Floresan kantitatif PCR, laboratuvar personeli tarafından yüksek derecede hassasiyet gerektiren oldukça hassas bir deneydir. Bu nedenle, qPCR deney süreci sırasında kaçınılmaz olarak sorunlarla karşılaşırız:
I. Deneysel olmayan faktörlerle ilgili sorunlar
- Laboratuvarda çok sayıda qPCR deney projesi bulunmakta olup, cihazlar yoğun olarak kullanılmakta, özenle hazırlanmış reaksiyon karışımları net bir bertaraf yöntemi olmaksızın bırakılmaktadır.
- Çok sayıda nicel örnek bulunmaktadır, örnek ekleme işi zordur ve baş dönmesi nedeniyle örnek ekleme hatası riski vardır, bu da güvenilir olmayan deneysel sonuçlara yol açar.
- Uzun makine çalışma süreleri, sınırlı sayıda deneysel çalışma ve deneysel görevler düzenli olarak planlandığı gibi tamamlanamamaktadır.
- Laboratuvar ekipmanları yeni cihazlarla değiştiriliyor, laboratuvarda birden fazla kantitatif cihaz bulunuyor ve kantitatif reaktifler cihazlarla uyumlu değil.
II. Deneysel faktörlerle sınırlı sorunlar
Düşük bolluktaki genlerle ilgili kantifikasyon sorunları. Karmaşık primer tasarımı ve tarama süreçleri, tekrarlanan kuyuların duyarlılığı ve tekrarlanabilirliği...
qPCR reaktiflerinin araştırma ve geliştirilmesine adanmış deneyimli bir üretici olarak YEASEN yüksek performanslı bir qPCR ön karışım çözümü titizlikle geliştirildi – Hieff UNICON™ Evrensel Mavi qPCR SYBR Yeşil Ana Karışım, yukarıda belirtilen deneysel sıkıntıları tek seferde çözebilir. Bu üründe kullanılan Universal ROX, geleneksel ROX'un yerini alır, çeşitli cihaz platformlarındaki optik yol farklılıklarını telafi eder ve tüm qPCR cihazları için uygun hale getirir. Ek olarak, ürün bir antikor modifikasyon yöntemi kullanır ve gen amplifikasyonunu geliştiren katkı maddeleri içerir, bu da ürünün amplifikasyon performansını önemli ölçüde iyileştirir. Bilimsel topluluktaki araştırmacıların yüksek performans ihtiyaçlarını endüstriyel işletmelerin yüksek verimlilik gereksinimleriyle mükemmel bir şekilde dengeler.
Ürün Özellikleri
- Geniş enstrüman uyumluluk: The ön karışım içerir A özel tip ile ilgili referans boya, ortadan kaldırarak , ihtiyaç ile ayarlamak , ROX Konsantrasyon.
- Kolay İzleme: The mavi ön karışım izin verir için doğrudan görselleştirme ile ayırt etmek ikisinden biri , örnek sahip olmak olmuş eklendi, basitçe ile gözlemleyerek , renk.
- Yüksek Kararlılık: The sistem dır tedarikli de oda sıcaklık, Ve , karışık sistem olabilmek olmak saklandı de 4°C için yukarı ile 24 saat olmadan herhangi değiştirmek içinde , test sonuçlar.
- Ani Kurmak: Uyumlu ile ikisi birden standart Ve hızlı programlar, izin vermek , nicel deney ile olmak tamamlanmış içinde gibi hızlı gibi 46 dakika.
- Harika Amplifikasyon Performans: Yüksek amplifikasyon yeterlik, iyi özgüllük, yetenekli ile ilgili tespit etmek genler de , Bekar kopyala sayı.
Sipariş Bilgileri
| Ürün Konumlandırma | Ürün Adı | Kedi# |
| Yüksek Hassasiyetli Evrensel Kantitatif Premiks | 11184TS | |
| Renk Takibi Yüksek Hassasiyet Floresan Nicel Ön karışım | 11188ES | |
| 11189TS | ||
| 11190ES |
Ürün Performansı
1. Yüksek hassasiyet: tek bir kopyayı bile tespit edebilme yeteneği
Şekil 1. Hieff UNICON™ Universal Blue ön karışımı, yüksek amplifikasyon verimliliği ve geniş bir doğrusal aralıkta iyi bir doğrusal ilişki ile 7 büyüklük sırası boyunca bir şablon miktarı aralığını etkili bir şekilde tespit edebilir. Kullanılan şablon, insan IL23R genini çoğaltan 10^6 ila 10^0 kopya konsantrasyonuna sahip 2 µL plazmiddi.
