Protein saflaştırma, biyokimya ve moleküler biyolojide temel bir tekniktir ve araştırma, teşhis ve tedavi uygulamalarında yaygın olarak kullanılır. Belirli bir proteini incelemek için ilk adım, onu biyolojik örneklerden izole etmek ve saflaştırmaktır. Ancak, proteinlerin çeşitliliği ve biyolojik sistemlerin karmaşıklığı göz önüne alındığında, yüksek saflıkta protein elde etmek zor olabilir. Protein saflaştırmanın temel prensiplerini anlamak ve araştırmanız için doğru teknikleri seçmek, iş akışınızın verimliliğini ve verimini büyük ölçüde artırabilir.
Protein Saflaştırmanın Temelleri
Protein saflaştırma, proteinlerin fiziksel ve kimyasal özelliklerindeki farklılıklara dayanır; örneğin boyut, yük, hidrofobisite ve belirli ligandlara karşı afinite. Araştırmacılar bu farklılıklardan yararlanarak hedef proteinleri diğer biyolojik bileşenlerden etkili bir şekilde ayırabilir ve kontaminasyonu en aza indirebilir.
Farklı ayırma mekanizmalarına dayalı birincil protein saflaştırma teknikleri şunlardır:
| Jel Filtrasyon | İyon Değişimi | Hidrofobik etkileşim | Yakınlık |
Ayırma Mekanizması | Boyut | Protein Yüzey Yükü | Hidrofobisite | Belirli yakınlık |
Seçicilik | Orta | Yüksek | Yüksek-Orta | Çok Yüksek |
Yük Kapasitesi | Düşük | Yüksek | Yüksek | Yüksek |
Arıtma Hızı | Orta-Düşük | Yüksek | Yüksek | Yüksek |
Biyouyumluluk | Çok güzel | İyi | Orta-İyi | İyi |
Hedef Protein Verimi | Yüksek | Yüksek | Orta-Yüksek | Yüksek |
Bu tekniklerin her biri, uygun malzemeler ve kolonlar seçilerek optimize edilebilir. İdeal yöntem, proteinin özelliklerine ve sonraki uygulamalar için gereken saflık seviyesine bağlıdır.
Y ile Protein Saflaştırma İş Akışınızı Optimize Etmekolaylaştırmak Biyoloji Ürünleri
Şu anda Yeasen Biyoloji, protein saflaştırmasını kolaylaştırmak için tasarlanmış geniş bir yelpazede yüksek kaliteli reaktifler ve malzemeler sunuyoruz. Karmaşık biyolojik numunelerle mi uğraşıyorsunuz yoksa yüksek verimli, yüksek saflıkta proteinlere mi ihtiyacınız var, saflaştırma sürecinizi geliştirmek için araçlar sunuyoruz. Saflaştırma iş akışlarınızı optimize etmenize yardımcı olacak bazı temel ürünlerimize genel bir bakış:
Etiket protein saflaştırması (Kedi#20502ES):
Rekombinant protein ifadesinde, Onun etiketi (tipik olarak 6×His) küçük boyutu, düşük immünogenitesi ve protein fonksiyonu üzerindeki minimal etkisi nedeniyle yaygın olarak kullanılır. Etiket proteinleri, Ni-NTA reçineleri gibi nikel iyonlarıyla şelatlanmış afinite reçineleri tarafından etkili bir şekilde saflaştırılabilir. HisSep Ni-NTA Agaroz Reçinesi (Cat#20502ES) Y tarafından sağlanmıştırkolaylaştırmak Biyoloji matris olarak yüksek oranda çapraz bağlı agaroz jelini, kararlı nikel iyon şelatları oluşturmak için dörtlü koordineli nitrojen-triasetik asit (NTA) ligandı ile birleştirir. Kombine yapı, verimli protein bağlanması ve elüsyon performansı sağlar.
Etiket antikor afinitesi saflaştırması
Etiket antikorlarının afinite saflaştırması, füzyon proteininin saflaştırılmasını sağlamak için antikor ile onun spesifik etiketi arasındaki yüksek spesifik bağlanmayı kullanır. Yaygın etiketler şunları içerir: Bayrak, HA, Myc, vb. İlgili antikor afinitesi ortamının kullanılmasıyla, ilgi duyulan protein karmaşık örneklerden verimli bir şekilde izole edilebilir.
