İzotermal nükleik asit amplifikasyon teknolojisi, farklı amplifikasyon prensiplerine göre birçok kategoriye ayrılabilir. Şu anda en yaygın ve yaygın olarak kullanılan, Japon bilim insanı Notomi ve arkadaşları tarafından 2000 yılında geliştirilen döngü aracılı izotermal amplifikasyon teknolojisidir (LAMP). Bst DNA polimerazı, izotermal amplifikasyon teknolojisinin çekirdek enzimidir. Bst DNA polimerazının LAMP'deki işlevi ve performansı nedir?

1. Bst DNA polimeraz LAMP'ta nasıl bir rol oynar?
2. Liyofilize Bst Plus DNA Polimeraz Nedir?
3. Ürünün özelliği nedir? Dondurularak kurutulmuş En iyi Artı DNA Polimeraz (14405ES)?
4. Liyofilize ürünün performansı nedir? En iyi Artı DNA Polimeraz(14405ES)?
5. İlgili ürünler
6. Okuma ile ilgili

1. Bst DNA polimeraz LAMP'ta nasıl bir rol oynar?

LAMP'ın teknik özelliği, hedef genin altı bölgesi için dört primer tasarlamak ve 60~65 ℃ sabit sıcaklık koşulu altında BST DNA polimeraz kullanarak amplifikasyon reaksiyonunu gerçekleştirmek ve 15-60 dakika içinde 109-1010 kat amplifikasyona ulaşmaktır. Bst DNA polimerazı güçlü termal stabiliteye, zincir yer değiştirme aktivitesine ve polimeraz aktivitesine sahiptir. PCR termal denatürasyon amplifikasyon döngüsü olmadan sabit sıcaklık koşulları altında hızlı, etkili ve spesifik bir amplifikasyon şablonu olabilir ve tüm LAMP deneyini 1 saat içinde tamamlayabilir.

2. Liyofilize Bst Plus DNA Polimeraz Nedir?

Liyofilize Bst Plus DNA Polimerazı, gliserol içermeyen Bst Plus DNA Polimerazı dondurmak için kullanılır ve bu da gliserol içermeyen Bst enzim kararsızlığı sorununu çözer. Aynı zamanda, bu ürün güçlü 5'-3' DNA polimeraz aktivitesine, iplik yer değiştirme aktivitesine ve dUTP toleransına sahiptir, bu da kirlilik karşıtı izotermal amplifikasyon reaksiyonu için daha uygundur, müşterilerin dondurularak kurutulmuş ürünlerin üretiminde kullanmaları için uygundur.

Şekil 1: 14405ES-Liyofilize Bst Plus DNA Polimeraz (60 U/μL, Gliserol İçermez)

3. Liyofilize ürünün özelliği nedir? En iyi Artı DNA Polimeraz(14405ES)?

• Liyofilizasyona uygun, gliserol içermeyen enzim
• Maliyetleri azaltmak için normal sıcaklıkta taşıyın
• Güçlü iplik yer değiştirme aktivitesi, hassas ve kararlı
• Hızlı yeniden çözünme ve rahat kullanım

4. Liyofilize ürünün performansı nedir? En iyi Artı DNA Polimeraz(14405ES)?

4.1 Dondurularak kurutulmuş toz şekli: T0 anına kıyasla, tozun şekli 45 ℃ - 15 GÜN dondurularak kurutulduktan sonra bile değişmeden kalır.

Şekil 2. Dondurularak kurutulmuş toz şekli

4.2 istikrar

Dondurularak kurutulmuş tozun termal hızlandırmadan sonraki performansı hala sıvı reaktifin performansıyla tutarlı olabilir ve dondurularak kurutulmuş toz (14405ES)
Evrensel olup floresan boyama yöntemi ve pH indikatör yöntemi için kullanılabilir.

4.2.1 Floresan boya yöntemi——stabilite

RT-LAMP floresan boya amplifikasyon sisteminde, gliserol içermeyen Bst dondurularak kurutulmuş tozun T0, 45℃-7gün ve 45℃ -15 günlük termal hızlandırma sonrasındaki performansı, gliserol içermeyen Bst enziminin sıvı versiyonuyla tutarlıdır ve NTC pik yapmaz.

Deneysel koşullar:

Not: Kontrol grubu aynı konsantrasyonda gliserol Bst enzimi içermeyen sıvı versiyonudur.

Şekil 3. Stabilite sonuçları

4.2.2 Floresan boya yöntemi——RT-LAMP sisteminin dondurularak kurutulmasından sonra Bst enziminin performansı

RT-LAMP floresan boya amplifikasyon sisteminde, 45 ℃ - 15 gün sonra RT-LAMP sisteminde dondurularak kurutulmuş gliserol içermeyen Bst tozunun ürün performansı, gliserol içermeyen Bst enziminin sıvı versiyonuyla tutarlıydı. Kontrol grubunda ve dondurularak kurutulmuş RT-LAMP sisteminde ürünün tespit oranı sırasıyla %100 (16/16) ve %94 (15/16) idi.

Deneysel koşullar:

Not: Kontrol grubu aynı konsantrasyonda gliserol Bst enzimi içermeyen sıvı versiyonudur.

Şekil 4. RT-LAMP sisteminin dondurularak kurutulmasından sonra Bst enziminin performansı

4.2.3 PH gösterge yöntemi ——Kararlılık

RT-LAMP pH indikatör amplifikasyon sisteminde, T0 zamanına göre, 45 ℃ - 15 günlük termal hızlandırma sonrasında Bst dondurularak kurutulmuş tozun tespit oranı %88 (7/8) olarak gerçekleşti.

Deneysel koşullar:

Not: Kontrol grubu aynı konsantrasyonda gliserol Bst enzimi içermeyen sıvı versiyonudur.

Şekil 5. Stabilite sonuçları

4.2.4 PH gösterge yöntemi——Yeniden dondurma kararlılığı

RT-LAMP pH indikatör amplifikasyon sisteminde, 45 ℃ - 7 günlük yeniden dondurmadan sonra performans stabildir. Kontrol grubu sıvı Bst enzimidir. Kontrol grubuyla karşılaştırıldığında, termal ivmeden sonra 14405ES'nin tespit oranı %94'tür (30/32).

Deneysel koşullar:

Not: Kontrol grubu aynı konsantrasyonda gliserol Bst enzimi içermeyen sıvı versiyonudur.

Şekil 6. Yeniden dondurma kararlılığı sonuçları

4.3 Spesifiklik

RT-LAMP floresan boya amplifikasyon sisteminde 48 kuyulu NTC'de tepe noktası oluşmadı ve 14405ES'nin özgüllüğü %100 olarak bulundu.

Deneysel koşullar:

Not: Kontrol grubu aynı konsantrasyonda gliserol Bst enzimi içermeyen sıvı versiyonudur.

Şekil 7. Belirli sonuçlar

5. İlgili ürünler

Yeasen'in sağlayabileceği ilgili ürünler Tablo 1'de gösterilmektedir.

Tablo 1.İlgili ürünler

6. Okuma ile ilgili

LAMP/RT-LAMP'ı daha hassas ve hızlı hale getirmek için doğru anahtar enzim hammaddelerini seçmek!

Ters Transkriptaz Seçiminin Kılavuzu

YEASEN UDG: PCR reaksiyonlarında "kirlenmeyi önleme uzmanı"