2. tespit oran Ve özgüllük vardır iyi: geniş ölçüde uygulanabilir ile amfiler ile %30-70 GC içerik
Şekil 2. Hieff UNICON™ Universal Blue ön karışımı, %30-70 GC içeriğine sahip amplimerlere yaygın olarak uygulanabilir ve son derece yüksek bir özgüllük tespit oranı sağlar. Şablon olarak 2 µL 293T cDNA kullanılarak, 200 bp amplimerler için 1000 çift primer (GC% içeriği %30-%70) Primer5 yazılımıyla tasarlandı ve bu amplimerlerin 27'si rastgele çoğaltıldı.
3. Yüksek çözünürlük: 2 katlı şablon konsantrasyonundaki farklılıkları doğru bir şekilde ayırt edebilir
Şekil 3. Hieff UNICON™ Evrensel Mavi ön karışım 2 katlı şablon konsantrasyonundaki farklılıkları doğru bir şekilde ayırt edebilir. Kullanılan şablon, GAPDH genini çoğaltan 293T cDNA stok çözeltisinin 2 µL'sinin 2 katlı gradyan seyreltmesiydi.
4.Çift kuyuların iyi tekrarlanabilirliği: 90 çift kuyu
Şekil 4. Hieff UNICON™ Universal Blue ön karışımı, 90 tekrarlı kuyunun amplifikasyon eğrilerinin yüksek çakışma ve 0,2'den daha düşük bir Ct değerleri standart sapması göstermesiyle mükemmel bir tekrarlanabilirlik sergilemektedir. Şablon olarak 1 µL 293T cDNA kullanılarak GAPDH geni çoğaltılmıştır.
5.İyi kararlılık: Ön karışım, 50 kez dondurulup çözüldükten sonra bile amplifikasyon performansında etkilenmeden kalır
| Donma-çözülme döngüleri | 0 zaman | 10 kez | 30 kez | 50 kez |
| Ortalama Ct | 23.11 | 23.17 | 23.18 | 23.25 |
| ▲Ct | - | 0,06 | 0,07 | 0,14 |
Şekil 5. Hieff UNICON™ Universal Blue ön karışımı, 50 kez dondurulup çözüldükten sonra amplifikasyon performansında hiçbir değişiklik göstermez. Şablon olarak 1 µL 293T cDNA kullanılarak, C2orf68 geni farklı sayıda dondurma-çözme döngüsü geçirmiş ön karışımla çoğaltıldı.
Müşteri Fgeri bildirim
Örnek kaynak: Fare yumurtalık kanseri hücre dizisi ID8, HM1
Örnek kaynak: Fare epididimal yağ RNA'sı
Örnek kaynak: Arabidopsis thaliana yaprak RNA'sı
YEASEN qPCR Mix kullanılarak kısmen yayınlanan yüksek etki faktörlü literatür
[1] Li Y, Wang D, Ping X, ve diğerleri. Lokal hipertermi tedavisi beyaz yağın kahverengileşmesine neden olur ve obeziteyi tedavi eder. Hücre. 2022;185(6):949-966.e19.doi:10.1016/j.cell.2022.02.004.(EĞER=66.850)
[2] Seki T, Yang Y, Sun X, ve diğerleri. Soğukla değişen küresel metabolizma tarafından kahverengi yağ aracılı tümör baskılanması. Doğa. 2022;608(7922):421-428. doi:10.1038/s41586-022-05030-3. (EĞER=69.504)
[3] Chen P, Wang W, Liu R, ve diğerleri. Koku duyusal deneyimi nöronal IGF1 aracılığıyla gliomagenezi düzenler. Doğa. 2022;606(7914):550-556. doi:10.1038/s41586-022-04719-9.(EĞER=69.504)
[4] Dong W, Zhu Y, Chang H, ve diğerleri. Bir SHR-SCR modülü, nodülasyona olanak sağlamak için baklagil korteks hücresi kaderini belirler. Doğa. 2021;589(7843):586-590. doi:10.1038/s41586-020-3016-z.(EĞER=69.504)
[5] Lu XY, Shi XJ, Hu A, ve diğerleri. Beslenme, mTORC1-USP20-HMGCR ekseni aracılığıyla kolesterol biyosentezini başlatır. Doğa. 2020;588(7838):479-484. doi:10.1038/s41586-020-2928-y.(EĞER=69.504)
[6] Bi X, Wang K, Yang L, ve diğerleri. Teleost olmayan ışın yüzgeçli balıklarda omurgalı inişinin genetik ayak izlerinin izlenmesi. Hücre. 2021;184(5):1377-1391.e14. doi:10.1016/j.cell.2021.01.046.(EĞER=66.850)
[7] Liu S, Hua Y, Wang J, ve diğerleri. RNA polimeraz III, homolog rekombinasyon yoluyla DNA çift sarmallı kırıkların onarımı için gereklidir. Hücre. 2021;184(5):1314-1329.e10. doi:10.1016/j.cell.2021.01.048.(EĞER=66.850)