Yeasen Biyoloji çeşitli etiket antikor afinitesi saflaştırma ürünleri sağlar:
- Bayrak Karşıtı Yakınlık Jel (Kedi#20584ES):
%4 yüksek çapraz bağlı agar jel ile yüksek kaliteli fare IgG2b monoklonal antikorundan hazırlanmıştırugh tedarik bağlantısı, yüksek bir Bayrak-etiket füzyon protein yükleme kapasitesine sahiptir, suFlag-tag proteinlerinin immünoçöktürülmesi ve saflaştırılması için uygundur. yeasen.com
- Anti-HA Affinite Jeli(Kedi#20586Türkçe):
Yüksek kaliteli fare IgG1 monoklonal antikoru ve Sepharose 4B jelinden besleme kuplajı yoluyla hazırlanan, HA-etiketli füzyon proteinlerinin yüksek yükleme kapasitesine sahip olup, HA-etiketli proteinlerin immünopresipitasyonu ve saflaştırılması için uygundur.com
- Anti-Myc Affinity Jel(Kedi#20587Türkçe):
Yüksek kaliteli fare IgG1 monoklonal antikoru, yüksek özgüllük ve yüksek bağlanma kabiliyetine sahip, Myc etiketli proteinlerin saflaştırılması için tasarlanmış Sepharose 4B jel ile birleştirilmiştir.
- Anti-Bayrak İmmünomanyetik Boncuklar(Kedi #20565ES):
Bu immünomanyetik boncuk, manyetik alanların etkisi altında Flag etiketli proteinleri hızla saflaştırabilen ve küçük örnek boyutlarının saflaştırılması için uygun olan yüksek kaliteli fare kaynaklı IgG2b monoklonal antikoru kullanan manyetik agar mikrokürelerle birleştirilmiştir.
Antikor afinitesi saflaştırması (Cat#36401ES):
Antikor afinitesi saflaştırması protein saflaştırması için bir antikorun antijenine özgül bağlanmasını kullanma yöntemidir. Alkali dirençli rekombinant protein A agaroz saflaştırma reçinesi (Cat#36401ES) yaygın olarak bir antikor afinitesi saflaştırma ortamı olarak kullanılır ve antikor saflaştırma ve zenginleştirme için yaygın olarak kullanılır.
Proteinaz
Protein çalışmalarında, proteazlar füzyon etiketlerini kesmek ve hedef proteinin doğal halini geri kazandırmak için kullanılır. Bu proteazları protein saflaştırma iş akışınıza dahil etmek, hedef proteinlerinizin kalitesini ve işlevselliğini artırabilir ve ileri araştırma ve geliştirme projelerini kolaylaştırabilir.
- Rekombinant Enterokinaz (Kat#20401ES):
Enterokinaz, enteropeptidaz olarak da bilinir, DDDDK amino asit dizisinden sonra özel olarak kesen bir serin proteazdır. Yeasen'in rekombinant enterokinazı şu şekilde ifade edilir: Escherichia coli ve etiketlerden arındırılmış olup, aşağı akış uygulamalarına müdahale etmemesini sağlar. Bu enzim, rekombinant proteinlerden füzyon etiketlerini çıkarmak için idealdir ve yapısal ve işlevsel çalışmalar için doğal proteinlerin üretimini kolaylaştırır.
- benPNGase F (Kat#20407ES):
PNGase F, N-bağlı glikoproteinlerin en içteki GlcNAc ve Asn kalıntıları arasında özel olarak kesen bir amidazdır. Yeasen'in PNGase F'si 100.000 U/mL konsantrasyonda sağlanır ve deglikozilasyon reaksiyonları için yüksek aktivite sunar. Bu enzim, peptit omurgasını etkilemeden N-bağlı glikanları uzaklaştırdığı için glikoprotein yapılarını ve işlevlerini incelemek için çok önemlidir.
