Dairesel RNA araştırma aracı -RNAse R

—— Dairesel RNA ilaç gelişiminin hızlandırılması

Son yıllarda, mRNA aşısı/ilacı giderek halkın vizyonuna girmiştir. mRNA aşısı/ilaçları hızlı tasarım, düşük maliyet ve kolay üretim avantajlarına sahiptir, ancak mRNA'nın kendisi kolay parçalanabildiği için, şu anda esas olarak bir şapka ve kuyruk ekleyerek ve mRNA çevirisine yardımcı olarak mRNA preparatının stabilitesini iyileştirmektedir. Son yıllarda, araştırmacılar yeni bir RNA türü buldular - Dairesel RNA (Dairesel RNA, circRNA). Bu tür RNA'lar, parçalanması kolay olmayan kovalent-kapalı halka yapısıdır. mRNA ile karşılaştırıldığında, circRNA daha stabildir ve şapkaya bağlı olmayan çeviriyi başarabilir. Bu nedenle, CIRCRNA'nın keşfi, daha basit, daha iyi stabiliteye sahip yeni nesil RNA aşılarının ve ilaçlarının geliştirilmesi için olanaklar sağlar.

Şekil 1: RNA aşısının süreci 1

CIRCRNA'nın üretim süreci şunları içerir: şablon hazırlama, in vitro transkripsiyon, DNA şablonunun çıkarılması, dairesel ve saflaştırma. RNA dairesel hale getirildikten sonra, CirCRNA'yı zenginleştirme amacına ulaşmak için insansız RNA'yı sindirmek için ribonükleaz R (Ribonuclease R, RNASE R) kullanmak gerekir. Yeasen, moleküler enzimatik mühendislik ve rasyonel evrim platformuna sahiptir. Aynı zamanda ürünün kalitesini garanti eder. Yeasen Ar-Ge ekibi, yüksek saflıkta ve yüksek aktiviteli bir RNASE R Enzimini başarıyla geliştirdi.

RNASE R (KAT#14606ES) E. coli'den türetilen bir Mg2+bağımlılık 3 '→ 5' ribonükleik asit ekzonükleazdır. Tüm doğrusal RNA'ları sindirebilir ve CirCRNA, lariat RNA'yı sindirmez. Genellikle doğrusal RNA moleküllerini çıkarmak ve CirCRNA ve lariat RNA gibi doğrusal olmayan RNA'ları zenginleştirme amacını gerçekleştirmek için kullanılır.

Özellikler

Protein saflığı (SDS-PAGE) ≥%95

Şekil 2: Protein saflığının tespiti: Ürünün (Kat#14606ES) farklı hacimleri (1 μL, 2 μL, 3 μL) %95 veya daha yüksek saflık göstermektedir.

Hiçbir kalıntı yok ekzonükleaz

Şekil 3: 0,5 μg λDNA-Hind III Digest'e 20 U RNASE R eklendi ve 37 ℃'de 4 saat inkübe edildi. Sonuç, kalıntı olmadığını gösteriyor RNASE R (CAT#14606ES) ürünlerinden ekzonükleaz tespit edildi.

Doğrusal RNA'nın sindirim yeteneği ve SirkRNA

Şekil 4: RNASE R (CAT#14606ES) doğrusal RNA moleküllerini sindirebilir
Şekil 5: CircRNA, RNASE R (CAT#14606ES) tedavisini tolere edebilir.

Ürün

Kedi

Boyut

RNAz R (20U/μL)

14606ES

250U/2500U/10000U

RNase R (GMP sınıfı, 20 U/μL) 14615ES 250U/2500U/10000U

T7 RNA Polimeraz GMP sınıfı (250U/μL)

10625ES

10KU/100KU/2500KU

CleaScrip™ T7 RNA Polimeraz (düşük dsRNA, 250 U/μL) 10628ES 10KU/100KU/2500KU

Referans

  1. Qu L, Yi Z, Shen Y ve diğerleri. SARS-CoV-2'ye ve ortaya çıkan varyantlara karşı dairesel RNA aşıları. Hücre.2022;185(10):1728-1744.e16. doi:10.1016/j.cell.2022.03.044
  2. Chen L, Wang C, Sun H, ve diğerleri. CircRNA keşfi ve analizi için biyoenformatik araç kutusu. Kısa Biyoinform. 2021;22(2):1706-1728. doi:10.1093/bib/bbaa001

Sorgu