluyla %1-2 DSS, sürekli uygulama

40. gün belirir, kolon kısalması, kilo kaybı, dışkıda kan, ishal

Yüksek kalıplama oranı. Kronik kolit modelinin özelliklerine uygun

kolon kanseri

C57BL/6 fare, erkek, 8 hafta, 21 g

1%-2% DSS 3 hafta boyunca 5 gün boyunca isteğe bağlı

14 hafta kolon uzunluğunda kısalma, kilo kaybı, HE lekelenmesi ve belirgin iltihaplanma

Yüksek kalıplama oranı. Kolon kanseri model özelliklerine uygun

5. Ürün siparişi

Sıcak satış ürünü aynı verimlilikle M*'nin fiyatının sadece 1/3'üne ihtiyaç duyuyor ve büyük bir stok tutuyoruz.

Tablo 2.Ürün Siparişi


Ürün Adı Kedi NO. Boyut

ColitCare™ Dekstran Sülfat Sodyum Tuzu (DSS), Kolit Derecesi MW:36000~50000

60316ES25 25 gr
60316ES60 100 gr
60316ES76 500 gr
60316ES80 1 kilo

6. Reaktiflerimizle yayınlanan makaleler

[1]Li Zhao, Fei Wang, Zhengwei Cai ve diğerleri.Ülseratif kolit tedavisinde enjekte edilebilir mukoadezif hidrojel ile ilaç kullanım platformunun iyileştirilmesi[J].kimya mühendisliği dergisi.424(2021)130464.IF=16.744
[2]Lingjun Tong, Haining Hao, Zhe Zhang ve diğerleri. Süt kaynaklı ekstraselüler veziküller, bağırsak bağışıklığını düzenleyerek ve bağırsak mikrobiyotasını yeniden şekillendirerek ülseratif koliti hafifletir[J].Theranostics.2021; 11(17): 8570-8586 EĞER=11.556
[3]Li, Y., Dong, J., Xiao, H., Zhang, S., Wang, B., Cui, M. ve Fan, S. Bağırsak komensal kaynaklı valerik asit radyasyon yaralanmalarına karşı koruma sağlar. Bağırsak Mikropları,.2020 .1–18.IF=10.245
[4]Jingjing Gan, Yuxiao Liu, Lingyu Sun ve diğerleri. Mikroakışkanlardan oral yoldan uygulanan nükleotid taşıma parçacıkları, inflamatuar bağırsak hastalığının tedavisi için[J]. Applied Materials Today.2021 Aralık;25:101231 EĞER=10.041
[5]Mengmeng Xu, Ying Kong, Nannan Chen, ve diğerleri. Aktif Ülseratif Kolitte Bağışıklık İlgili Gen İmzasının Belirlenmesi ve CeRNA Ağının Tahmini[J].Frontiers in Immunology.2022; 13: 855645. EĞER=7.561
[6]JialiDong, YuanLi, HuiwenXiao ve diğerleri. Oral mikrobiyota, fare modellerinde kolorektal kanser için radyoterapinin etkinliğini ve prognozunu etkiler[J]. Hücre raporları.2021, 109886.IF=9.423
[7]Hao H,  Zhang X,  Çingene Ben,  Liu Q, ve diğerleri.Lactobacillus plantarumEkstraselüler Veziküllerin Etkisi Farelerde Bağırsak Mikrobiyotası ve Ülseratif Kolit Üzerine Q7[J].Frontiers in Immunology.2021.777147 .IF=7.561
[8]Yaohua Fan, Yanqun Fan, Kunfeng Liu ve diğerleri.Yenilebilir Kuş Yuvası, Th17/Treg Hücre Dengesini Geri Kazandırarak C57BL/6J Farelerinde Dekstran Sülfat Sodyum Kaynaklı Ülseratif Koliti İyileştirir[J].Farmakoloji Alanındaki Sınırlar.2021.632602.IF=7.561
[9]Jia-Rong Huang, Sheng-Te Wang, Meng-Ning Wei ve diğerleri. Piperlongumin Fare Kolitini ve Kolitle İlişkili Kolorektal Kanseri Hafifletir[J]. Farmakolojideki Sınırlar.2020.586885. EĞER=7.561
[10]Gao X, Fan W, Tan L, ve diğerleri. Soya izoflavonları, ERα/NLRP3 inflamazom yollarını hedef alarak deneysel koliti iyileştirir[J]. Beslenme Biyokimyası Dergisi, 2020, 83.IF=6.048
[11]Lujuan Xing, Lijuan Fu, Songmin Cao ve diğerleri. LPS kaynaklı RA'da Sığır Kemiği Jelatininden Elde Edilen Peptitlerin Anti-inflamatuar EtkisiW264.7 Makrofaj Hücreleri ve Dekstran Sülfat Sodyum İndüklenmiş C57BL/6 Fareleri[J]. Besinler 2022, 14, 1479. EĞER=5.717
[12] Vang S,  Huang J,  Bronzlaşmak KS, ve diğerleri.İzosteviol Sodyum, Metabolik Profilleme, Makrofaj Polarizasyonu ve NF-B Yolunun Düzenlenmesi Yoluyla Dekstran Sodyum Sülfat Kaynaklı Kronik Koliti İyileştirir[J].Oksidatif Tıp ve Hücresel Uzun Ömür. 2022,4636618. EĞER=5.076

7.Okumaya Bakın

Dekstran sodyum sülfat (DSS) Ülseratif Kolit Modeli'nin Oluşturulması

Azoksimetan (AOM) ve Dekstran Sülfat Sodyum (DSS) Endüklenen Kolit İlişkili Kanser Modelinin Oluşturulması

Dekstran sodyum sülfat (DSS) kullanılarak Ülseratif Kolit Drosophila Modellemesinin protokolü

Dekstran sodyum sülfat (DSS) kullanılarak Ülseratif Kolit Zebra Balığı Modellemesinin protokolü

Sorgu