- Rekombinant Tripsin (MS-SAFE) (Kat#20416ES):
Tripsin, lizin ve arginin kalıntılarının karboksil tarafındaki peptit bağlarını kesen bir serin proteazdır. Yeasen'in rekombinant tripsini MS-SAFE'dir, yani yüksek saflığı ve minimal otolitik aktivitesi nedeniyle kütle spektrometrisi uygulamaları için uygundur. Bu enzim, kütle spektrometrisi analizi için protein sindirimi de dahil olmak üzere proteomik çalışmalar için idealdir.
Arınma Yöntem | Reaktif Türü | Ürün Türü | Önerilen Ürünler |
Jel Filtrasyon | Dekstran Jel Kromatografi | Tuzdan Arındırıcı Dolgular Önceden Paketlenmiş Kolonların Tuzdan Arındırılması Tuzdan Arındırma Yerçekimi Kolonları Spin Kolonları
| Tuz Giderme Kolonu G25 M(Kedi #20590ES) Spin Tuz Giderme Kolonu, 0,5 mL (Kedi#20599ES) Yerçekimi Tuz Giderme Kolonu, 8.3 mL (Kedi#20741ES) |
Agaroz Jel Kromatografi | Dolgu maddesi Önceden paketlenmiş kolonlar | Geldex 200 PG Yüksek Çözünürlüklü Agaroz Jel Kromatografi Paketleme (10-600 kDa) (Kat#20598ES) Geldex 200 PG Kromatografi Kolonu (Kedi#20593ES) | |
İyon Değişimi | Anyonik Değişim Kromatografi | Dolgu maddesi Önceden paketlenmiş kolonlar | Q Agaroz HP (Q Güçlü Anyon Değişim Kromatografisi Paketleme HP) (Kat#20460ES) Q HP Güçlü Anyon Değişimi Önceden Paketlenmiş Kolon, 5 mL (Kat#20462ES) |
Katyonik Değişim Kromatografisi | SP Agaroz HP (SP Güçlü Katyon Değişim Kromatografisi Paketleme HP) (Cat#20463ES) SP HP Güçlü Katyon Değişimi Önceden Paketlenmiş Kolon, 5 mL (Cat#20465ES) | ||
Hidrofobik Etkileşim Kromatografisi | Zayıf hidrofobik Kromatografi | Dolgu maddesi Önceden paketlenmiş kolonlar | Yüksek Çözünürlüklü Butil Zayıf Hidrofobik Kromatografi Ortamı (Cat#20484ES) Butil HP Zayıf Hidrofobik Kromatografi Önceden Yüklenmiş Kolon, 5 mL (Cat#20485ES) |
Güçlü hidrofobik Kromatografi | Yüksek Çözünürlüklü Fenil Güçlü Hidrofobik Kromatografi Ortamı (Cat#20486ES) Fenil HP Güçlü Hidrofobik Kromatografi Önceden Yüklenmiş Kolon, 5 mL (Cat#20487ES) | ||
Afinite Arıtma | Onun etiketi Protein Saflaştırma | Reçine Önceden paketlenmiş kolonlar Arıtma Manyetik Boncukları
| His-tag Protein Agaroz Saflaştırma Reçinesi (Kedi #20502ES) His-tag Protein Saflaştırma Önceden Yüklenmiş Kolon, 5 mL (Kat#20504ES) His-tag Protein Saflaştırma Manyetik Boncukları (Cat#20561ES) |
GST-etiket Protein Saflaştırma | Reçine Önceden paketlenmiş kolonlar Arıtma Manyetik Boncukları
| Glutatyon Agaroz Reçinesi (GST etiketli protein saflaştırması için) (Kat#20507ES) GST Etiketli Protein Saflaştırma Önceden Yüklenmiş Kolon, 5 mL (Kat#20510ES) GST Etiketli Protein Saflaştırma Manyetik Boncukları (Cat#20562ES) | |
MBP-etiket Protein Saflaştırma | Reçine Önceden paketlenmiş kolonlar
| MBP-Etiketli Protein Yüksek Çapraz Bağlı Saflaştırma Reçinesi (Cat#20515ES) MBP Etiketli Protein Saflaştırma Önceden Yüklenmiş Kolon, 5 mL (Cat#20517ES) | |
