Biyomedikal araştırma alanında, protein saflaştırması yaşamın gizemlerini keşfetmek için önemli bir teknolojidir. Ancak, geleneksel saflaştırma yöntemleri verimsizlik ve yüksek maliyetlerle mücadele eder; özellikle yapısal biyoloji araştırmalarının odak noktası olan zar proteinleri için. Bu proteinler yapısal olarak karmaşıktır, hücre zarlarında düşük ifade seviyelerine sahiptir ve çevre koşullarına karşı hassastır, bu da saflaştırılmalarını özellikle zorlaştırır. Şimdi, olağanüstü Ar-Ge yeteneklerine sahip Yeasen Biotech, yükseltilmiş Anti-DYKDDDDK(Bayrak) Afinite Jeli (Kedi #20584ES), zorlu membran proteinleri için bile etkili ve kolay protein saflaştırması için güçlü bir araçtır.
Ürün Performansı
1. Yüksek Özgüllük ve Yüksek Bağlanma Kapasitesi: Hedef Protein Yakalama İçin Temel Avantajlar
Yeasen Anti-DYKDDDDK(Bayrak) Afinite Jeli (Kedi #20584ES) yüksek kaliteli fare IgG2b monoklonal antikorlarını %4 yüksek çapraz bağlı agaroz jel ile kovalent olarak birleştirerek hazırlanır. Bu benzersiz üretim süreci ürüne son derece yüksek özgüllük kazandırır ve Flag etiketiyle füzyon proteinlerini hassas bir şekilde tanımasını ve bağlamasını sağlar. Met ( tarafından modifiye edilmiş N-terminal Flag füzyon proteini olsunMet-Bayrak-Protein), N-terminal Bayrak füzyon proteini (Bayrak-Protein), veya C-terminal Bayrak füzyon proteini (Protein-Bayrağı), jel bunları kolaylıkla halledebilir.
Membran protein saflaştırmasında, bu özgüllük özellikle önemlidir çünkü bu proteinler yapısal olarak karmaşıktır ve diğer proteinlerle özgül olmayan bağlanmaya eğilimlidir. Flag jelinin yüksek özgüllüğü, özgül olmayan proteinlerden kaynaklanan girişimi etkili bir şekilde azaltarak saflaştırılmış membran proteinlerinin yüksek saflığını sağlar. Ek olarak, jelin Flag etiketli füzyon proteinleri için yüksek bir bağlanma kapasitesi vardır (en azından 1,1 mg protein/mL jel). Bu, hedef protein düşük seviyelerde ifade edilse bile, Flag jeli kullanılarak yine de verimli bir şekilde yakalanıp saflaştırılabileceği anlamına gelir.
2. Yüksek Saflık ve Yüksek Verim: Aşağı Akış Uygulamalarına Olanak Sağlıyor
Yeasen Anti-DYKDDDDK(Bayrak) Afinite Jeli (Kedi #20584ES) saflaştırmadan sonra oldukça saf protein örnekleriyle sonuçlanan, safsızlıkların minimal spesifik olmayan bağlanmasına sahiptir. Bu, biyoaktivite testleri ve yapısal analiz gibi alt akış uygulamaları için çok önemlidir. Yüksek saflıktaki protein örnekleri daha doğru deneysel veriler sağlar ve araştırmacıların çalışmaları için sağlam bir temel oluşturur.
3. Optimize Edilmiş Deneysel İş Akışı: Protein Saflaştırma Zorluklarını Basitleştirme
Protein saflaştırmasının, özellikle karmaşık zar proteinleri için, proteinlerde yapısal hasar oluşmasını önlemek amacıyla, ılımlı koşullar altında gerçekleştirilmesi gerekir. Yeasen Anti-DYKDDDDK(Bayrak) Afinite Jeli (Kedi #20584ES) bu düşünülerek tasarlanmıştır. Depolama tamponu %50 gliserol içeren TBS pH 7'de.4, hem jelin aktivitesini korur hem de protein saflaştırması için nazik bir ortam sağlar.
Flag jel ile saflaştırma işlemi basit ve etkilidir. 1×Flag peptit elüsyonunun kullanımını kolaylaştırmak için ürün paketi tamamlayıcı bir 1×Flag peptit (Cat#20572ES) içerir. Bu, elüsyon işlemini nazik (proteinlere neredeyse hiç zarar vermeden) ve oldukça kullanışlı (deneysel kolaylığı daha da artıran) hale getirir.