[8] Liu CX, Li X, Nan F, ve diğerleri. Dairesel RNA'ların Yapısı ve Bozunumu, Doğuştan Bağışıklıkta PKR Aktivasyonunu Düzenler. Hücre. 2019;177(4):865-880.e21. doi:10.1016/j.cell.2019.03.046.(EĞER=66.850)
[9] Han X, Wang R, Zhou Y, ve diğerleri. Microwell-Seq. Cell ile Fare Hücre Atlasının Haritalanması. 2018;172(5):1091-1107.e17. doi:10.1016/j.cell.2018.02.001.(EĞER=66.850)
[10] Chai Q, Yu S, Zhong Y, ve diğerleri. Bakteriyel bir fosfolipid fosfataz, ubiquitin'i ele geçirerek konak piroptozisini engeller. Bilim. 2022;378(6616):eabq0132.doi:10.1126/science.abq0132.(EĞER=63.714)
[11] Yu Q, Liu S, Yu L, ve diğerleri. RNA demetilasyon, tarla denemelerinde pirinç ve patates bitkilerinin verimini ve biyokütlesini artırır. Nat Biotechnol. 2021;39(12):1581-1588. doi:10.1038/s41587-021-00982-9.(EĞER=68.164)
[12] Han F, Liu X, Chen C, ve diğerleri. Hiperkolesterolemi riskiyle ilişkili GPR146, insanlarda ve farelerde kan kolesterol seviyelerini düzenleyen yetim bir G-protein bağlı reseptördür. Hücre Araştırması. 2020;30(4):363-365. doi:10.1038/s41422-020-0303-z.EĞER=46.297)
[13] Wang Z, Lu Z, Lin S, ve diğerleri. Lösin-tRNA-sentaz-2 ekspresyonlu B hücreleri kolorektal kanser immüno-kaçınmasına katkıda bulunur. Bağışıklık. 2022;55(6):1067-1081.e8. doi:10.1016/j.immuni.2022.04.017.(EĞER=43.474)
[14] Bi Q, Wang C, Cheng G, ve diğerleri. Mikroglia kaynaklı PDGFB, bazal sempatik tonisiteyi baskılamak ve hipertansiyonu sınırlamak için nöronal potasyum akımlarını teşvik eder. Bağışıklık. 2022;55(8):1466-1482.e9. doi:10.1016/j.immuni.2022.06.018.(EĞER=43.474)
[15] Wang X, Ni L, Wan S, ve diğerleri. Ateşli Sıcaklık T Yardımcı 17 Hücrelerinin Farklılaşmasını ve Patojenitesini Kritik Olarak Kontrol Eder. Bağışıklık. 2020;52(2):328-341.e5. doi:10.1016/j.immuni.2020.01.006.(EĞER=43.474)
[16] Xiao J, Li W, Zheng X, ve diğerleri. 7-Dehidrokolesterol Redüktazı Hedeflemek, Enfeksiyonu Ortadan Kaldırmak İçin Kolesterol Metabolizmasını ve IRF3 Aktivasyonunu Entegre Eder. Bağışıklık. 2020;52(1):109-122.e6. doi:10.1016/j.immuni.2019.11.015.(EĞER=43.474)
[17] Zhang X, Zhang C, Qiao M, ve diğerleri. CAR-T hücrelerinde BATF'nin tükenmesi, tükenmeye karşı direnci ve merkezi hafıza hücrelerinin oluşumunu teşvik ederek antitümör aktivitesini artırır. Kanser Hücresi. 2022;40(11):1407-1422.e7. doi:10.1016/j.ccell.2022.09.013.(EĞER=38.585)
[18] Wang XY, Wei Y, Hu B, ve diğerleri. c-Myc tarafından yönlendirilen glikoliz, patojenik inflamatuar yanıtları tetikleyen işlevsel düzenleyici B hücrelerini polarize eder. Sinyal Transdukt Hedefi Ther. 2022;7(1):105. 2022 Nisan 18'de yayımlandı. doi:10.1038/s41392-022-00948-6.(EĞER=38.104)
[19] Fan H, Hong B, Luo Y, ve diğerleri. Peynir altı suyu proteininin SARS-CoV-2 ve pangolin koronavirüsünün in vitro viral enfeksiyonu ve replikasyonu üzerindeki etkisi. Sinyal Transdüktüsü Hedefi Ter. 2020;5(1):275. 24 Kasım 2020'de yayımlandı. doi:10.1038/s41392-020-00408-z.EĞER=38.104)
[20]Ren Y, Wang A, Wu D, ve diğerleri. İnsan sitomegalovirüs proteini UL37x1 tarafından doğuştan gelen bağışıklık ve apoptozun ikili inhibisyonu, virüsün etkili bir şekilde çoğalmasını sağlar. Nat Microbiol. 2022;7(7):1041-1053. doi:10.1038/s41564-022-01136-6.(EĞER=30.964)