Boğaz ağrısı(Ⅱ) Etiket Protein Saflaştırma | Reçine Önceden paketlenmiş kolonlar
| Strep(II) Etiketli Protein Agaroz Saflaştırma Reçinesi (Cat#20495ES) | |
Biyoti-etiket Protein Saflaştırma | Reçine Önceden paketlenmiş kolonlar İmmünomanyetik Boncuklar | Streptavidin Agaroz Saflaştırma Reçinesi (Kat#20512ES) Biyotin Moleküler Saflaştırma Önceden Yüklenmiş Kolon, 5 mL (Kat#20514ES) Streptavidin (SAV) İmmünomanyetik Boncuklar (Cat#47503ES) | |
Etiket Antikor Afinitesi Saflaştırması | Jel İmmünomanyetik Boncuklar | Anti-Flag Affinity Arıtma Jeli (Kedi #20584ES) Anti-HA Afinite Arıtma Jeli (Kedi #20586ES) Anti-Myc Affinity Arıtma Jeli (Kedi #20587ES) Anti-Bayrak İmmünomanyetik Boncuklar (Kedi #20565ES) | |
Antikor Afinite Saflaştırması | Reçine Önceden paketlenmiş kolonlar İmmünomanyetik Boncuklar | Rekombinant Protein A Agaroz Saflaştırma Reçinesi (Kedi#36401ES) Protein G Agaroz Saflaştırma Reçinesi (Cat#36405ES) Protein A/G Agaroz Saflaştırma Reçinesi (Cat#36403ES) Protein A/G İmmünomanyetik Boncuklar (Kedi#36417ES) | |
Diğer Antikor Afinitesi Saflaştırması | Reçine Önceden paketlenmiş kolonlar
| Endotoksin Yüksek Verimlilikli Giderme Arıtma Reçinesi (Cat#20518ES) Heparin Afinite Saflaştırma Ortamı (Cat#20493ES) | |
Yeni Üye | Proteazlar | Etiket Parçalayıcı Enzimler Glikozidazlar Kütle Spektrometrisi Sınıfı Enzimler | E.coli Ekspresyonlu Rekombinant Enterokinaz (etiketsiz) (Kedi #20401ES) Sığır Trombini (Yüksek Canlılık, >2000 IU/mg) (Kat#20402ES) rTEV Proteaz Rekombinant Tütün Aşındırma Virüsü Proteazı (Cat#20403ES) PNGase F, N-Glikozidaz F (100000 U/mL) (Kedi #20407ES) Rekombinant Tripsin (MS-SAFE) Rekombinant Tripsin (Kütle Spektrometrisi Sınıfı) (Kedi #20416ES) |
Kromatografi Sarf Malzemeleri | Yerçekimi Akışı Boş Sütunlar Boş Sütunlar türü YXK Sütunları Diyaliz Torbaları | 12 mL Yerçekimi Kromatografisi Boş Kolonu (Kat#20523ES) 5 mL Tip C Boş Kolon (Akata, şırınga veya peristaltik pompaya bağlı) (Cat#20526ES) YXK16/70 Kromatografi Boş Kolon (Kat#20443ES) 27 mm diyaliz torbası (MWCO 50 kDa) (Cat#20534ES) |
Sonuç: İş Akışınızı İhtiyaçlarınıza Göre Düzenleyin
Protein saflaştırma iş akışınızı optimize etmek, araştırmanız veya uygulamanız için yüksek saflıkta, yüksek verimli proteinler elde etmek için çok önemlidir. Saflaştırma prensiplerini anlayarak ve doğru araçları seçerek, sürecinizi kolaylaştırabilir ve yaygın tuzaklardan kaçınabilirsiniz. Yeasen Biology, protein saflaştırmasının tüm aşamaları için en yüksek kalitede reaktifler ve sarf malzemeleri sağlayarak proteinlerinizin saf, işlevsel ve analize hazır olmasını sağlar.
Ürünlerimizin protein arıtma sürecinizi nasıl iyileştirebileceği hakkında daha fazla bilgi edinmek için ürün sayfalarımızı ziyaret edin veya kişiselleştirilmiş öneriler için ekibimizle iletişime geçin.
Daha fazla bilgi veya satın alma için şu adresi ziyaret edin: resmi bizBalan.