4. Çoklu Boyutlar ve Esnek Kargo Seçenekleri: Çeşitli Deneysel İhtiyaçları Karşılamak
Farklı laboratuvarların değişen ölçeklerini ve ihtiyaçlarını göz önünde bulundurarak Yeasen, Flag jelini aşağıdakiler de dahil olmak üzere çeşitli boyutlarda sunmaktadır: 1 mL, 5 mL, 25 mL ve 100 mL. İster küçük ölçekli ön keşif ister büyük ölçekli protein üretimi olsun, uygun bir seçenek mevcuttur. Büyük hacimli yıllık satın alımlar için müşteriler, aşırı envanter baskısından kaçınırken fiyat indirimlerinden yararlanmalarını sağlayan partiler halinde sevkiyat almayı seçebilirler.
Test Verileri
 | M: Protein İşaretleyicisi 1: Flag-N/Flag-M/Flag-C proteininin kolon öncesi ham örneği 2: Flag-N/Flag-M/Flag-C proteininin kolon sonrası akışı 3: Elüsyon (pH 2.7 elüsyonu) 4: Elüsyon (pH 12 elüsyonu) 5: Elüsyon (1×Bayrak peptit elüsyonu) 6: Saflaştırılmış jel (pH 2.7 elüsyon) 7: Saflaştırılmış jel (pH 12 elüsyonu) 8: Saflaştırılmış jel (1×Bayrak peptit elüsyonu) A：Bayrak-N B：Bayrak-M C：Bayrak-C |
Şekil 1. Yeasen Anti-DYKDDDDK(Bayrak) Afinite Jeli SDS-PAGE'de gösterilen düşük ifadeli proteinler (Flag-N (a), Flag-M (b), Flag-C (c)) için saflaştırma sonuçları.
 | M: Protein İşaretleyicisi 1: Flag-C proteininin kolon öncesi ham örneği 2: Flag-C proteininin kolon sonrası akışı 3: Elüsyon (pH 2.7 elüsyonu) 4: Elüsyon (pH 12 elüsyonu) 5: Elüsyon (1×Bayrak peptit elüsyonu) 6: Saflaştırılmış jel (pH 2.7 elüsyon) 7: Saflaştırılmış jel (pH 12 elüsyonu) 8: Saflaştırılmış jel (1×Bayrak peptit elüsyonu) A：Yeasen B：Marka S* C：Marka G* |
Figür 2. Yeasen (a) ile KarşılaştırılmasıBrand S* (b) ve Brand G* (c) SDS-PAGE'de gösterilen düşük ifadeli proteinlerin (örneğin, membran proteinleri) saflaştırılmasında Anti-Flag jelleri.
Sonuçlar:
1. Yeasen Anti-DYKDDDDK(Bayrak) Afinite Jeli (Kedi #20584ES) yüksek özgüllüğe sahiptir ve çeşitli pozisyonlardaki Flag etiketlerine bağlanabilir (N-terminal Flag füzyon proteinleri, Met-modifiyeli N-terminal Flag füzyon proteinleri, C-terminal Flag füzyon proteinleri).
2. Son derece düşük hedef protein ifadesi koşulları altında (örneğin, membran proteinleri), Yeasen Anti-DYKDDDDK(Bayrak) Afinite Jeli (Cat#20584ES) rakiplerine kıyasla önemli ölçüde daha yüksek verim ve saflık elde eder. Yeasen kullanımı Elüsyon için tamamlayıcı 1×Flag peptidi (Cat#20572ES) daha iyi sonuçlar sağlar.
Bayrak Etiketli Füzyon Proteinleri için Tam Çözümler:
Rekombinant Enterokinaz (Cat#20395ES): Dört aspartik asitten önce gelen lizinin karboksil ucunu kesen spesifik bir proteaz: Asp-Asp-Asp-Asp-Lys. Bu dizi, oktapeptit Flag etiketinin (DYKDDDDK) bir parçasıdır. Rekombinant Enterokinaz (rEK), füzyon proteinlerinden Flag etiketini kolayca kaldırabilir ve bu da onu doğal proteinlerin yapısını ve işlevini incelemek için ideal bir araç haline getirir.
Anti-DYKDDDDK(Bayrak) MagBeads (Kedi #20565ES): Yüksek kaliteli fare anti-DYKDDDDK (Flag) monoklonal antikorlarının silika bazlı manyetik boncuklarla kovalent olarak birleştirilmesiyle hazırlanan polimer manyetik mikroküreler (çap ile ilgili 200 nm). Bu boncuklar, Flag etiketli proteinlerin immünoçöktürülmesi (IP) veya ko-immünoçöktürülmesi (Co-IP) için uygundur.
Ürün Bilgileri
| Ürün Adı | Ürün Numarası | Şartname |
| 1 ml/5 mL/25 mL | ||
| Mayada Ekspresyon Gösteren Rekombinant Sığır Enterokinazı, His | 100 Sen/500 5000 yaş altı | |
| Anti-DYKDDDDK(Bayrak) MagBeads | 1 ml/5 ml |