HiActi™ Kültürlenmiş Organoidlerde Doğrulanan Sitokinler

2021 yılında organoidler, "14. Beş Yıllık Plan" ulusal anahtar araştırma ve geliştirme planının anahtar projesi olarak listelenecektir. Organoidler çok popüler ve bunları elde etme yöntemi de ilgi odağı haline geldi. Farklı organoidler, kültür sırasında farklı sitokinlere ihtiyaç duyar. Belirli sinyal yollarını destekleyen veya engelleyen sitokinler eklenerek kök hücrelerin istenen organoidlere farklılaşması sağlanabilir. Organoid kültüründeki en klasik sitokin kültür protokolü WNER'dir (sırasıyla: Wnt-3a, Noggin, EGF ve R-Spondinler) ve bu 4 faktörün artış veya azalış kombinasyonu hemen hemen tüm organoid kültür deneylerine uygulanabilir.

Organoid kültüründe yaygın olarak kullanılan sitokinler

R-Spodin 1

İşlev: R-Spodin 1, Rspo1-4 olmak üzere 4 üyeyi içeren Wnt düzenleyicilerinin Rspo ailesine aittir. Bu aile, birden fazla organda yetişkin kök hücreleri koruyan bir mikroçevre faktörüdür. RSPO1 salgılanan bir aktivatör proteindir. Rspo-1, gelişmekte olan merkezi sinir sisteminin belirli bölgelerinde ifade edilir ve ayrıca adrenal bez, yumurtalık, testis, tiroid ve trakeada bulunur.

Wnt sinyal yolunun bir aktivatörü olarak Rspo1, Wnt sinyallemesini artırarak birçok açıdan rol oynar. Gastrik epitel organoidleri, ince bağırsak ve kolon organoidleri, karaciğer organoidleri, prostat organoidleri, pankreas organoidleri ve meme organoidleri için yaygın olarak kullanılan bir büyüme ortamıdır. faktör.

Wnt-3a

İşlev: Wnt-3a, sinyal proteinlerinin Wnt ailesine aittir ve embriyonik ve yetişkin dokuların bütünlüğünün korunmasında önemli bir rol oynar. Wnt ailesi oldukça korunmuştur ve sistein açısından zengindir. Wnt'ler, hücre zarı reseptörlerine ve/veya bitişik hücre zarı reseptörlerine bağlanarak Wnt sinyal yolunu aracılık eder. Wnt sinyal yolu, kanonik yol ve kanonik olmayan yol olarak ikiye ayrılabilir, biri Wnt1, Wnt2, Wnt2b, Wnt3, Wnt3a, Wnt7a, Wnt8, Wnt8b ve Wnt10a dahil olmak üzere β-katenin tarafından aracılık edilen kanonik sinyal yolunda yer alır; diğeri ise Wnt4, Wnt5a, Wnt6 ve Wnt11 dahil olmak üzere β-katenin'e bağımlı kanonik olmayan sinyal yollarıdır. Wnt ailesinin en temsili sinyal proteini olan Wnt3a, yaygın bir dağılıma sahiptir ve kendini yenileme, çoğalma, farklılaşma ve hareketlilik gibi çok sayıda hücresel fonksiyonun düzenlenmesinde önemli bir rol oynar.

EGF

İşlev: EGF, kültürde çoklu epitel gelişimi, anjiyogenezi, gastrik asit salgılanmasının inhibisyonunu, fibroblast proliferasyonunu ve epidermal hücrelerin koloni oluşumunu uyaran güçlü bir büyüme faktörüdür. EGF, TGF-α, iki düzenleyici protein (AR), β-hücre proteini (BTC), epidermal protein (EPR), heparin bağlayıcı EGF benzeri büyüme faktörü (HB-EGF), Epiproteinler ve neuregulinler (NRG1-6)'i de içeren EGF ailesinin kurucu üyesidir. Fizyolojik olarak EGF, kan, süt, idrar, tükürük, meni, pankreas suyu, beyin omurilik sıvısı ve amniyon sıvısı dahil olmak üzere çeşitli vücut sıvılarında bulunur. EGF, EGF reseptörü (ErbB) için yüksek afiniteli bir liganddır. EGF, EGF reseptörüne bağlanır ve dimerizasyonunu başlatır, bu da protein tirozin kinaz sinyal yolunun aktivasyonuna yol açar ve böylece EGF ailesi sinyalini iletir.

