PCR için geleneksel yüksek doğruluklu enzimler kullanıldığında, bazı dikenli sorunlarla karşılaşmak kaçınılmazdır. Örneğin, doğruluk yeterli olmayabilir ve çoğaltılan parçaların dizilenmesinden sonra bile hedef bazlarda mutasyonlara veya silinmelere yol açabilir. Çoğaltma süresi de nispeten uzundur; bazen, 5 kb'lik bir parçanın çoğaltılması neredeyse 2 saat sürebilir. Şimdi, XiaoYi sorunlarınızı çözmek için hızlı bir yüksek doğruluklu PCR sunuyor! -- Hieff Canace™ AdvanceFast PCR Master Mix (Ultra hızlı, yüksek doğruluklu PCR Premiks).
The 2× Hieff Canace™ AdvanceFast PCR Master Mix (Boya ile) önceden eklenmiş bir elektroforez göstergesi içerir ve PCR ürünlerinin doğrudan elektroforez için kullanılmasına olanak tanır. Amplifikasyon ürünleri kör uçlara sahiptir. Bu yüksek doğruluklu enzim karışımı, hızlı, basit, son derece hassas, güçlü bir şekilde spesifik ve kararlı olma avantajlarını sunar. Reaksiyon sisteminde yalnızca primerler ve şablonların eklenmesi gerekir. Ek olarak, ürün ayrıca yüksek doğruluklu PCR ön karışımının tekrarlanan dondurma ve çözme işlemlerinden sonra bile stabil aktivitesini korumasını sağlayan spesifik bir koruyucu içerir.
Ürün Özellikleri
- Yüksek Sadakat: Düşük uyumsuzluk oran, ile A temel uyumsuzluk oran ile ilgili 231/300.000 içinde yüksek GC mutasyona yatkın diziler;
- Hızlı Amplifikasyon Hız: Eklenti oran gibi hızlı gibi 5 saniyeler başına Türkçe:
- Geniş Uygulanabilirlik: Yetenekli ile ilgili kapsayan genler ile %20-80 GC içerik, tahammül eder fare lizatlar Ve %20 kan;
- İyi Kararlılık: Olabilmek olmak saklandı de 37°C için 7 günler olmadan etkileyen ürün performans;
- Hızlı Ve Uygun: Basitçe eklemek astarlar Ve şablon için amplifikasyon, gelir ile yükleniyor boya için doğrudan elektroforez.
Ürün Performans Gösterimi
Yüksek Sadakat, Düşük Uyumsuzluk Oranı
Farklı türlerin genomları şablon olarak kullanılarak, baz mutasyonlarına/kayıplarına oldukça yatkın olan altı GC açısından zengin parça amplifikasyon için seçildi. İlgili PCR ürünleri vektörlere klonlandı ve her dizi için 100 tek klon, baz uyumsuzluğu/mutasyon oluşumlarını doğrulamak için dizileme için seçildi. Sonuçlar, hızlı yüksek doğruluklu PCR ana karışımının (10164ES), yerel ve uluslararası marka reaktiflerine kıyasla üstün bir baz uyumsuzluğu/mutasyonu oranına sahip olduğunu gösterdi.
Uzatma süresi 5 saniyeye kadar ulaşabilir/kb
Hızlı yüksek doğruluklu enzim ön karışımı (10164ES) ve Ürün T kullanılarak, 5 sn/kb'lik bir uzatma hızıyla 100 ng insan genomik DNA şablonundan farklı uzunluktaki parçalar (0,4-10 kb) çoğaltıldı ve 5 sn/kb'lik bir uzatma süresi gerekiyordu. Sonuçlar, hızlı yüksek doğruluklu enzim ön karışımının (10164ES) 5 sn/kb'lik bir uzatma hızıyla 10 kb içindeki parçaları çoğaltabileceğini gösterdi.
Farklı GC içeriğine sahip gen parçalarını çoğaltabilir
İnsan genomik DNA şablonlarından %23-76 GC içeriğine sahip gen parçalarını çoğaltmak için hızlı yüksek doğruluklu enzim ön karışımını (10164ES) kullanarak, uzatma süresi 5 sn/kb olarak ayarlandı. Sonuçlar, ürünün iyi bir çoğaltma özgüllüğüne sahip olduğunu ve farklı GC içeriklerine sahip parçaları çoğaltabildiğini gösterdi.
Değişen GC içeriğine sahip gen parçalarını çoğaltma yeteneğine sahiptir
Farklı örneklerden değişken uzunluklardaki parçaları çoğaltmak için hızlı yüksek doğruluklu enzim ön karışımını (10164ES) kullanarak, uzatma süresi kilobaz başına 5-10 saniye olarak ayarlanmıştır. Sonuçlar, bu ürünün mükemmel çoğaltma özgüllüğü sergilediğini ve çeşitli şablonlardan farklı parçaların çoğaltılmasıyla uyumlu olduğunu göstermektedir.
