Hieff UNICON™ ColorGPS qPCR Master Mix (No Rox), yüksek floresan yoğunluğu, yüksek hassasiyet ve özgüllük ve yüksek amplifikasyon verimi sunan 2×gerçek zamanlı kantitatif PCR amplifikasyonu için bir ön çözeltidir. Çekirdek bileşen olan Hieff UNICON™ Taq DNA Polimerazı, numune hazırlama sırasında primer tavlamasından kaynaklanan spesifik olmayan amplifikasyonu etkili bir şekilde engelleyebilen antikor yöntemi ile sıcak başlatılır. Aynı zamanda formül, PCR reaksiyonunun amplifikasyon verimliliğini artıran faktörler ve farklı GC içeriklerine sahip genlerin (30~70%) amplifikasyonunu eşitleyen kolaylaştırıcılar ekler, böylece kantitatif PCR geniş bir kantitatif bölge aralığında iyi bir doğrusal ilişki elde edebilir. Ürün, pipetleme işlemini izlemek için farklı boyaların karışık renk değişim reaksiyonunu kullanır ve bu da pipetleme hatalarının oluşumunu etkili bir şekilde azaltır.

Özellikler

Pipetleme Takibi: Kaçırılan/Eklenen Hataların Riskini Azaltın

Mükemmel Amplifikasyon: Geniş bir doğrusal aralıkta iyi doğrusallık

Yüksek Hassasiyet: 2 kat konsantrasyon farkına sahip şablonları doğru bir şekilde ayırt edebilir

İyi Tekrarlanabilirlik: Tekrarlanan kuyularda küçük kuyular arası değişkenlik, daha iyi tekrarlanabilirlikle sonuçlanır

Kararlı ve Güvenilir: Reaksiyon sistemi oda sıcaklığında 24 saat saklanabilir ve ürün 20 dondurma-çözme döngüsünden sonra bile etkilenmez.

Uygulamalar

Gen İfadesi Fark Analizi

Mutlak Kantitatif Analiz

Özellikler

Bileşenler

Nakliye ve Depolama

Bu ürün -25~-15℃'de 1 yıl süreyle saklanmalıdır.

Rakamlar

Şekil 1. Dinamik aralıkta güvenilir sonuçlar elde edilebilir.

10^1-10^7 gradyanlı 2 µL plazmit şablonu kullanılarak ilgili genler çoğaltıldı. Hieff UNICON™ ColorGPS ana karışımı, geniş bir doğrusal aralıkta iyi bir doğrusallık elde ederek, 7 büyüklük mertebesindeki bir şablon miktarı aralığını etkili bir şekilde tespit edebilir.

Figür2. 2 katlı şablon konsantrasyon farklılıklarını doğru bir şekilde ayırt edebilir.

Şablon olarak 2 katlı bir gradyanda seyreltilmiş 2 µL plazmid kullanılarak ilgili genler çoğaltıldı. Hieff UNICON™ ColorGPS ana karışımı şablon konsantrasyon farklılıklarını doğru bir şekilde çözebilir.

Figür3. Kuyular arası küçük değişkenlik gözlendi ve bu da daha iyi tekrarlanabilirliği gösterdi.

Şablon olarak düzinelerce plazmid kopyası kullanılarak, ilgili kullanım kılavuzlarında belirtilen prosedürlere göre farklı floresan kantitatif reaktiflerle amplifikasyon gerçekleştirildi. SD değerleri, diğer ters transkripsiyon reaktifleriyle karşılaştırıldığında, yeni ürünün tekrar kuyuları arasında daha küçük farklara ve daha iyi tekrarlanabilirliğe sahip olduğunu göstermektedir.

Figür4. Daha esnek, standart veya hızlı prosedürlere uygundur.

Standart prosedürde denatürasyon süresi ve ekstansiyon süresi sırasıyla 10 saniye ve 30 saniyeye ayarlanırken, hızlı prosedürde ise 10 hedef gene karşılık gelen Ct değerlerini saptamak için denatürasyon süresi ve ekstansiyon süresi sırasıyla 3 saniye ve 10 saniyeye ayarlanmaktadır.Sonuçlar, yeni ürünle hem standart hem de hızlı prosedürlerde elde edilen Ct değerlerinin güçlü bir korelasyona sahip olduğunu ve yeni ürünün hızlı prosedür kullanılarak iyi sonuçlar elde edebileceğini göstermektedir.

Figür5Reaksiyon sistemi hazırlandıktan sonra oda sıcaklığında 24 saat stabil kalabilmektedir.

Fare, insan 293 hücreleri ve Arabidopsis thaliana'dan farklı genler hedef olarak kullanılarak, reaksiyon sistemi hazırlandıktan sonra tespitten önce 24 saat boyunca farklı sıcaklıklarda karanlıkta bekletildi. Hemen işleme kıyasla, farklı genler için tespit farkı 0,5 Ct'yi geçmez, bu da uzun süreli işlemlerle de kararlı sonuçların elde edilebileceğini gösterir.

Dbelgeler:

Kılavuzlar

11188_Manuel_Sürüm EN20241218.pdf