Kafa

İşlev: Noggin, TGF-β ailesi ligandlarını inhibe edebilir ve bunların ilgili reseptörlere bağlanmasını önleyebilir.Noggin başlangıçta BMP-4'ün bir antagonisti olarak keşfedildi ve daha sonra diğer BMP'lerin (BMP-2, 7, 13 ve 14) aktivitesini modüle ettiği gösterildi. Noggin omurgalılar arasında oldukça korunmuştur. Salgılanan Noggin proteinleri gelişim sırasında kemik morfogenetik proteinlerinin aktivitesini düzenler. BMP sinyalleme antagonisti Noggin'in prostat kanserinden kaynaklanan osteolitik kemik metastazlarının gelişimindeki rolü.

bFGF/FGF-2

İşlev: bFGF, mitogenik proteinlerin FGF süper ailesinin bir üyesidir. Birçok hücre tipi için oldukça spesifik bir kemotaktik ve mitogenik faktördür ve ülser iyileşmesi, vasküler onarım, travmatik beyin hasarı gibi hasarlı dokuların yeniden şekillenmesinde rol oynuyor gibi görünmektedir. bFGF, insan embriyonik kök hücre kültür ortamının önemli bir bileşenidir. Dahası, bFGF proteini, anjiyogenez ve katı tümörlerin büyümesi dahil olmak üzere çeşitli patolojik durumlarda rol oynayan heparin bağlayıcı bir katyonik proteindir. Bu nedenle, bFGF kanser kemoprevansiyonu ve tedavi stratejileri için bir hedef olarak kabul edilir. bFGF, insan embriyonik kök hücre kültür ortamı, serumsuz kültür sistemi gibi hücre kültür ortamının önemli bir bileşeni olarak sıklıkla kullanılır.

FGF-10

İşlev: Fibroblast büyüme faktörü 10 (FGF-10), FGF ailesine ait bir heparin bağlayıcı büyüme faktörüdür. Bu ailenin proteinleri, hücre çoğalmasını ve farklılaşmasını teşvik ederek çeşitli dokuların doğum öncesi gelişiminde, doğum sonrası büyümesinde ve rejenerasyonunda merkezi roller oynar. FGF-10, mezenkimal hücreler tarafından salgılanır ve hücre dışı FGF-BP'ye bağlanır, FGF-10 tercihen epitel FGF R2'ye (IIIb) bağlanır ve onu aktive eder ve FGF R1 (IIIb) ile zayıf bir şekilde etkileşime girer.

Qkalite yönetim sistemi ile ilgili HiActi™ sitokin

Kalite Yönetim Sistemi

• ISO 13485:2016 sertifikalı sitokinler, proteinlerin temizliğini ve stabilitesini garanti altına almak için tamamen kapalı, ultra temiz bir üretim süreciyle üretilir.
• "İlaçlar İçin İyi Üretim Uygulamaları" sistemine uyun
• Onay Kalite Belgesine (COA) sahip olun
• Aseptik teknoloji ve ikincil sterilizasyon filtrasyonu
• İlaç hammaddesi üretim üssü

Kalite Güvence Yönetimi

• Yönetim personeli eğitim sisteminden özel kişi sorumludur
• Ekipman bakım ve kalibrasyon prosedürlerini oluşturun
• Hammadde ve tedarikçi yönetim sistemi
• Tam parti üretim kayıtları, parti muayene kayıtları, paketleme kayıtları vb.
• Kalite belge kayıtları QA tarafından denetlendi ve incelendi
• Tam parti üretim ve muayene kayıtları
• Analitik yöntemlerin doğrulanması

Kalite Kontrol Sistemi

• Çin Halk Cumhuriyeti Farmakopesi'nin 2020 baskısının üçüncü genel kuralına uyun: Biyolojik ürün üretiminde kullanılan hammaddelerin ve yardımcı maddelerin kalite kontrolü

Organoid Kültür Doğrulaması

Yeasen Sitokinlerin, akciğer kanseri, rahim ağzı kanseri, yumurtalık kanseri, pankreas kanseri ve bağırsak kanseri gibi insan tümör organoidleri ile insan ve fare ince bağırsak organoidleri gibi normal organoidlerde doğrulandığı görülmüştür.

İlgili ürün bilgisi