Tanım
Ürün Açıklaması
2×Hieff Canace™ Plus PCR Master Mix (Boya ile) Hieff Canace içeren kullanıma hazır 2x önceden karıştırılmış bir solüsyondur™ Artı Yüksek Sadakat DNA Polimerazı, dNTP'ler ve optimize edilmiş bir tampon sistemi. Karışım, oda sıcaklığında polimeraz aktivitesini ve 3'→5' ekzonükleaz aktivitesini inhibe eden iki monoklonal antikor içerir ve son derece spesifik Sıcak Başlangıç PCR'sine olanak tanır. Uzatma faktörlerinin eklenmesi, hedef parçaların 13 kb'ye kadar olduğu uzun parçalı amplifikasyona olanak tanır. Bu enzim, Taq DNA polimerazının 83 katı ve sıradan Pfu DNA polimerazının 9 katı sadakatle 5'→3' DNA polimeraz aktivitesi ve 3'→5' ekzonükleaz aktivitesi sergiler. Karmaşık şablonları çoğaltmak ve kör uçlu PCR ürünleri üretmek için uygundur.
2×Hieff Canace™ Plus PCR Master Mix (Boya ile) basitlik, yüksek hassasiyet, güçlü özgüllük ve mükemmel stabilite gibi avantajlar sunar. Reaksiyon sistemi yalnızca primer ve şablon eklenmesini gerektirir ve prosedürü basitleştirmek ve zamandan tasarruf etmek için iki adımlı bir PCR protokolü kullanılabilir. Ürün, jel analizi için PCR ürünlerinin doğrudan yüklenmesine olanak tanıyan elektroforez izleme boyası içerir. Ek olarak, tekrarlanan dondurma-çözme döngülerinden sonra bile stabil aktivite sağlayan özel bir koruyucu madde içerir.
Özellikler
| Kedi.NO. | 10154ES01 / 10154ES03 / 10154ES08 / 10154ES60 |
| Boyut | 100 μL / 1 mL / 5×1 mL / 100×1 mL |
Depolamak
Bu ürün -25~-15℃'de saklanmalıdır. 1 Yıllar.
Talimatlar
1. Önerilen PCR reaksiyon sistemleri.
| Bileşenler | Hacim（μL） | Son konsantrasyon |
| 2× Üstat Canace™ Artı PCR Master Mix (Boya ile)* | 25 | 1× |
| Şablon*** | X | - |
| İleri Primer（10 μmol/L）** | 2 | 0.4 μmol/L |
| Rher yerde Primer（10 μmol/L）** | 2 | 0,4 μmol/L |
| gdH2O | 50'ye kadar | - |
*Karışımın 1× son konsantrasyonu 1 U/50 μL polimeraz, 2 mmol/L Mg içerir2+ve 200 μmol/L dNTP'ler.
**PCR reaksiyonunda primerlerin önerilen son konsantrasyonu 0,2-1 μmol/L'dir, 0,4 μmol/L tercih edilir.
***25 μL reaksiyon sistemi için önerilen şablon miktarları:
| Şablon Türü | Parça Boyutu (1 kb-10 kb) |
| Genomik DNA | 50 ng-200 ng |
| Plazmit veya Viral DNA | 10 sayfa-20 ng |
| cDNA | 1-2,5 μL (toplam PCR hacminin 1/10'unu aşmayan) |
2. Tepki programı.
1)İki Adımlı Protokol (Tercih Edilen):
| Döngü adım | Temp. | Zaman | Döngüler |
| İlk denatürasyon | 98℃ | 3 dakika | 1 |
| Denatürasyon | 98℃ | 10 saniye | 30-35 |
| Eklenti | 68℃ | 30 saniye/kb | |
| Filk vegenişleme | 72℃ | 5 dakika | 1 |
2)Üç Adımlı Protokol (Konvansiyonel):
| Döngü adım | Temp. | Zaman | Döngüler |
| İlk denatürasyon* | 98℃ | 3 dakika | 1 |
| Denatürasyon | 98℃ | 10 saniye | 30-35 |
| Tavlama** | 60℃ | 20 saniye | |
| Eklenti*** | 72℃ | 30 sn/kb | |
| Filk vegenişleme | 72℃ | 5 dakika | 1 |
*İlk Denatürasyon: 98°C'de 3 dakika (yüksek GC şablonları için 5-10 dakika) önerilir.
**Tavlama: 60°C'de 20 saniye önerilir (10-30 saniye arasında ayarlanabilir). Uzun süreli tavlama jellerde lekelenmeye neden olabilir.
***Uzatma: 72°C'de 30 sn/kb önerilir (karmaşık şablonlar için 60 sn/kb'ye kadar).
3)Gradient Annealing Protokolü (Zor Hedefler İçin Önerilir):
| Döngü adım | Temp. | Zaman | Döngüler |
| İlk denatürasyon | 98℃ | 3 dakika | 1 |
| Denatürasyon | 98℃ | 10 saniye | 15 (döngü başına 1°C azalma) |
| Gradyan Tavlama | 70-55°C | 20 saniye | |
| Eklenti | 72℃ | 30 sn/kb | |
| Denatürasyon | 98°C | 10 saniye | 20 |
| Tavlama | 55°C | 20 saniye | |
| Eklenti | 72°C | 30 sn/kb | |
| Filk vegenişleme | 72℃ | 5 dakika | 1 |
4)Farklı PCR Protokollerinin Özellikleri:
| Protokol Türü | Hız | Özgüllük | PCR Verimi | Tespit Oranı |
| İki Adımlı | En hızlı | Yüksek | Orta | Yüksek |
| Üç Adımlı | Orta | Orta | En yüksek | Orta |
| Gradyan Tavlama | Yavaş | Yüksek | Orta | Yüksek |
Notlar
1.Bu ürün yalnızca araştırma amaçlıdır.
2. Lütfen laboratuvar önlükleri ve tek kullanımlık eldivenlerle çalışın.，Güvenliğiniz için.
Ödeme ve Güvenlik
Ödeme bilgileriniz güvenli bir şekilde işlenir. Kredi kartı ayrıntılarını saklamıyoruz veya kredi kartı bilgilerinize erişimimiz yok.
Sorgu
Ayrıca sevebilirsiniz
SSS
Ürün yalnızca araştırma amaçlıdır ve insanlarda veya hayvanlarda terapötik veya teşhis amaçlı kullanım için tasarlanmamıştır. Ürünler ve içerikler, Yeasen Biotechnology'nin sahip olduğu patentler, ticari markalar ve telif haklarıyla korunmaktadır. Ticari marka sembolleri, tüm bölgelerde tescilli olmayıp, menşe ülkesini gösterir.
Bazı uygulamalar üçüncü tarafların ek fikri mülkiyet haklarına ihtiyaç duyabilir.
Yeasen, araştırmalarımızın güvenlik ve etik standartları sağlarken kritik soruları ele alması gerektiğine inanarak etik bilime kendini adamıştır.