Çok parçalı veya çok uzun parçalı homolog rekombinasyonun düşük verimliliğinden ve koloni sayısının az olmasından hala rahatsız mısınız?
Taşıyıcı veya parça için hala daha kıymetli, verimi düşük, hammadde tasarrufu sağlamak amacıyla, düşük konsantrasyonlu küçük sistem ligasyon kullanımı, ancak ligasyon verimi düşük ve rahatsız edici mi?
YEASEN ürünü: Önemli ölçüde geliştirilmiş, düşük konsantrasyon, küçük sistem ve ligasyon verimliliğinin ultra uzun parçaları, yüksek pozitif klonlama oranı, kolayca tamamlamanıza yardımcı olur ligasyon.

Tek adımlı klonlamanın geleneksel enzim kısıtlamalı klonlama yöntemleriyle karşılaştırılması
Yöntem | Yerleştirme parçasının hazırlanması | Kısıtlama alanlarının kısıtlanması | Evrensel mülkiyet | Bağlantı zamanı | Pozitif oran |
Tek adımda hızlı rekombinant klonlama tekniği | Adım 1 arıtma | Hiçbiri | ★★★★★ | En hızlı süre 5 dakikaydı | %95'e kadar |
Kısıtlama sindirimi ve ligasyon klonlama tekniği | Adım 2 arıtma | Evet | ★★ | geceyi geçirmek | Farklı genler büyük ölçüde farklılık gösterir |
Ürün Avantajı
Oryantasyon: 1-7 DNA parçasının tek adımda klonlanması.
Basit: Birden fazla parça tek bir tüpe bağlanabilir.
Hızlı: 5 dakikada en hızlı ligasyon.
Yüksek verim: Yüksek pozitif klonlama oranı.
Küçük sistem: Toplam ligasyon sistemi 6 μL kadar düşük olabilir.
Aşırı Uzunluk: Ligasyon için 25 kb'nin (Taşıyıcı+fragman uzunluğu) üzerinde.
Performans Görüntülemek
- Tek bir parçanın 6 μL küçük sisteminin verimli rekombinasyonu

Şekil 1 10 ng düşük girişli tek fragman bağlandı 6 μL küçük sistemin resüsitasyon yapılmayan alıcı hücreler durumunda.Sonuçlar, 10923ES'nin yüksek ligasyon verimliliği, daha fazla koloni ve %100 pozitif oranıyla rakip ürünlerden daha iyi performans gösterdiğini gösterdi. AB: Yeniden oluşturulmuş dönüşüm plakası. Taşıyıcının (10 kb) ek parçaya (1 kb) molar oranı 1:2 idi. C: Ek parçanın PCR ile tanımlanması. M: YEASEN 10505ES. Taşıyıcı hacmi: 40 ng/6 μL Reaksiyon sistemi, reaksiyon koşulları: 50℃, 15 dk.
- Çok parçalı verimli rekombinasyon

Şekil 2 Altı parça (7.6 kb) bağlandı. Sonuçlar 10923ES'nin daha fazla koloni ve %100 pozitif oranıyla rakip ürünlerden daha iyi performans gösterdiğini gösterdi. AB: Yeniden oluşturulmuş dönüşüm plakası. Taşıyıcının (11,6 kb) ek parçaya (7,6 kb) molar oranı 1:2 idi. C: Ek parçanın PCR ile tanımlanması. M: YEASEN 10505ES, PCR uzunluğu 2,6 kb. Taşıyıcı hacmi: 200 ng/20 μL Reaksiyon sistemi, reaksiyon koşulları: 50℃, 50 dk.
- Düşük konsantrasyonlu çok parçalı verimli rekombinasyon

Şekil 3 Düşük konsantrasyonlu beş ve altı parçayı ayrı ayrı bağlayın. Sonuçlar, 10923ES'nin düşük konsantrasyonlarda, yüksek bakteri sayısı ve %100 pozitiflik oranıyla kararlı bağlantı gösterdiğini gösterdi. AB: Rekombinant Dönüşüm Plakası. CD: Ekleme parçası PCR tanımlama elektroforezi görüntüsü, M: YEASEN 10505ES, PCR uzunluğu 2,6 kb.
- Reaktif Stabilitesi

Şekil 4 37℃'de 7 gün bekletildikten sonra elde edilen sonuçlar, 10923ES'in düşük konsantrasyonlarda beş ve altı parçayı birbirine bağlamada stabil kaldığını gösterdi. AF: Rekombinant Dönüşüm Plakası. GH: Ekleme parçası PCR tanımlama elektroforezi görüntüsü, M: YEASEN 10505ES, PCR uzunluğu 2,6 kb.
Müşteri Davası
-
Küçük sistemlerin etkin bir şekilde yeniden düzenlenmesi

Şekil 5 10923ES, tek bir parçaya bağlandı 10 μL küçük reaksiyon sistemi, %100 pozitif oranıyla. A: Yeniden oluşturulmuş dönüşüm plakası. B: Ekleme parçasının PCR ile tanımlanması. Taşıyıcı boyutu: 5.631 bp; Hedef parça boyutu: 1.384 bp.

Şekil 6 10 μL Küçük sistem tek parçalı bağlantı ve nokta mutasyon klonu, %100 pozitif oran. A ve C: Rekombinasyon dönüşüm plakaları. B: Ekleme parçalarının PCR tanımlaması, şeritler 1-5 koloni 1, koloni 2, negatif kontrol, pozitif kontrol (şablon olarak genom), pozitif kontrol (şablon olarak PCR ile saflaştırılmış parça). D: Ekleme parçalarının PCR tanımlamasının elektroforegramı.
-
Düşük konsantrasyonlu kısa parçaların verimli rekombinasyonu

Şekil 7 10923ES, bağlantı düşük konsantrasyonlu parçalar. Rekabetçi ürünlerle karşılaştırıldığında, koloni sayısı yüksekti ve pozitif oran (10 / 11) > %90,9 idi. AB: Yeniden oluşturulmuş dönüşüm plakası. C: Ekleme parçasının PCR ile tanımlanması. Taşıyıcı boyutu: 3.000 bp; hedef parça boyutu: 441 bp.
-
Verimli ve hızlı çok segmentli ligasyon

İncir.8 10923ES dört segment ligasyonu, yüksek GC ve kısa segment kombinasyon bağlantısı, S markasına kıyasla, 10923ES'nin daha yüksek bakteri sayısına ve %100 pozitif orana sahiptir. D: Rekombinant dönüşüm tableti. E: Parça dizileme tanımlama haritasını ekle. F: Sanger dizilemesi vektör ve parçalar arasındaki başarılı bağlantıyı doğruladı ve bağlantı yerindeki dizileme doğruydu.
Strength Star Ürün Önerisi
10923ES Sipariş Kanalı
Ürün Odaklılık | Namin | Sanat No | Sözellikler |
1 – 7 parça bir adımda birleştirildi ve rekombinasyon reaksiyonu en hızlı 5 dakikada tamamlandı | Hieff KlonuT.M. Universal II Tek Adımlı Klonlama Kiti | 20T/50T |
Rsevinçli Pürünler
Ürün yönelimi | Namin | Sanat No | Sözellikler |
Yüksek doğruluklu PCR | 2× Yüksek KanaceT.M. AdvanceFast PCR Master Mix (Boya ile) | 1 mL/5×1 mL | |
Hızlı PCR yükseltmesi, koloni PCR'si olabilir ve karmaşık şablon amplifikasyonu için uygundur | 2×YüksekT.M. Ultra-Hızlı II HotStart PCR Ana Karışımı | 1 mL/5×1 mL |