Not: 1. Fare genomik DNA'sı 1 kb; 2. Fare genomik DNA'sı 2 kb; 3. Fare genomik DNA'sı 6 kb; 4. Mısır genomik DNA'sı 1 kb; 5. Pirinç genomik DNA'sı 2 kb-A; 6. Pirinç genomik DNA'sı 2 kb-B; 7. İnsan 293 hücre cDNA'sı 1 kb; 8. İnsan 293 hücre cDNA'sı 2 kb; 9. İnsan 293 hücre cDNA'sı 3 kb; 10. İnsan 293 hücre cDNA'sı 12 kb; 11. E. coli suyu 8 kb; 12. E. coli suyu 16 kb; 13. Pirinç genomik DNA'sı 10 kb-A; 14. Pirinç genomik DNA'sı 10 kb-B; 15. Pirinç genomik DNA'sı 10 kb-C; 16. Pirinç genomik DNA'sı 20 kb-A; 17. Pirinç genomik DNA'sı 20 kb-B; 18. İnsan kanı direkt amplifikasyonu 3 kb.
Farklı türler arasında şablon amplifikasyonunun yüksek tespit oranı
Hızlı yüksek doğruluklu enzim ön karışımı (10164ES) kullanılarak, Arabidopsis, kolza tohumu ve patateste 0,5-10 kb aralığında değişen farklı GC içerikli parçalar, 5 sn/kb'lik bir uzatma süresiyle çoğaltıldı. Sonuçlar, hızlı yüksek doğruluklu enzim ön karışımının (10164ES) başarılı çoğaltmayı sağlayabileceğini gösterdi.
Hızlı yüksek doğruluklu enzim ön karışımı (10164ES) kullanılarak, Arabidopsis, kolza tohumu, meyve sinekleri, Caenorhabditis elegans ve zebra balığından 0,5-10 kb aralığında parça boyutlarına sahip ve %20-80 GC içeriğini kapsayan rastgele diziler (rastgele seçilmiş) çoğaltıldı. Uzatma süresi 5 sn/kb olarak ayarlandı. Sonuçlar, hızlı yüksek doğruluklu enzim ön karışımının (10164ES) yüksek bir tespit oranına sahip olduğunu gösterdi.
İyi stabilite
Sırasıyla 3 gün ve 7 gün boyunca 37℃'de ısıyla hızlandırılmış olarak saklanan hızlı yüksek doğruluklu enzim ön karışımını (10164ES) kullanarak, 100 ng insan genomik DNA'sından 3 kb ve 5 kb DNA parçalarını, 5 sn/kb'ye ayarlanmış bir uzatma süresiyle çoğaltmak. Sonuçlar, ürünün iyi bir stabiliteye sahip olduğunu göstermektedir.
Müşteri Deneme Geri Bildirimi
Hayvan gDNA-120bp-%50GC
Müşteri değerlendirmesi: PCR süreci hızlıdır, bantlar uygundur ve doğrudan agaroz jel elektroforezine yüklenebilir. N markasının bantları yukarı doğru eğimlidir, bu kendi tamponunun etkisinden kaynaklanıyor olabilir ve yükleme tamponu eklenmediğinden, bu ürün mevcut deneysel protokolümdeki yüksek doğruluklu enzimin yerini alabilir.
Bitki cDNA-729bp-%45.13GC
Müşteri değerlendirmesi: T markasıyla karşılaştırıldığında, klonlama bantları daha net ve daha düzgündür ve tüm PCR süreci daha hızlıdır. Jeli çalıştırırken ekstra boya eklemeye gerek yoktur, bu da çok kullanışlı ve zaman kazandırıcıdır.
Mikrobiyal gDNA-1158、1953bp-%58,8、%52,9GC
Müşteri değerlendirmesi: V markasıyla karşılaştırıldığında etkisi benzer, ancak kişisel olarak daha iyi buluyorum.
Bitki cDNA-2000bp-%40GC
Müşteri değerlendirmesi: Etkisi çok iyi, şerit şeffaf.
Yüksek Sadakat PCR Seçim Kılavuzu
| Ürün Konumlandırma | Ürün Adı | Kedi# |
| 5s/kb, sadakat ve hızı garanti eder (İle Boya) | 10164ES | |
| 5s/kb, sadakat ve hızı garanti eder (Boyasız) | 2× Hieff Canace™ AdvanceFast PCR Ana Karışımı | 10163ES |
| 83×Taq, yüksek tespit oranı (Boya ile) | 2×Hieff Canace™ Plus PCR Master Mix (Boya ile) | 10154ES |
| 83×Taq tek enzim + Tampon ayrı | 10153ES |